基于VP6蛋白的牛轮状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用

为了建立牛轮状病毒(BRV)血清抗体的检测方法,从病料中克隆牛轮状病毒VP6基因,构建其表达载体,利用原核表达技术表达重组VP6蛋白,建立牛轮状病毒血清抗体间接ELISA检测方法。结果显示,重组VP6蛋白大小为40 ku,以包涵体形式表达,Western blot证实重组VP6蛋白有良好的反应原性;以4μg/mL浓度的抗原包被酶标板,一抗血清50倍稀释,酶标二抗稀释10000倍稀释,为最佳工作条件,阴阳临界值为0.233,表明该方法具有良好的特异性和敏感性。建立的检测BRV抗体的间接ELISA可用于临床BRV感染的检测。

核糖体S6蛋白激酶4基因在多种肿瘤中的表达及其生物信息学分析

目的探讨在不同肿瘤细胞中核糖体S6蛋白激酶4(ribosomal protein S6 kinase 4,RSK4)的表达谱是否存在差异,以及预测可能存在的蛋白亚型及其生物学特性。方法提取神经胶质瘤细胞GL261、卵巢癌细胞ID8、乳腺癌细胞4T1和168FARN、结肠癌细胞mc38和CT26、胃癌细胞MFC和肺癌细胞LLC1的RNA,采用RT-PCR技术检测RSK4的表达及其剪接异构体,生物信息学分析RSK4的生物学特征及其功能。结果RT-PCR结果显示在GL261、4T1、mc38、CT26、MFC和LLC1中均表达RSK4,且不同的肿瘤细胞中表达了多个剪接异构体,开放阅读框分析RSK4可能至少编码11个蛋白亚型;二级结构分析显示,这些剪接异构体编码的蛋白亚型均由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲组成,且保守结构域均相同;蛋白互作网络富集分析显示,RSK4主要通过mTOR信号通路和突触持续增强等信号通路在核质和胞浆中发挥激酶的活性。结论RSK4在不同的肿瘤细胞中存在不同的表达谱,可能产生多种氮端不同的蛋白异构体,能够通过多种信号通路参与不同的生物学途径。

NDUFS6蛋白生物信息学分析及过表达质粒的构建与鉴定

目的 应用生物信息学方法分析线粒体呼吸链复合体Ⅰ结构亚基烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(泛素)铁硫蛋白6(NDUFS6)的理化性质,构建pCV702-NDUFS6过表达质粒并进行鉴定,为进一步研究NDUFS6蛋白功能奠定基础。方法 利用Expasy、UniProtKB、NCBI、SOPMA等生物信息学工具分析NDUFS6蛋白的理化性质、二级结构等;根据NDUFS6 cDNA序列构建携带NDUFS6基因的过表达质粒pCV702-NDUFS6,转染大鼠心肌细胞H9C2,并设置阴性对照(NC)组和相应空载体CON520作为阳性对照(PC)组,经嘌呤霉素筛选后,采用RT-qPCR和Western blot检测NDUFS6 mRNA和蛋白表达水平。结果 NDUFS6蛋白由116个氨基酸组成,理论等电点pI为9.37。蛋白二级结构以无规则卷曲(占50%)为主。酶切鉴定和基因测序结果显示,pCV702-NDUFS6表达质粒构建成功。RT-qPCR和Western blot结果显示,相较于NC组和PC组,过表达组NDUFS6表达水平均上调(P均<0.05)。结论 成功构建了能在心肌细胞H9C2中有效过表达NDUFS6基因的过表达质粒。

牛HSPA6蛋白特性分析及蛋白互作网络构建

通过构建牛热休克蛋白A6(heat shock protein A6,HSPA6)序列与其他生物的系统进化树,以及运用生物信息学方法分析牛HSPA6蛋白的基本理化性质、亲疏水性等,并结合蛋白互作网络,探究牛HSPA6基因编码蛋白的结构和功能特性。结果显示,牛HSPA6蛋白与羊、长江江豚等哺乳动物的氨基酸序列相似性较高;牛HSPA6蛋白分子质量为70 570.64 u,理论等电点为5.66,为酸性亲水性蛋白,无跨膜结构和信号肽;可能存在11个得分>0.900的磷酸化位点,与N-糖基化激活位点可能位于后端碱基;牛HSPA6蛋白是一种主要由40.38%的α-螺旋和33.65%的无规卷曲组成的二级结构相对稳定的蛋白质,包含N-端核苷酸结合域和C-端多肽结合域两个主要的结构域,主要在细胞质中发挥作用;蛋白质互作网络构建结果显示,牛HSPA6蛋白主要与BAG1、DNAJA4、DNAJB1、DNAJC2等蛋白发生互作,参与腺苷酸交换因子活性、ATP酶调节活性、伴侣绑定等,表明牛HSPA6蛋白在牛机体能量代谢等过程中发挥潜在生物学功能。这些多重生物信息学分析为深入探讨牛HSPA6蛋白对肉品质的影响机制提供了理论依据。

