急性淋巴细胞白血病患儿维持治疗期间6-巯基嘌呤使用剂量与TPMT和NUDT15基因多态性的关系

背景6-巯基嘌呤(6-MP)是急性淋巴细胞白血病(ALL)维持治疗最主要的药物之一,代谢酶基因多态性与药物的骨髓抑制程度有关。目的探讨ALL患儿维持治疗期间6-MP使用剂量与TPMT和NUDT15基因多态性的关系。设计回顾性队列研究。方法纳入2020年1月至2021年12月于郑州大学第一附属医院明确诊断为ALL、经前期化疗骨髓达完全缓解、进入维持治疗阶段且口服6-MP治疗的患儿。口服6-MP前患儿行TPMT和NUDT15基因型检测,分析TPMT、NUDT15不同基因型患儿应用6-MP治疗的使用剂量和骨髓抑制情况。主要结局指标6-MP使用剂量。结果61例维持治疗的ALL患儿纳入本文分析。纳入TPMT基因多态性统计分析的ALL患儿48例(除外NUDT15基因突变13例),野生型45例,突变型3例;纳入NUDT15基因多态性统计分析的ALL患儿58例(除外TPMT基因突变3例),CC型45例,CT型9例,TT型4例。在6-MP维持治疗阶段,TPMT和NUDT15不同基因型患儿的WBC、Hb、PLT计数差异均有统计学意义(均P<0.05)。患儿用药后出现不同程度的中性粒细胞减少,包括TPMT野生型15例,突变型3例;NUDT15基因CC型15例,CT型5例,TT型4例;TPMT和NUDT15不同基因型患儿骨髓抑制情况差异均有统计学意义(均P<0.05)。TPMT和NUDT15不同基因型患儿6-MP使用剂量差异有统计学意义(均P<0.05),TPMT野生型和突变型ALL患儿维持治疗期6-MP使用剂量分别为(40.81±6.02)和(16.25±4.42)mg·m^(-2)·d^(-1);NUDT15基因CC型、CT型和TT型6-MP使用剂量分别为(40.81±6.02)、(34.28±4.53)和(10.00±1.28)mg·m^(-2)·d^(-1)。结论TPMT和NUDT15突变型患儿的骨髓抑制程度均较野生型严重。ALL患儿维持治疗期间6-MP使用剂量与TPMT和NUDT15基因多态性相关。

6-巯基嘌呤结肠黏附缓释微丸的处方筛选及体外释放的研究

目的:制备6-巯基嘌呤结肠黏附缓释微丸,并对释药特性进行研究。方法:以羟丙甲基纤维素K4M和卡波姆为黏附性骨架材料,乳糖为赋形剂。采用湿法制粒包衣锅滚圆法制备载药微丸,并进行Eud-ragit S100包衣。采用正交试验设计进行处方筛选,确定生物黏附材料HPMC、卡波姆的用量及配比与制剂体外释放度的关系。结果:所得微丸的制备工艺简单,微丸大小均匀,能达到缓释12 h的试验设计要求。结论:HPMC、卡波姆的用量及配比对释药速率均有较大影响。优选处方微丸的释药特性符合设计要求。

急性淋巴细胞白血病患儿对6-巯基嘌呤耐受性的差异分析

目的观察急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿在维持化疗期间对6-巯基嘌呤(6-MP)的耐受性,为进一步研究6-MP耐受性差异的原因提供依据。方法规范应用2006年全国ALL统一化疗方案的标准危险ALL患儿30例,均处于骨髓缓解期,维持化疗时间≥3个月,记录患儿服用6-MP后的外周血变化,并及时记录其调整用量的时间。结果 30例患儿6-MP维持化疗时间3～16个月,其中10例(33.3%)完成标准剂量全疗程,无骨髓抑制发生,未继续增加或减少6-MP的剂量;8例(26.6%)患儿出现重度骨髓抑制,对6-MP重度不耐受,平均停药5d,减为标准剂量的2/3后维持治疗;12例(40.0%)患儿出现轻度不耐受,减为标准剂量的1/3～1/4维持治疗。30例患儿随访至2010年1月1日,均处于无病生存状态,无因感染死亡病例,目前无复发病例。结论 ALL患儿不同个体间6-MP的耐受性差异较大,临床需要根据血常规调整6-MP剂量,确保安全用药,分析ALL患儿6-MP个体耐受差异的原因,指导临床安全用药。

