西柏三烯-4,6-二醇降解产香菌培养基条件优化

为提高新鞘氨醇杆菌(Novosphingobium panipatense YII-3)对西柏三烯-4,6-二醇的降解效率,利用响应面法对发酵培养基的组成进行了优化。结果表明:(1)通过单因素实验确定了最佳碳源及其浓度、氮源及其浓度、初始pH和培养温度。(2)以上述4个单因素为考察因子设计了4因素3水平的Box-Behnken响应面分析实验,得到的最佳培养基组成为麦芽糖0.66 g/L、酵母粉0.91 g/L、pH=9和培养温度35℃。(3)该条件下培养的新鞘氨醇杆菌对西柏三烯-4,6-二醇的降解率从最初的64.58%增加到84.71%,与优化前相比提高了20.13百分点。Box-Behnken响应面分析实验用于新鞘氨醇杆菌的培养基优化是可行的,且数学模型的预测值与实验观察值相符。

烟叶中西柏三烯-4,6-二醇降解产香菌的分离与鉴定

采取稀释涂布平板法和平板划线法,从调制陈化后的烟叶中分离得到一株高效降解西柏三烯-4,6-二醇的菌株YI1-3.以西柏三烯-4,6-二醇为唯一碳源,该菌株降解产物主要为金合欢醛(8.57%).根据形态特征和16S rDNA系统进化树分析,初步鉴定菌株YI1-3为新鞘氨醇杆菌(Novosphingobium panipatense).该菌株在含有西柏三烯-4,6-二醇发酵培养基中培养66 h后,底物降解率达到75.58%.

多羟基甾醇的合成(Ⅳ):20-亚甲基-4-孕烯-3β,6β-二醇的制备及其抗肿瘤活性研究

从孕烯醇酮 (4 )出发 ,经过 6步反应合成新的多羟基甾醇化合物 2 0 -亚甲基 - 4 -孕烯 - 3β,6β -二醇 (3) ,总收率为 33.4 0 % ,并通过 IR、1 H NMR等谱图数据对化合物 (3)的结构进行表征。用 0 .0 0 5 mg/ml化合物 (3)和 0 .0 5mg/ml的 4 -孕烯 - 3β,6β-二羟基 - 2 0 -酮 (9) ,通过 MTT法对宫颈癌细胞 (HEL A )及白血病细胞 (P- 388)进行抗肿瘤细胞活性研究 ,结果表明 ,化合物 (3)对 HEL A和 P- 388的生长均没有产生明显的细胞毒性。

胆甾-4-烯-3β,6β-二醇双琥珀酸单酯双乙醇胺盐的体内抗癌活性及对血象的影响

目的考察胆甾4烯3β,6β二醇双琥珀酸单酯双乙醇胺盐(EBCD)的体内抗癌活性、急性毒性及对小鼠末梢血象、骨髓有核细胞总数的影响。方法体内抗癌活性实验按《抗肿瘤药药效学技术要求》的规定进行。连续灌服EBCD各剂量7 d,取给药前后尾血计数末梢血象,取给药后骨髓计数骨髓有核细胞总数,最后统计。急性毒性实验按常规方法进行。结果灌服EBCD200 mg.kg-1以上对小鼠S180(肉瘤)体内抗癌活性有显著意义。灌服EBCD 200、244、280 mg.kg-1时对小鼠末梢血红细胞、白细胞及其分类计数、股骨骨髓有核细胞总数无显著影响,急性毒性LD50为1 047 mg.kg-1。结论EBCD具有一定的抗癌活性,其骨髓抑制作用可能较弱。

24-亚甲基胆甾-4-烯-3β,6α-二醇的结构表征

对采用硼氢化钾 -乙醇还原 4 烯 3,6 二酮类型的甾酮化合物所获得产物的结构进行了分析 ,提出了与文献不同的观点 .并通过IR ,1HNMR ,13 CNMR等谱图数据对 2 4 亚甲基胆甾 4 烯 3β ,6α