SPP1、DEC1、C1QTNF6蛋白与口腔鳞状细胞癌患者临床病理指标及预后的关系

目的:探讨口腔鳞状细胞癌患者血清重组人分泌型磷蛋白1(SPP1)、软骨分化的表达基因1(DEC1)和补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(C1QTNF6)的表达水平与其临床病理指标及预后的关系。方法:免疫组织化学染色法和电化学发光免疫分析法检测88例口腔鳞状细胞癌患者癌组织和血清中SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白的表达水平;Pearson相关性分析和Kaplan-Meier生存分析法分析患者血清SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白表达水平与其临床病理指标的相关性和对患者预后的影响。多因素Cox回归法分析影响口腔鳞状细胞癌患者预后的危险因素。结果:免疫组织化学染色结果显示口腔鳞状细胞癌患者癌组织中SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白的阳性表达率较癌旁组织分别增加了1.94、2.98和2.35倍(P<0.05或P<0.01);电化学发光免疫分析法结果显示口腔鳞状细胞癌患者血清SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白表达水平较正常人分别上调了8.61、6.20和4.03倍(P<0.05或P<0.01);Pearson相关性分析结果显示患者血清SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白表达水平与患者发生多灶嗜神经侵犯、肿瘤浸润程度、淋巴结转移、较高的TNM分期呈正相关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,血清SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白高表达水平的口腔鳞状细胞癌患者总生存率低;多因素Cox回归分析结果表明多灶嗜神经侵犯、肿瘤高浸润度、淋巴结转移和高的TNM分期是影响预后的危险因素(P<0.05)。结论:口腔鳞状细胞癌患者癌组织和血清中SPP1、DEC1和C1QTNF6蛋白表达水平升高,且与患者发生多灶嗜神经侵犯、肿瘤浸润和淋巴结转移、较高的TNM分期呈正相关,而与患者预后呈负相关。

甲状腺癌中S100A6蛋白的表达意义

目的:探讨S100A6蛋白在甲状腺癌组织中的表达及临床意义,为临床评估病情提供有利依据。方法:选取本院2016年8月至2021年8月收治的120例甲状腺癌患者作为研究组,选取同期120例甲状腺良性结节患者作为对照组,取石蜡切片行免疫组织化学染色,检测S100A6蛋白的表达水平。结果:甲状腺良性结节与乳头状癌、髓样癌以及滤泡状癌在S100A6蛋白表达阳性率分别为12.50%、81.25%、30.00%和13.46%。由表2可见,通过两两比较发现,甲状腺良性结节与乳头状癌中,其阳性率经统计学分析有统计学意义(P<0.05);甲状腺良性结节与髓样癌的阳性率比较,经统计学分析有统计学意义(P<0.05);甲状腺良性结节与滤泡状癌阳性率比较,经统计学分析无统计学意义(P>0.05)。而甲状腺乳头状癌、髓样癌与滤泡状癌的阳性率比较,经统计学分析,有统计学意义(P<0.05)。结论:S100A6蛋白在甲状腺乳头状癌组织中高表达,可将其作为生物学的重要指标,同时S100A6蛋白也可作为甲状腺癌是否发生转移的预测指标。