巯嘌呤甲基转移酶活性对硫唑嘌呤中间代谢物6-巯基嘌呤药动学的影响

目的通过对硫唑嘌呤中间代谢物6-巯基嘌呤(6-mercaptopurine,6-MP)药动学的研究,初步探讨巯嘌呤甲基转移酶(thiopurine methyltransferase,TPMT)活性对6-MP药动学的影响。方法根据红细胞中TPMT活性,受试者分成高酶活性组[(14.52±2.10)μmol.h-1.L-1RBCs,n=16]和低酶活性组[(7.02±2.44)μmol.h-1.L-1RBCs,n=4]。受试者早晨空腹口服硫唑嘌呤100 mg,8 h动态采集静脉血,HPLC测定血浆中6-MP浓度,采用WinNonlin程序进行房室模型拟合及药动学参数计算。结果:6-MP药动学符合一室模型特点,6-MP血浆浓度较低,高酶活性组和低酶活性组ρmax分别是(0.048 3±0.024 3)和(0.039 1±0.010 8)mg.L-1;两组AUC分别是(0.132 0±0.047 2)和(0.093 2±0.012 5)mg.h.L-1;6-MP半衰期短,分别是(1.09±0.65)和(1.25±1.05)h;6-MP表观分布容积大,两组Vd/F分别是(625.63±258.82)和(949.83±670.27)L。高酶活性组和低酶活性组在tmax和tlag存在显著性差异(P<0.05),而Ka,ρmax,AUC,Ke,t1/2,Vd/F,CL/F等药动学参数无显著性差异(P>0.05)。结论由于6-MP代谢的复杂性及独特的组织分布特性,使得TPMT活性对6-MP药动学的影响变得不明显,目前还不能借助6-MP药动学来推测硫唑嘌呤的治疗效果和毒性情况。

高效液相色谱法测定血浆6-巯基嘌呤质量浓度及其药动学

目的：建立血浆中硫唑嘌呤的活性代谢物6-巯基嘌呤质量浓度测定的高效液相色谱分析方法，并研究了6-巯基嘌呤人体药动学。方法：6-巯基嘌呤血浆样品经乙腈沉淀蛋白并行萃取，进一步将有机层吹干富集药品。Hypersil C18柱（4．6mm×150mm，5μm），流动相为乙腈一水（含0．25％醋酸）（3：97），流速1．0mL·min^-1，柱温30℃，检测波长323nm。结果：6-巯基嘌呤在2～200μg·L^-1范围内线性关系良好（r=0．9997），血浆最低检测限度为2μg·L^-1。高、中、低质量浓度（200，50，5μg·L^-1，）的日内及日间RSD均小于8．52％，平均方法回收率分别为98．1％，101．6％和100．8％，平均提取回收率分别为90．2％，94．9％和91）．90％。人体药动学研究表明，口服硫唑嘌呤后6-巯基嘌呤的药一时曲线符合一级吸收的一房室模型。结论：此法灵敏、专一、准确、精密、简便，适用于药动学研究及治疗药物质量浓度监测。

6-巯基嘌呤-H_2O_2-Cu^(2+)-NaOH体系荧光分光光度法测定6-巯基嘌呤的研究

在碱性介质中,6-巯基嘌呤(6-MP)与过氧化氢反应可在405 nm波长处产生微弱的荧光,微量铜(Ⅱ)的存在能大大增敏其荧光强度。据此,建立了一种高灵敏测定6-MP的荧光光度分析新方法。在优化的条件下,体系的荧光强度与6-MP的浓度在2.1×10-8~1.7×10-5mol.L-1范围内呈线性关系,检出限为7.1×10-9mol.L-1。方法用于片剂中6-MP含量的测定,其结果与药典方法对照,令人满意。