24-亚甲基胆甾-4-烯-3β,6β-二醇的合成

从豆甾醇出发,先合成了胆甾＿5＿烯＿24＿酮＿3β＿乙酸酯(2);再用过甲酸将2的5,6位双键氧化为环氧化物,后者在碱性条件下立体专一地开环得胆甾＿3β,5α,6β＿三羟基＿24＿酮(3),用醋酐将化合物3的C3＿βOH和C6＿βOH乙酰化保护后用亚硫酰氯脱水得胆甾＿4＿烯＿24＿酮基＿3β,6β＿二乙酸酯(4),4在碱性条件下脱去乙酰基得胆甾＿4＿烯＿3β,6β＿二羟基＿24＿酮(5);化合物5通过Wittig反应将C＿24羰基亚甲基化得到目标化合物24＿亚甲基胆甾＿4＿烯＿3β,6β＿二醇1,总产率为26%。合成化合物1的光谱数据与分离得到的天然物完全一致。

一种制备(3R,4R)-4,7,7-三甲基-6-氧杂二环[3.2.1]辛烷-3,4-二醇的新方法

在催化剂过氧磷钨酸十二烷基吡啶盐(Cat-PW4)的作用下,α-蒎烯与H2O2反应生成主要产物(3R,4R)-4,7,7-三甲基-6-氧杂二环[3.2.1]辛烷-3,4-二醇。不同反应条件对反应转化率和选择性的实验结果表明,最佳反应条件为:12.8 mmolα-蒎烯、5 m L溶剂三氯甲烷、0.2 g催化剂、3.3 m L 30%H2O2,反应温度40℃,反应时间3 h,α-蒎烯转化率和产物的选择性分别为94.7%和39.8%。反应结束后,该产物存在于水相和有机相中,通过萃取和重结晶分离提纯,得率11%,纯度达到98%;其分子结构通过红外光谱、紫外光谱、1H核磁共振谱、13C核磁共振谱、低分辨率质谱及高分辨率质谱确证。

LC-MS/MS法检测替格瑞洛原料药中4,6-二氯-2-(丙硫基)-5-氨基嘧啶和5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶-4,6-二醇

目的:建立LC-MS/MS法检测替格瑞洛中基因毒性杂质4,6-二氯-2-(丙硫基)-5-氨基嘧啶(DCPA)和5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶-4,6-二醇(DHPN)。方法:采用Ultimate?UHPLC XB-Phenyl色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸溶液为流动相A,0.1%甲酸的甲醇溶液为流动相B,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温为40℃;采用AB SCIEX ExionLC-QTRAP5500三重四极杆串联离子阱液质联用仪进行检测,电喷雾离子源(ESI~+)、多反应监测模式(MRM),定量离子对为m/z 240.1→197.8(DCPA)、m/z 232.2→213.9(DHPN)。结果:DCPA质量浓度在0.10~16.1 ng·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9999);检测限为0.03 ng·mL^(-1),定量限为0.10 ng·mL^(-1),平均加样回收率为97.5%(RSD=9.9%,n=9);DHPN质量浓度在0.20~16.1 ng·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9995),检测限为0.06 ng·mL^(-1),定量限为0.20 ng·mL^(-1),平均加样回收率为98.1%(RSD=1.5%,n=9)。重复性和中间精密度实验中,DHPN在100%限度浓度加标供试品溶液(n=12)中的加样平均含量为7.97μg·g^(-1),RSD=4.9%;供试品溶液(n=12)中DCPA的平均含量为0.94μg·g^(-1),RSD=4.3%,表明精密度良好。对照品溶液、供试品溶液、加标供试品溶液中DCPA和DHPN室温放置24 h内稳定。3批替格瑞洛样品(批号Q19010701G、Q19010702G、Q19010703G)中均未检测到DHPN,DCPA的含量依次为1.2、1.1和1.1μg·g^(-1),均符合规定。结论:该方法简便、准确、可靠,可用于替格瑞洛中DCPA和DHPN的检测。

反应动力学拆分法合成(2S,4R)和(2S,4S)-6-庚烯-2,4-二醇

本研究以手性(S)-3-羟基-丁酸甲酯为原料,经TBSCl保护羟基、DIBAL-H还原及烯丙基锌试剂反应后合成(2S,4R/S)-6-庚烯-2,4-二醇中间体,利用anti/syn-1,3-二醇在进行丙酮叉保护以及脱丙酮叉保护时反应动力学性能上的差异,并通过高立体选择性的动力学拆分法合成出目标产物(2S,4S)和(2S,4R)-6-庚烯-2,4-二醇.