MCM7和CDC6蛋白表达与肝细胞癌病理特征的相关性

目的探讨微染色体维持蛋白7(MCM7)和细胞分裂周期蛋白6(CDC6)与肝细胞癌病理特征的相关性。方法选取68例原发性肝细胞癌患者,分别取癌组织和癌旁组织,采用免疫组化染色(SP)法检查MCM7和CDC6表达,比较癌组织及癌旁组织中MCM7阳性检出率及CDC6高表达占比;分析不同临床病理特征的肝细胞癌患者MCM7阳性占比及CDC6高表达占比,采取多因素logistics回归分析MCM7阳性、CDC6高表达的危险因素;3年院外随访,记录癌组织MCM7阳性及CDC6高表达患者术后3年存活率。结果癌组织内MCM7阳性检出率及CDC6高表达占比高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄及乙肝抗原(HBsAg)阳性患者的MCM7阳性检出率及CDC6高表达占比差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤直径≥5 cm、肿瘤淋巴结转移(TNM)分期Ⅲ~Ⅳ期、分化程度低分化、血清甲胎蛋白(AFP)≥400μg/L、有卫星结节患者的MCM7阳性检出率及CDC6高表达占比较高,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤直径≥5 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、HBsAg阳性、血清AFP≥400μg/L、有卫星结节是MCM7阳性和CDC6高表达的危险因素(P<0.05);所有患者均获得3年院外随访,3年死亡率38.24%(26/68),存活率61.76%(42/68);MCM7阳性原发性肝癌患者死亡率44.00%(22/50)、存活率56.00%(28/50),MCM7阴性患者死亡率22.22%(4/18)、存活率83.05%(14/18),Kaplan-Meier生存分析显示癌组织MCM7阳性检出率越高患者存活率越低(P<0.05));CDC6高表达原发性肝癌患者死亡率50.00%(20/40)、存活率50.00%(20/40),CDC6低表达患者死亡率21.43%(6/28)、存活率78.57%(22/28),Kaplan-Meier生存分析显示癌组织CDC6表达越高患者存活率越低(P<0.05)。结论原发性肝细胞癌患者癌组织内MCM7和CDC6与疾病的进展有关,癌组织MCM7阳性及CDC6高表达均会影响患者的3年存活率。

胃癌组织CDK12、SIRT6蛋白表达变化及其与临床病理特征和预后的关系

目的探讨胃癌组织细胞周期蛋白依赖性激酶12(CDK12)、沉默信号调节蛋白6(SIRT6)蛋白表达变化及其与临床病理特征和预后的关系。方法选择胃癌患者75例,取手术切除的胃癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用免疫组化法检测CDK12、SIRT6蛋白表达。分析胃癌组织CDK12、SIRT6蛋白表达与临床病理特征的关系。出院后随访3年,统计患者生存情况,分析胃癌组织CDK12、SIRT6蛋白表达与患者3年生存率的关系。结果胃癌组织CDK12蛋白阳性表达率显著高于癌旁正常组织,SIRT6蛋白阳性表达率显著低于癌旁正常组织(χ2分别为82.986、16.192,P均<0.05)。胃癌组织CDK12、SIRT6蛋白表达与肿瘤临床分期、组织分化程度、脉管侵犯、淋巴结转移、远处转移有关(P均<0.05),与性别、年龄、BMI、Lauren分型、肿瘤直径无关(P均>0.05)。75例胃癌患者中,胃癌组织CDK12蛋白高表达者与低表达者分别为42、33例,3年生存率分别为66.67%(28/42)、90.91%(30/33);胃癌组织SIRT6蛋白阳性表达者与阴性表达者分别为34、41例,3年生存率分别为88.24%(30/34)、68.29%(28/41)。胃癌组织CDK12蛋白高表达者3年生存率显著低于胃癌组织CDK12蛋白低表达者,胃癌组织SIRT6蛋白阳性表达者3年生存率显著高于胃癌组织SIRT6蛋白阴性表达者(χ2分别为6.196、4.217,P均<0.05)。结论胃癌组织CDK12蛋白高表达、SIRT6蛋白低表达,二者表达变化与肿瘤临床分期、组织分化程度、脉管侵犯、淋巴结转移、远处转移等临床病理特征以及患者预后密切相关。

乳腺导管内乳头状瘤及其癌变组织CD44v6蛋白表达的研究

背景与目的:CD44v6是乳腺上皮恶性转化中的一个重要成分,在乳腺良恶性病变中有不同的表达,但其在良恶性病变的鉴别诊断中的价值并没有得到很好的研究。本研究目的是检测CD44v6在乳腺导管内乳头状瘤及导管内乳头状瘤癌变组织中的表达,探讨CD44v6在乳腺导管内乳头状瘤诊断及鉴别诊断中的作用。方法:对49例导管内乳头状瘤、12例导管内乳头状瘤癌变、15例导管内癌、15例浸润性导管癌及20例正常乳腺组织的石蜡切片进行免疫组织化学染色。结果:在正常组织、导管内乳头状瘤、乳头状瘤癌变、导管内癌、浸润性导管癌中,肌上皮细胞(basalepithelialcell)的CD44v6蛋白表达阳性(++/+++)率分别为95.00%、85.72%、66.66%、66.66%、0%,导管内乳头状瘤与乳头状瘤癌变之间无统计学差异(P>0.05);而上皮细胞(luminalepithelialcell)的CD44v6蛋白表达阳性(++/+++)率分别为5.00%、20.41%、83.34%、93.33%、100%,导管内乳头状瘤与乳头状瘤癌变之间有统计学差异(P<0.01)。结论:通过免疫组化检测CD44v6蛋白表达对诊断导管内乳头状瘤是否癌变具有重要参考价值。