超高效液相色谱-串联质谱法测定6-巯基嘌呤血浆药物浓度方法的建立与评价

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测人血浆中6-巯基嘌呤(6-MP)的浓度,为临床制定个体化给药方案提供基础。方法使用Waters公司超高效液相色谱(I-Class)-质谱(TQ-S)联用仪,以Waters ACQUITY BEH HILIC(2.1 mm×50 mm,1.7μm)为色谱柱,pH 3.0,0.02 mol/L醋酸铵缓冲液(含0.3%HCOOH)-乙腈(20∶80)为流动相,流速0.4mL/min,以6-硫鸟嘌呤(6-TG)为内标,乙腈沉淀蛋白,取4μL上清液进样分析。采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z153.03→119.1(6-MP)和m/z 168.06→134.13(6-TG)。结果 6-MP血浆浓度在0.5~2 000ng/mL内线性关系良好(r=0.998 9),定量下限为0.125ng/mL。日内、日间RSD<6%,方法回收率89%~104%(RSD<6%),提取回收率>95%(RSD<8%)。血浆中6-MP在室温避光保存6h,冻融3次和-20℃保存15d的RSD分别为<4.66%、4.74%和5.11%。结论该方法操作简单、快速、灵敏度高、稳定性强,适用于血浆中6-MP药物浓度监测。

Cd^(2+)和Zn^(2+)盐对6-巯基嘌呤室温磷光影响的研究

目的 :探讨了重原子盐Cd(Ac) 2 和Zn(Ac) 2 对 6 -巯基嘌呤室温磷光 (RTP)的影响。方法 :配制一定浓度的 6 -巯基嘌呤溶液 ,选择不同的固体基质及酸度条件 ,测 2种重原子Cd2 + 、Zn2 + 盐存在下RTP。结果 :适宜固体基质为滤纸 ,pH范围 1～ 8有较强的RTP信号 ,Cd(Ac) 2 、Zn(Ac) 2 对 6 -巯基嘌呤RTP有较强增敏作用。以Cd(Ac) 2 溶液作重原子微扰剂时 ,6 -巯基嘌呤的线性范围为 6× 10 -7～ 1× 10 -3 mol·L-1,检出限为每斑点 6 5ng ;以Zn(Ac) 2 溶液作重原子微扰剂时 ,6 -巯基嘌呤的线性范围为 6× 10 -7～ 1× 10 -3 mol·L-1,检出限为每斑点 4 8ng。 结论 :Cd(Ac) 2 、Zn(Ac) 2 可诱导 6 -巯基嘌呤产生强的RTP ,且Cd(Ac) 2 检出限优于Zn(Ac) 2 。本方法简便 ,快速 ,选择性好 ,线性范围宽 ,检出限低 。

流动注射-化学发光法测定片剂、人血清及尿液中6-巯基嘌呤的含量

目的:研究6-巯基嘌呤-高锰酸钾-甲醛-多聚磷酸体系的化学发光行为与机理,建立流动注射-化学发光法测定片剂、人血清与尿液中6-巯基嘌呤的含量。方法:采用6-巯基嘌呤-高锰酸钾-甲醛-多聚磷酸化学发光体系,基于化学发光强度与浓度间的线性关系对6-巯基嘌呤加以定量测定。结果:校准曲线的线性范围为1.0×10^(-8)～1.0×10^(-5)g·mL^(-1),检出限为6×10^(-9)g·mL^(-1);对2.0×10^(-7)g·mL^(-1)6-巯基嘌呤进行11次平行测定,RSD 为1.7%;片剂、人血清和尿液加样回收率在95.0%～111.3%范围内,RSD 为1.8%～2.2%。结论:本方法简便、灵敏、可靠,可用于6-巯基嘌呤的常规检测及药代动力学研究。