胆甾-3β,5α,6β-三醇衍生物的合成

研究了胆甾-3β,5α,6β-三醇的水溶性衍生物的合成.以胆固醇为原料在质量分数为88%的甲酸中以质量分数为30%的过氧化氢（H2O2）溶液氧化、甲醇中碱水解得胆甾-3β,5α,6β-三醇,收率83.5%,m.p.228-230℃,再以胆甾-3β,5α,6β-三醇与草酰氯于丙酮中0℃反应15min,吡啶为催化剂,然后加入少量水继续反应约30 min,得胆甾-3β,5α,6β-三醇-3,6-二草酸单酯,收率61.5%,m.p.207-209℃.经IR和1H-NMR确证结构正确。

豆甾-22-烯-3β,6β-硫酸酯钠盐的合成

以豆甾醇为原料,通过PCC氧化生成豆甾-4,22-二烯-3,6-二酮,然后在NiCl2存在下用NaBH4还原得到豆甾-22-烯-3β,6β-二醇,接着经过三乙胺-三氧化硫配合物酯化和强酸性丙烯酸型阳离子交换树脂进行钠离子交换,最后得到标题化合物。

双官能单萜氧杂二环二醇乙酸酯类衍生物的合成及其除草活性

以(3R,4R)-4,7,7-三甲基-6-氧杂二环[3,2,1]辛烷-3,4-二醇(1)和乙酰氯(2)为原料,经"一锅法"制得混合物Ⅰ;Ⅰ经分离纯化得4个新型的双官能单萜氧杂二环二醇乙酸酯类衍生物(3a^3d),其结构经1H NMR,13C NMR,FT-IR和HR-MS表征。考察了物料比r[n(2)∶n(1)]和反应时间对3a^3d相对浓度的影响。结果表明,在反应条件[1 5 mmol,r=7,回流反应7 h]下,3a^3d的相对浓度分别为21.6%,15.6%,37.9%和24.9%;在反应条件[1 5 mmol,r=4,回流反应7 h]下,3a^3d的相对浓度分别为50.7%,36.6%,7.84%和4.86%。用培养皿法测试了1和3a^3d的除草活性。实验结果表明,1和3a^3d均能显著抑制一年生黑麦草胚根与胚芽生长;在用药浓度为5 mmol·L-1时,1和3a^3d对根长抑制率分别为55.1%,86.0%,84.2%,91.3%和97.5%;对芽长抑制率分别为55.1%,76.5%,92.8%,94.8%和98.4%。

主体分子D．D与茴香醛包结物的超分子异构现象

1,1,6,6-四苯基-2,4-己二炔-1,6-二醇(D.D)与茴香醛在不同的结晶条件下形成主客体分子物质的量比分别为2:1和1:2的包结物晶体。x-射线单晶衍射测试结果表明,在2:1(h/g)包结物晶体中,D.D通过形成闭合氢键网,构筑了1(?) zigzag主体分子框架超结构,形成的隧道框架对茴香醛具有识别作用;在1:2(h/g)包(?)物晶体中,主体分子采取0维框架超结构,按2_1次螺旋轴呈zigzag形状排列,茴香醛分子与主体分子通过OH…O强氢键作用进入主体分子构筑的隧道。它们互为超分子异构体。产生异构体的原因是,在前者包结物晶体中,主体分子采取邻位交叉式构象,而在后者的包结(?)晶体中,主体分子采取对位交叉式构象,因此,它们又是超分子构象异构体。