轮状病毒Vp6蛋白的免疫荧光检测

目的检测在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的重组轮状病毒(Rotavirus,RV)Vp6蛋白和RV SA11感染的MA104细胞中不同时间表达的Vp6蛋白及其分布规律。方法应用纯化的重组A组人轮状病毒TB-Chen株Vp6(rVp6)蛋白和RVSA11分别免疫豚鼠,制备抗血清,以抗rVp6豚鼠血清作为检测抗体,应用间接免疫荧光技术检测rVp6蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达。分别用抗Vp6和抗RV SA11豚鼠血清检测Vp6蛋白和RV SA11株在感染的MA104细胞中的分布。结果在轮状病毒感染的MA104细胞和大肠杆菌BL21(DE3)中均能检测到轮状病毒Vp6蛋白。以抗RV SA11血清作为一抗检测感染细胞,比用抗rVp6血清检测具有更强的敏感性。结论免疫荧光试验可用于轮状病毒Vp6蛋白的检测。

聚合酶链式反应检测银屑病患者咽部菌群中M6蛋白

根据编码M 6蛋白的emm6基因序列设计一对寡核苷酸引物 ,可特异扩增2 2 0bp的DNA片段。应用聚合酶链式反应(PCR)方法对点滴型银屑病患者咽部培养出的 19株细菌中的M 6蛋白基因进行检测 ,结果 ,15株链球菌中 6株为阳性 ,其中化脓链球菌 3株 ,无乳链球菌、似马链球菌和乳房链球菌各 1株 ,4株非链球菌均为阴性。M 6蛋白基因不仅存在化脓性溶血链球菌中 ,在其它链球菌如乳房链球菌中也存在。研究结果显示 ,化脓性溶血链球菌中的化脓链球菌、无乳链球菌和似马链球菌与点滴型银屑病的发生有明显相关性 ,可能主要是菌体中的M 6蛋白在起作用 ,其它含有M 6蛋白的细菌如乳房链球菌也可诱发或加重银屑病的发生。

银屑病患者血清中链球菌M6蛋白抗体的检测

为进一步证实链球菌中M6蛋白和点滴型银屑病之间的关系,用分离提纯的M6蛋白对银屑病患者血清中的抗体进行检测研究。(1)对点滴型银屑病患者咽部培养获得的化脓性链球菌进行PCR检测,经检测确认含有M6蛋白基因表达的菌株进行分离提纯M6蛋白。(2)用提纯的M6蛋白使用ELISA方法分别对30例点滴型银屑病患者,30例斑块型银屑病患者和30名健康对照组进行血清中M6蛋白抗体进行检测。点滴型银屑病患者血清中M6蛋白的抗体OD值明显高于斑块型银屑病组和正常对照组(P<0.01),而斑块型银屑病组和正常对照组间无明显差异。本组研究结果显示,点滴型银屑病患者与链球菌体中的M6蛋白有明显相关性。

