6-氨基喹啉合成研究

以4-硝基苯胺和甘油为起始原料,经Skraup反应、80%水合肼和10%Pd/C还原,合成了AQC的重要中间体6-氨基喹啉。产品含量达99%(HPLC),总收率为53%。其结构经ESI-MS、1H NMR确证。

HPLC柱前衍生法测定速溶型水解乳清蛋白粉中18种游离氨基酸含量

本文采用柱前衍生-高效液相色谱法同时测定速溶型水解乳清蛋白粉中18种游离氨基酸的含量。结果显示,各氨基酸色谱峰之间分离良好,18种氨基酸回归方程相关系数均在0.998以上,加标回收率在92.6%~107.4%,相对标准偏差小于5.0%。此方法可用于测定市售速溶型水解乳清蛋白含量,且较《食品安全国家标准食品中氨基酸的测定》(GB 5009.124-2016)操作更为简便,可取得良好的测定结果。

超高效液相色谱-单四极杆质谱检测器快速定量血浆游离氨基酸谱的方法

建立了一种基于超高效液相色谱-单四极杆质谱检测器(UPLC-QDA)定量血浆游离氨基酸谱的方法。血浆样本经甲醇去除蛋白后,所得到的上清液挥干后用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)进行衍生。反应液在Cortecs C18色谱柱上进行6 min梯度洗脱达到色谱分离,采用正离子模式下的选择离子扫描模式测定。结果表明,34种氨基酸的检出限与定量限分别在0.1~5.0μmol/L和0.2~10.0μmol/L之间,并具有较好的线性关系(R 2>0.991)和良好的准确度(80.4%~121.8%),较高的精密度(相对标准偏差<15%)以及较好的稳定性,低、中、高3个浓度加标回收率在78.1%~127.6%之间,基质效应在-21.9%~29.7%之间。本方法简单快速,稳定可靠,并成功地应用于正常人和小鼠血浆样本中氨基酸谱的定量。

过甲酸氧化柱前衍生HPLC法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中盐酸半胱氨酸含量

目的建立柱前衍生高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中盐酸半胱氨酸含量的方法,完善质量标准。方法盐酸半胱氨酸被过甲酸氧化后,用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)衍生化,采用Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以140mmol·L^(-1)醋酸铵缓冲液(p H 5.00)和乙腈-水(60∶40)溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为248nm,进样量5μL。结果盐酸半胱氨酸在1.78~7.11μg·m L^(-1)范围内浓度与峰面积线性相关,相关系数为0.9995;在标示浓度的80%、100%、120%三个浓度水平的平均回收率为97.5%,RSD为2.7%(n=9)。结论本法操作简便,具有较好的灵敏度与重现性。

柱前衍生化-超高效液相色谱法快速测定酱油中的18种氨基酸

建立了一种6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生,超高效液相色谱(UPLC)对酱油中18种氨基酸进行快速分离检测的方法。采用BEH C18色谱柱分离,在260nm波长下检测,以乙酸铵-乙酸-乙腈-水和乙腈-乙酸为流动相,将流动相梯度和流速梯度相结合,在12min内实现了18种氨基酸衍生物的分离。方法的线性回归系数(r2)均大于0.999,检出限为0.032～0.12mg/L,日间相对标准偏差(RSD)为0.72%～4.05%,在酱油中18种氨基酸的加标回收率为90.2%～103.7%。该方法前处理过程简单,分离时间短,是检测酱油中氨基酸的有效手段,可用于酱油的质量评定。

AccQ-Tag法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中17种氨基酸的含量

目的建立测定复方氨基酸注射液（18AA—V）中17种氨基酸含量的方法。方法采用AccQ—Tag法，以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂，与复方氨基酸注射液（18AA—V）中17种氨基酸柱前衍生，用Waters2695 HPLC仪器，AccQ—Tag^TM柱，以醋酸钠（pH4．95）缓冲液为流动相A，乙腈为流动相B，水为流动相C进行梯度洗脱，检测波长为248nm，柱温为37℃，进样量为5止。结果17种氨基酸的线性回归方程r值为0．9996～0．9999（n=5），平均回收率为93．3％～104．4％（RSD值为0．88％～3．05％，n=6）。结论本法快速，简便，结果准确。