粉背南蛇藤中新三萜化合物对RKO细胞体外抗癌作用的研究

目的：探讨粉背南蛇藤中新的三萜齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对人结肠癌细胞系RKO细胞的体外增殖抑制作用和诱导凋亡作用。方法：采用MTT法检测齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对体外培养人结肠癌细胞系RKO细胞的增殖抑制作用，通过AO／EB双染色荧光显微镜、HE染色光学显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪分析齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对RKO细胞的诱导凋亡作用及对细胞周期的影响。结果：齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对RKO细胞生长抑制作用具有剂量依赖性和时间依赖性，作用48h时IC50为（12．20±0．79）μg·mL^-1；AO／EB双染色、HE染色可见典型的肿瘤细胞凋亡改变；10μg·mL^-1的三萜处理RKO细胞48h即可出现明显的DNA梯带、流式细胞仪可检测到亚二倍体峰，在10-20μg·mL^-1内具有明显的量-效作用关系；并可见RKO细胞G0-G1期、G2-M期的细胞明显减少，而S期细胞无变化。结论：粉背南蛇藤中新的三萜齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇能抑制人结肠癌细胞系RKO细胞增殖和诱导凋亡。

羟基胆烷酸类和羟基胆甾烷类化合物的体内抗癌活性研究

目的 考察3β,5α,6β-三羟基胆烷-4-酸甲酯(LS01)、胆甾烷-3β,5α,6β-三醇(LS19)和胆-4-烯-3β,6β-二醇(LS20)的体内抗癌活性和急性毒性.方法 体内抗癌活性实验按<抗肿瘤药药效学技术要求>的规定进行.急性毒性实验按常规方法进行.结果 灌服和腹腔注射LS20对小鼠S180无明显的抑制作用;灌服和腹腔注射LS19与LS01对小鼠S180皆有明显的抑制作用,且LS19较好.灌服和腹腔注射LS01的最大耐受量分别为8000,658 mg·kg-1;灌服LS19的最大耐受量为5 000 mg·kg-1, 腹腔注射LS19的LD50及其95%置信限分别为169 mg·kg-1、152～186 mg·kg-1.结论 LS19和LS01具有一定的体内抗癌活性.

微流控芯片电泳分离血清中小而密低密度脂蛋白的研究

应用微流控芯片电泳,以40 mmol/L Tricine(pH9.8)作为电泳缓冲体系,十二烷基硫酸钠(SDS)作为添加剂(0.1 mmol/L SDS样品溶液,0.02 mmol/L SDS分离缓冲液),分离血清小而密低密度脂蛋白(sdLDL)。研究荧光染料硝基苯并噁二唑-C6-酰基鞘胺醇(NBD C6-ceramide)与脂蛋白结合的特异性、饱和性以及血清保存和检测时间对脂蛋白电泳行为的影响;探讨SDS有效降低蛋白吸附,提高血清脂蛋白分辨率的作用。冠心病(CHD)组sdLDL检出率(75%)显著高于对照组(6%,P<0.01)。该法具有简易、快速、高效等优点,可望成为CHD危险性评估的常规分析手段。

豆荚软珊瑚Lobophyton sp.中的次生代谢产物研究

从中国海南岛三亚附近海域采集的软珊瑚Lobophyton sp.中分离得3个甾类生物活性物质。通过近代波谱方法,鉴定出他们的结构分别为柳珊瑚甾醇,24-亚甲基胆甾-4-烯-3β,6β-二醇,24-亚甲基胆甾-3β,5α,6β-三醇。柳珊瑚甾醇具有抗心律失常、减慢心率等活性;24-亚甲基胆甾-4-烯-3β,6β二醇具有强细胞毒活性。

Lyocell纤维纺丝原液稳定剂PBD的合成及应用研究

采用三甲基氢醌(TMHQ)与乙醛在低温下合成2,4,5,7,8-五甲基-4-氢-1,3-苯并二噁英-6-醇(PBD),对其合成的影响因素进行初步探讨;并进一步将PBD与没食子酸丙酯(PG)进行对比,分析了PBD对纤维素/N-甲基吗啉氧化物(NMMO)水溶液稳定性的影响。通过傅里叶红外光谱仪、核磁共振仪以及气相-质谱联用仪等对合成产物的结构及组成的表征,发现搅拌方式以及加料顺序对PBD的合成具有很大的影响,在合适的条件下可以成功地合成出PBD;此外,紫外光谱和哈克流变仪对纤维素溶液的分析结果表明,PBD对纤维素/NMMO·H2O溶液的颜色影响较小,稳定性优于PG。