宫颈癌患者HPV16型E6蛋白的表达纯化及血清抗体检测

背景与目的:人乳头瘤病毒16型(humanpapillomavirustype16,HPV16)是宫颈癌组织中最常见的高危HPV,其相应蛋白的血清抗体与宫颈癌的发生发展相关。本研究构建HPV16E6重组表达载体并表达纯化获得HPV16E6重组蛋白,用于检测不同人群血清相应抗体,初步探讨本地区HPV16E6血清抗体反应与宫颈癌的相关性。方法:将HPV16E6基因与pRSET-A融合表达载体连接,获得E6表达重组体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用异丙基硫代-$-D-半乳糖苷(isopropylthio-$-D-galactoside,IPTG)诱导表达。表达的包涵体变性后经Ni柱纯化,复性并经活性鉴定后,用以包被ELISA板,检测正常女性、慢性宫颈炎患者和宫颈癌患者血清抗体。同时采用荧光偏振方法分型检测宫颈癌组织HPVDNA。结果:pRSET-16E6表达重组体的工程菌经IPTG诱导后可表达Mr24×103的HPV16E6组氨酸融合蛋白,表达量占菌体蛋白的22.3%。表达形式为包涵体,重组蛋白纯度达95%以上,其活性经ELISA法证实。80例正常女性、46例慢性宫颈炎和32例宫颈癌患者血清抗体阳性率分别为5.0%、6.5%和31.2%,宫颈癌患者HPV16E6血清抗体阳性率显著高于正常人(P<0.002)及慢性宫颈炎患者(P<0.01),而正常人与慢性宫颈炎患者间的差异无显著性。32例宫颈癌患者癌组织中,HPVDNA阳性率90.6%,HPV16DNA阳性率46.9%。HPV16DNA阳性组血清HPV16E6抗体阳性率(46.7%)高于阴性组(17.6%),但两组间的差异无显著性(P>0.05)。结论:在pRSET-A/BL21中表达获得的HPV16E6融合蛋白,可用于宫颈癌相关HPV的血清学研究;宫颈癌患者HPV16E6血清抗体阳性率明显高于正常人和慢性宫颈炎患者。

人乳头状病毒E6蛋白与宫颈癌关系的研究进展

人乳头状病毒(human papillomavirus,HPV)感染是宫颈癌发生的最重要因素。HPV的早期基因区编码早期调控蛋白中的E6蛋白与宫颈癌的发生发展密切相关。HPV表达E6蛋白诱发宫颈癌的机制包括降解P53蛋白、激活端粒酶、影响与PDZ蛋白的交联作用、扰乱细胞的信号转导、抑制免疫识别和阻碍细胞凋亡等途径。靶向HPV E6蛋白有望在宫颈癌预防和治疗中发挥重要作用。

胃癌患者血清中可溶性黏附分子CD44v6含量和组织中CD44v6蛋白表达的研究

目的:研究胃癌患者外周血清中可溶性黏附分子sCD44v6含量/CD44v6蛋白表达,及其与临床病理参数之间的关系。方法:应用定量酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测胃癌患者(术前和术后)及健康对照组血清中sCD44v6含量,并以免疫组化S-P法测定相应组织中CD44v6蛋白的表达。结果:70例胃癌患者血清中sCD44v6含量(2.15±0.78)ng/ml,明显高于16例正常对照组(1.18±0.43)ng/ml;14例根治性手术后血清中sCD44v6含量(1.21±0.39)ng/ml,比术前(2.67±0.83)ng/m明显下降(P<0.01);而6例非根治性手术后(3.29±0.41)ng/ml比术前(3.61±0.49)ng/ml下降不明显(P>0.05)。而胃癌组织中CD44v6蛋白表达在肠型和弥漫型中差异显著,不同的浸润深度、有无淋巴结及远处转移也差异显著。结论:胃癌患者外周血清中sCD44v6含量及组织中CD44v6蛋白表达的变化与转移、临床分期、病理分期有关,sCD44v6含量升高可作为胃癌患者淋巴结转移,尤其是早期转移的监测指标。

银屑病患者外周血单一核细胞对链球菌M6蛋白的反应

目的 :探讨链球菌M6蛋白 (M 6P)在点滴型银屑病发病中的作用机制 .方法 :MTT法检测点滴型银屑病 (GP)、斑块型银屑病 (PP)患者及正常人外周血单一核细胞 (PBMC)对极微量 (10 0ng)M6P、葡萄球菌肠毒素B(staphylococcalen dotoxinB ,SEB)的增殖反应 ;双抗夹心ELISA法检测M6P刺激培养 72h点滴型银屑病PBMC上清中IFN γ,IL 4水平 .结果 :M6P可引起点滴型银屑病患者PBMC明显的增殖反应 ,与RPMI 16 4 0组 (空白对照 )差异非常显著 (P <0 .0 1) ;与斑块型组及正常对照组相比差异极显著 (P <0 .0 1) ;点滴型银屑病组M6P刺激 72h培养上清中IFN γ 含量较空白对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,IL 4含量均未检出 .结论 :在点滴型银屑病的发病中 ,M