高效液相色谱法测定黑莓果汁及黑莓啤酒中的γ-氨基丁酸

建立了一种黑莓果汁及黑莓啤酒中测定γ-氨基丁酸的高效液相色谱法.采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（AQC）为柱前衍生试剂,色谱柱为Waters AccQoTagTM氨基酸分析柱,梯度洗脱,紫外检测波长248 nm.结果表明γ-氨基丁酸线性方程为y=21 012x＋155 852,在1～1 000 mg/L范围内呈现良好线性关系,相关系数R2=0.9994,综合黑莓原汁、浓缩汁及黑莓啤酒样品的结果,加标回收率为87.9％～1 14.9％,相对标准偏差为2.7％～12.3％,检出限为0.7 mg/L.采用此法检测黑莓果汁及黑莓啤酒中的γ-氨基丁酸方法简便易行,结果稳定性好.

AccQ-Tag法测定毛蚶抗贫血口服液中的氨基酸含量

以 6 -氨基喹啉 - N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯 (AQC)为衍生剂 ,与毛蚶抗贫血口服液中的氨基酸柱前定量衍生 ,用 Waters HPL C仪 ,Acc Q- Tag TM专用 C18柱 (3.9mm× 15 cm) ,以140 mmol· L-1的醋酸钠溶液 (p H5 .0 2 )为溶剂 A,乙腈为溶剂 B,超纯水 (Milli- Q水 )为溶剂 C,进行梯度洗脱 ,检测波长为 2 4 8nm,35 min测试完毕。各种氨基酸测定的重现性 RSD%均 <3.0 %(n=5 )。该方法简便快速 ,结果准确可信。

柱前衍生-超高效液相色谱法测定3种奶粉中18种氨基酸

近年来羊奶粉和骆驼奶粉备受消费者青睐,它们具有潜在的低致敏性,因此成为牛乳不耐受人群尤其是婴幼儿的母乳替代品,其营养价值备受关注。牛奶粉、羊奶粉和骆驼奶粉中氨基酸含量的比较研究鲜有报道。利用酸水解得到游离氨基酸,选择6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯(AQC)进行柱前衍生,超高效液相色谱分离并检测,外标法定量。18种氨基酸在各自线性范围内线性关系良好,相关系数(r2)大于0.999;以3倍和10倍信噪比(S/N)确定方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ),分别为1.3~2.5(mg/100 g)和3.9~7.5(mg/100 g)。方法验证采用奶粉标准参考物质SRM 1849a,测定值符合其含量范围,6次测定值的相对标准偏差(RSD)为2.04%~3.65%。采用建立的方法分别对市售和网购的牛奶粉、羊奶粉和骆驼奶粉进行18种氨基酸成分和含量分析,旨在从氨基酸角度对这3种不同来源乳品进行对比。该方法快速,灵敏度高,准确可靠,适用于不同基质乳粉中18种氨基酸成分和含量的确定。

AQC柱前衍生反相高效液相色谱法测定土壤中氨基酸

以2-氨基丁酸为内标物,6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（AQC）为柱前衍生试剂,用XTerra C18 柱,1.8 mmol/L甲酸铵溶液（pH=3.0）和乙腈为流动相,采用梯度洗脱,光电二极管（PDA）检测器在248 nm波长处检测,建立了一种利用反相高效液相色谱同时测定土壤中17种氨基酸的分析方法.方法重现性好,精密度高,氨基酸浓度在25～600 μmol/L范围内,线性相关系数均大于0.99;各氨基酸检出限≤0.5 pmol .并且在该色谱条件下,获得了灵敏度较高,彼此分离良好的17种AQC衍生氨基酸的LC-MS 质谱总离子流图,为今后土壤氨基酸的深入研究提供了更加有利的手段.