Cu(phen)_2^(2+)-H_2O_2-6-巯基嘌呤化学发光体系测定6-巯基嘌呤

基于 6 -巯基嘌呤 (6 -MP)对Cu(phen) 2 +2 -H2 O2 体系化学发光具有较强的抑制作用 ,建立了化学发光测定 6 -MP的新方法 .该方法线性范围为 2 .0× 10 - 7- 9.0× 10 - 6 g/mL ,检出限为6 .2× 10 - 8g/mL ,对 1.0× 10 - 6 g/mL 6 -MP7次平行测定的相对标准偏差为 2 .9% ,用于药物乐疾宁中 6 -MP的测定 ,回收率为 95 - 10 3% 。

巯基嘌呤甲基转移酶基因多态性与急性淋巴细胞白血病6-巯基嘌呤化疗不良反应关系的Meta分析

目的 ：探讨巯基嘌呤甲基转移酶（thiopurine methyltransferase,TPMT）基因多态性与急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）6-巯基嘌呤（6-mercaptopurine,6-MP）化疗时不良反应的关系。方法：检索ALL不同TPMT基因多态性患者6-MP化疗不良反应的人数为效应指标的相关文献,选择符合入选标准的文献,应用Stata11.0软件对研究结果进行异质性检验和效应值合并,并进行敏感性分析和偏倚评估。结果：纳入TPMT基因多态性与ALL不良反应的文献共5篇,共计病例426例。白细胞减少与TPMT基因多态性关系固定效应模型OR=4.55,95%CI：1.92~10.80;肝脏损害与TPMT基因多态性关系固定效应模型OR=2.63,95%CI：1.40~4.93。结论：TPMT基因多态性与6-MP治疗所引起的白细胞减少、肝脏损害等不良反应显著相关,更可靠的结论尚需大样本进行进一步研究。

功能化碳纳米管的电化学性质及在6-巯基嘌呤分析检测中的应用

采用修饰单壁碳纳米管(SWNT、SWNT-COOH或SWNT-OH)及多壁碳纳米管(MWNT、MWNT-COOH或MWNT-OH)的石墨电极研究配位阴离子[Fe(CN)6]3-和配位阳离子[Co(phen)3]3+的电化学行为与吸附性能,借助[Co(phen)3]3+在碳纳米管(CNT)的强吸附特性制备[Co(phen)3]3+/CNT/C修饰电极,以其应用于6-MP的分析检测.结果表明:1)在CNT修饰电极上[Fe(CN)6]3-/4-呈现很好的氧化还原可逆性,而[Co(phen)3]3+则显示明显的吸附控制特征.2)[Co(phen)3]3+在多壁碳纳米管修饰电极上的吸附量较单壁碳纳米管大,但经羧基化或羟基化后,吸附量减小,而且在羧基化表面的吸附量较羟基化的大.3)[Co(phen)3]3+与6-MP间存在明显的相互作用,其配位产物的还原峰电流与6-MP浓度呈线性关系.

旋转铂盘电极上Cu(phen)_2^(2+)与6-巯基嘌呤的相互作用

在Tris-NaC1*(pH=7.2)缓冲溶液中,应用循环伏安法,微分脉冲伏安法、旋转圆盘电极实验、交流阻抗法及其数据模拟等技术研究了Cu(phen)2+25(phcn=1.10-邻菲咯啉)与6-巯基嘌呤(6-MP)的相互作用.结果显示.Cu(phen)2+2MP与6-MP无论在扩散控制过程或电化学控制过程都发生了相互作用.Cu(phen)2+2及其与6-MP的作用产物于铂电极上均呈现一对氧化还原峰,但后者呈现的氧化还原峰负移.峰电流减小.交流阻抗结果显示,无论6-MP存在与否,Cu(phen)2+2在交流阻抗谱上均呈现两个清晰的电容弧,但当6-MP存在时,电化学反应电阻和电化学吸脱附电阻均增大.Cu(phen)2+2在不同转速下的阻抗拟合结果显示.随转速增大.电化学反应电阻和电化学吸脱附电阻均减小.双电层电容呈增大趋势,而吸脱附电容呈减小趋势:当6-MP存在时.仍然呈现此变化规律.