海带内生菌DNN6蛋白对小黄鱼保鲜作用的研究

为了探究海带内生菌DNN6蛋白对水产品保鲜的效果,本文利用250μg/mL和500μg/mL的该蛋白对小黄鱼冷藏保鲜效果进行研究,以感官评分、细菌总数(TVC)、pH、挥发性盐基氮(TVB-N)和硫代巴比妥酸(TBA)等为鲜度指标来测定小黄鱼在冷藏过程中各种品质的变化。结果表明,在4℃冷藏条件下,当海带内生菌DNN6蛋白浓度为500μg/mL时,具有良好的抑菌效果,明显抑制细菌的生长繁殖,延缓挥发性盐基氮和TBA值的上升,延缓了小黄鱼的腐败。因此,海带内生菌DNN6蛋白在水产品保鲜领域具有一定应用前景。

人乳头状瘤病毒16型E6蛋白在食管癌中的表达及与Cyclin D1的关系

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型E6蛋白在食管癌中的表达及与细胞周期蛋白Cyclin D1的关系。方法采用免疫组织化学法检测50例食管鳞癌组织、30例食管癌旁组织及30例正常食管黏膜组织中HPV 16型E6蛋白的表达情况,采用Western blot方法检测Cyclin D1在HPV 16型E6蛋白阳性及阴性的食管鳞癌组织中的表达水平。结果食管鳞癌组织中HPV 16型E6蛋白的阳性表达率高于正常食管黏膜组织(P<0.05),与食管癌旁组织差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤最大径较大者、肿瘤浸润较深者、淋巴结转移者HPV 16型E6蛋白的阳性表达率均较高(P<0.05)。HPV 16型E6蛋白阳性的食管鳞癌组织中Cyclin D1蛋白表达量高于阴性者(P<0.05)。结论 HPV 16型E6蛋白可能促进了食管癌的生长和恶化,并与Cyclin D1有一定的相关性,可作为食管癌的预后评估因子,为临床治疗提供一定的参考依据。

人乳头瘤病毒16型E6蛋白高表达下调LPS诱导巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β

目的将人乳头瘤病毒16型(HPV 16)E6蛋白真核表达载体pcDNA3.1(-)/E6转染巨噬细胞,观察E6蛋白瞬时高表达对LPS诱导的THP-1巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β的影响,为进一步研究HPV16E6蛋白的致病机制奠定实验基础。方法将质粒pcDNA3.1(-)/E6通过SuperFectTM脂转染试剂转染巨噬细胞24h后,用LPS刺激巨噬细胞,利用Western-blotting鉴定E6蛋白在巨噬细胞中的表达,ELISA检测pcDNA3.1(-)/E6转染的巨噬细胞不同时间(12、24及48h)培养上清液中TNF-α与IL-1β的含量,统计软件SPSS12.0分析所得数据。结果Western-blotting结果显示pcDNA3.1(-)/E6能在巨噬细胞中表达约18kD的目的蛋白,即E6蛋白;pcDNA3.1(-)/E6+LPS组培养上清中TNF-α与IL-1β的量明显低于巨噬细胞+LPS组和pcDNA3.1(-)+LPS组,pcDNA3.1(-)/E6+LPS组与巨噬细胞+LPS组和pcDNA3.1(-)+LPS组比较,差异具有显著性(P<0.01)。结论HPV16E6蛋白瞬时高表达下调LPS诱导的THP-1巨噬细胞分泌TNF-α与IL-1β。

胰腺癌中FXYD6蛋白的表达及临床意义

目的:探讨FXYD6蛋白在胰腺癌中的表达及临床意义.方法:应用免疫组化法检测FXYD6蛋白在胰腺癌中的表达,并分析其与临床病理因素的关系.结果:47例胰腺癌病例中,FXYD6蛋白阳性表达42例,阳性表达率为89.34%,而正常胰腺组织中不表达或低表达,两组相比有显著性差异(x^2=10.8631,P=0.0125).按FXYD6蛋白表达程度将47例胰腺癌病例分为高表达组和低表达组,两组年龄、性别、肿瘤大小及远处转移之间的差异无统计学意义,而肿瘤分化程度(x^2=11.562,P=0.0031)、淋巴转移(x^2= 4.1947,P=0.0406)、TNM分期(x^2=9.5995,P =0.0223)之间的差异有显著统计学意义,肿瘤分化程度低、出现淋巴转移、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期的胰腺癌组织中FXYD6蛋白表达明显增高.Spearman等级相关分析显示,FXYD6蛋白表达程度与肿瘤大小(r=0.2991)、分化程度(r=0.6980)、淋巴转移(r=0.4971)、远处转移相关(r=0.4967).结论:FXYD6蛋白在胰腺癌发病机制中发挥重要作用.