不同品种荔枝果实游离氨基酸分析

为探明荔枝果实中游离氨基酸组成及含量,采用AccQ.Tag柱前衍生反相高效液相色谱法测定紫娘喜、大丁香、黑叶、兰竹和甜眼荔枝果实中的17种游离氨基酸含量。结果表明:测定方法重现性好,精密度高;甜眼果实中的人体必需氨基酸含量占氨基酸总量的36.4%,人体必需氨基酸含量与非必需氨基酸含量之比为0.57,较接近理想蛋白质的标准要求;紫娘喜、大丁香、黑叶、兰竹和甜眼荔枝果实均含有丰富的药效氨基酸、鲜味氨基酸、甜味氨基酸以及少量的芳香族氨基酸,但不同品种间的含量及比例差异较大。因此,不同荔枝品种的口感和风味明显不同。

柱前衍生高效液相色谱法测定人血浆中17种氨基酸的含量

目的应用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生高效液相色谱法测定正常人血浆中17种氨基酸的含量。方法血浆样品与AQC衍生,衍生产物用氨基酸专用C18色谱柱进行分离,梯度洗脱,使用荧光检测器(λex=250 nm,λem=395 nm)。用建立的方法对正常人血浆中的17种游离氨基酸进行测定(n=22)。结果在所研究的浓度范围内,17种氨基酸线性关系良好(R2>0.99),平均回收率在(87.7±5.8)%与(117.1±8.4)%之间,批内和批间变异系数分别在10.3%和11.0%以下。正常人血浆中17种氨基酸测定结果均在正常参考值范围内。结论该方法简便、稳定、分离效果好,可用于人血浆中氨基酸浓度的检测。

两种柱前衍生反相高效液相色谱法测定血液和尿液中游离氨基酸

建立以PITC法和AQC法为柱前衍生试剂测定血液和尿液中游离氨基酸含量的测定方法。采用Waters-e2695操作系统,色谱柱为Shim-vp,ODS(250mm×4.6mm,5μm)(日本,岛津公司),以甲醇/乙腈/水和醋酸钠溶液(pH 6.5)为流动相,梯度洗脱。分别采用紫外和荧光检测器对血液和尿液中游离氨基酸进行含量测定。结果显示,两种衍生化方法灵敏度好、分离度高,具有良好的线性范围(r>0.990 0),准确度高(平均回收率为75.1%～127.0%),进样精密度好(RSD为0.12%～3.42%)。PITC法在尿液中游离氨基酸含量测定中显示了良好的测试准确性;而AQC法测定尿液中组氨酸、苏氨酸、脯氨酸超出线性范围,需要对尿样的前处理进行深入研究。

AQC柱前衍生高效液相色谱法测定胃乐宁片中游离氨基酸

目的建立柱前衍生高效液相色谱法测定胃乐宁片中各种游离氨基酸的方法。方法以α-氨基丁酸为内标,以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（AQC）为柱前衍生化试剂,采用Kromasil C18（250 mm×4.6mm,5μm）色谱柱,醋酸铵缓冲液（pH5.10）和57%乙腈水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为248 nm,同时分离测定胃乐宁片中21种游离氨基酸。结果 21种氨基酸在0.01~0.5 mmol/L浓度范围内有良好的线性关系,r均不小于0.999,平均加样回收率为91.5%~107.0%,RSD为0.63%~3.79%。结论建立的方法可用于检测胃乐宁片中游离氨基酸含量,测定的结果为胃乐宁片质量研究和评价提供了依据。

AQC柱前衍生高效液相色谱法测定动物细胞培养基中氨基酸

以α-氨基丁酸为内标,6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯为柱前衍生试剂,用高效Nova-PakC18柱,乙酸钠溶液(pH5.70)和60%乙腈为流动相,采用二元梯度洗脱,紫外检测器在248nm波长检测,建立了一种新的柱前衍生反相HPLC法同时测定动物细胞培养基中谷氨酰胺在内19种氨基酸。方法重现性好,精密度高。氨基酸的峰面积—浓度线性范围为20～500μmol/L,线性相关系数均大于0.99,峰面积的精密度为1.55～10.8%。在该色谱条件下获得了良好的商用细胞培养基DMEM和F12中氨基酸的色谱图,为动物细胞生长代谢研究提供了有利的实验手段。