抗癌药物6-巯基嘌呤与DNA相互作用的电化学研究

用循环伏安法、示差脉冲伏安法和紫外光谱法研究了抗癌药物6-巯基嘌呤与DNA的相互作用.在pH 5.6的乙酸缓冲溶液中,两者以静电形式结合形成1:1的缔合物,其缔合物为非电活性化合物,结合常数是5.17×106.同时对DNA与6-MP电极过程机理进行了研究,并求得了电极过程动力学参数.

抗癌药物6-巯基嘌呤在悬汞电极上的电分析方法及其电极过程机理研究

本文采用多种电化学方法研究了6 巯基嘌呤(6 MP)在悬汞电极上的伏安行为。在磷酸盐缓冲溶液(pH7.4)中,6 MP在悬汞电极上有一对受吸附控制的氧化还原峰,还原峰峰电位EP=-0.318V;氧化峰峰电位EP=-0.235V.用多种电化学手段对该氧化还原反应进行了研究,建立了对应的电化学分析方法并对乐疾宁药片中6 MP含量作定量分析及回收率的测定,结果令人满意。

6-巯基嘌呤筛选L-组氨酸产生菌株

目的:为得到L-组氨酸的高产菌株。方法:以谷氨酸棒杆(Corynebacterium glutamicum)S6为出发菌株,利用亚硝基胍进行多次诱变。结果:在6-巯基嘌呤(MP)的抗性梯度平板上挑取正突变菌株,发酵,最终挑出一株N13(MPr),可积累L-组氨酸561mg/L,比出发菌株提高45.34%。结论:利用结构类似物抗性平板MP筛选L-his高产菌株是可行的。

6-巯基嘌呤自组装膜的制备及其电化学行为表征

采用循环伏安法、微分脉冲伏安法、计时库仑法研究了 6 -巯基嘌呤自组装膜的制备和电化学表征以及组装时间对 6 -巯基嘌呤自组装膜电化学行为的影响。结果表明 :6 -巯基嘌呤可以在金电极上形成自组装膜 ,并且随着组装时间的增长 ,[Fe(CN) 6 ]3- / [Fe(CN ) 6 ]4 - 体系在 6 -巯基嘌呤修饰金电极上的反应峰电流增大 ,而反应的氧化还原电位和条件电位均发生负移 ;循环伏安和计时库仑数据分析得出 6 -巯基嘌呤修饰金电极在 0 .2 mol/ L KCl溶液中的双层电容随组装时间的增长而减小。当组装时间达到 12 0 min时 ,6 -巯基嘌呤自组装膜基本达到稳定。

双嘧达莫对胰腺癌细胞内抗肿瘤药物6-巯基嘌呤浓度的影响及6-巯基嘌呤的荧光分光光度法测定

建立了细胞内抗肿瘤药物6 巯基嘌呤的荧光光度分析新方法,系统地研究了在KMnO4氧化条件下酸度、温度、时间等因素对6 巯基嘌呤相对荧光强度的影响。在荧光激发波长310nm和发射波长413nm下,溶液中6 巯基嘌呤的荧光强度与其浓度在4.0×10-11～4.0×10-6mol L范围内呈良好的线性关系,方法的检出限为8.2×10-12mol L。用建立的方法研究了不同浓度核苷载体阻断剂(双嘧达莫)对胰腺癌细胞内6 巯基嘌呤浓度的影响情况。统计学检验结果表明,细胞膜上核苷载体的阻断能提高细胞内抗肿瘤药物的浓度。