HPLC法测定地龙注射液中主要氨基酸的含量

目的:建立测定地龙注射液中主要氨基酸含量的方法。方法:以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)为衍生剂,与地龙注射液中的游离氨基酸柱前定量衍生,用HPLC法测定衍生物含量。结果:丙氨酸、缬氨酸、盐酸赖氨酸、异亮氨酸和亮氨酸在各自浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 8),平均回收率102.6%～104.9%,RSD 0.3%～0.9%。结论:本法简便、准确,可用于地龙注射液的生产和质量控制。

柱前衍生高效液相色谱法测定食品中的氨基酸含量

采用柱前衍生高效液相色谱法，测定了3种食品中天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸等17种氨基酸的含量．以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂，醋酸盐-磷酸盐缓冲液、乙睛、水为流动相，梯度洗脱．AccQ^＊Tag（Waters）氨基酸分析柱为色谱柱，紫外检测．结果显示，氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系，线性范围10～80μmol／L，最小检出限为0．23μmol／L，相关系数均在0．998以上，相对标准偏差在1．8％～4．9％之间，回收率在89．3％～115．8％之间．

柱前衍生化HPLC法测定CHO细胞培养上清中氨基酸浓度

以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰-亚氨基甲酸酯为柱前衍生化试剂,结合HPLC技术,首次建立了定量分析CHO细胞培养上清中氨基酸浓度的方法。选用Agilent 1260型高效液相色谱仪,AccQ-TagTM柱,以流动相A和流动相B[乙腈-水(60∶40,体积比)]进行梯度洗脱,荧光激发波长为250nm,发射波长为395nm,柱温为42.5℃,进样量为5μL。结果表明:21种氨基酸的线性回归系数均大于0.99,连续6次测定培养上清中氨基酸组分峰面积RSD均小于5%;21种氨基酸9次测定的平均加标回收率为96.8%,RSD为4.93%。该方法快速、简便、重复性好、结果准确,符合动物细胞培养上清中氨基酸分析的要求。

应用AccQ柱前衍生高效液相色谱法检测黑大麦中的游离氨基酸

采用AccQ柱前衍生高效液相色谱法,以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)为衍生试剂,分离并检测了黑大麦样品中游离氨基酸种类及其含量.结果表明:在检测出的9中游离氨基酸中,天冬氨酸含量最低(2.3±0.031μmol/g),苯丙氨酸的含量最高(347.6±8.052μmol/g),占氨基酸总量的46.67%,且氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系.此方法稳定性较高,操作简单,准确可靠,具有较高的灵敏度,在黑大麦的开发与利用以及质量控制方面具有很好的应用前景.

对一种分离测定氨基酸方法的改进

对Waters公司采用 6 氨基喹啉 N 羟基琥珀酰亚胺基 氨基甲酸酯 (AccQ Tag)柱前衍生化测定氨基酸的方法进行了改进。将流动相流速由原来的 1 0mL/min改变为 2 0mL/min ,用AccQ Tag专用柱 (3 9mmi.d .× 15 0mm ,4μm)在 17 5min(原为 35min) (运行周期为 2 2 5min ,原为 45min)内快速分离测定了 18种氨基酸和牛磺酸。用Nova PakC18柱 (3 9mmi.d .× 15 0mm ,4μm) ,Nova PakC18柱 (4 6mmi.d .× 15 0mm ,4μm) ,SymmetryC18柱 (3 9mmi.d .× 15 0mm ,4μm)和WatersXterraRP 18柱等反相C18柱代替AccQ Tag专用柱 ,均可对氨基酸进行快速分离 ,其中以SymmetryC18柱分离效果最好 ,出峰紧凑且峰形对称 ,分离时间仅 14 5min(运行周期为2 0 0min) ,色谱柱价格比AccQ Tag专用柱便宜 ,是AccQ