6-氨基青霉烷酸在弱碱性阴离子树脂上的吸附研究

用静态法研究6-氨基青霉烷酸(6-APA)在弱碱性阴离子交换树脂D301和330上的吸附行为。在溶液pH为8.0,6-APA起始浓度介于1.5至20mg/mL条件下,测定25℃时D301树脂和330树脂的静态交换动力学曲线、吸附等温线,并求算D301树脂和330树脂的吸附等温线方程。分别用Langmuir型和Freundlich型方程对D301树脂和330树脂吸附等温线进行线性回归拟和,结果表明,6-APA在D301树脂和330树脂上的吸附更符合Langmuir型吸附。

苯乙酸溶解度测定及6-氨基青霉烷酸在苯乙酸中萃取动力学的研究

测定了苯乙酸(PAA)在纯水和水—乙醇、水—丙醇混合溶剂中的溶解度以及6 -氨基青霉烷酸(6 -APA)在PAA溶剂中的萃取动力学。研究得出了PAA在纯水中、水—乙醇混合溶剂、水—丙酮混合溶剂中的溶解度方程。6-APA在PAA中被萃取剂萃取了95%以上所需的时间为60s。

6-氨基青霉烷酸晶体生长过程中杂质对晶习的影响

考察了青霉素G,丙酮和苯乙酸(PAA)杂质在6 氨基青霉烷酸(6 APA)结晶过程中对晶习的影响及其在乙醇溶液中的生长过程。发现6 氨基青霉烷酸在乙醇溶液的生长过程中存在由菱形晶体向六面体晶体的晶习转变;6 APA晶体在青霉素G存在时趋向于破碎;在丙酮存在时变厚;在苯乙酸存在时易于形成六面形晶体。

过饱和度和温度对6-氨基青霉烷酸生长晶习的影响

对于6 氨基青霉烷酸(简称6APA)晶体在溶液中的生长,在不同物理化学环境下可得到不同的晶习,试验考察了过饱和度以及温度对6APA生长晶习的影响。通过测定6APA晶体结构,分析6APA晶体不同晶面的分子堆积,定性解释了过饱和度以及温度引起6APA生长晶习变化的原因,可为6APA生产工业放大提供了理论和试验依据。

6-氨基青霉烷酸水溶液粘度研究

本文主要研究了接近于工业条件下的 6-氨基青霉烷酸水溶液的粘度 ,得到了工业品水溶液的粘度与浓度、温度的关系 ,回归出粘度与温度的Andrade方程 ,并求得了不同浓度溶液的粘流活化能 。

HPLC法测定6-氨基青霉烷酸中苯乙酸和青霉素G含量

目的建立6-氨基青霉烷酸中苯乙酸和青霉素G含量的测定方法。方法用苯基柱;甲醇∶pH3.5磷酸盐缓冲溶液∶水(30∶10∶60)为流动相;检测波长220nm;流速:1.5ml/min;进样量:10μl。结果6-氨基青霉烷酸、苯乙酸峰和青霉素G峰完全分离;样品连续测定6次,苯乙酸和青霉素G的RSD分别为0.89%和0.92%;苯乙酸在0.005～0.040mg/ml范围内、青霉素G在0.011～0.086mg/ml范围内呈良好的线性关系(相关系数均大于0.9999);苯乙酸和青霉素G平均回收率分别为99.12%(RSD=2.8%)和100.05%(RSD=1.0%);检测限分别为:3.36×10-5和4.61×10-5mg/ml;定量限分别为1.135×10-4和1.076×10-5mg/ml。结论该方法专属性好、准确度高,可用于6-氨基青霉烷酸中杂质苯乙酸和青霉素G的含量测定。

用HPLC法测定6-氨基青霉烷酸色谱条件的探索

采用HPLC法测定 6-氨基青霉烷酸的含量 ,通过对流动相的配比、pH值、流速、样品的浓度及柱规格等色谱条件进行选择 ,结果表明此法较通用的碘量法快速、准确。

6,6-二溴青霉烷酸甲酯合成的改进

以6-氨基青霉烷酸(6-APA)为原料,经过重氮化、溴化、酯化反应,制备了合成青霉烯和碳青霉烯的中间体——6,6-二溴青霉烷酸甲酯,考察了盐酸用量、催化剂、反应时间和温度对产品的颜色和收率的影响,并用IR和1H NMR对产品结构进行了表征.实验结果表明:采用本方法合成6,6-二溴青霉烷酸甲酯,产品的总收率为79.2%,其旋光度、熔点值与文献报道值基本一致.

6,6-二溴青霉烷酸甲酯的合成

以6-氨基青霉烷酸(6-APA)为原料,在非均相反应体系中加入催化剂聚乙二醇,使氨基取代和-H的取代同时完成,制得6,6-二溴青霉烷酸.再以三氯化铝作催化剂,用工业甲醇与6,6-二溴青霉烷酸进行酯化反应.同时讨论了时间、温度、投料比和催化剂用量对酯化反应条件的影响.工业甲醇/6,6-二溴青霉烷酸(质量比)为4,三氯化铝5%(以6,6-二溴青霉烷酸的质量计),最佳反应温度为27℃,最佳反应时间为6h,产率达到96.2%.

从6-APA和7-ADCA生产废液中回收苯乙酸

采用溶剂萃取、水法提取等方法从6-氨基青霉烷酸和7-氨基-3-去乙酰氧基头孢烷酸生产废液(简称废液)中回收苯乙酸(PAA),考察了各种因素对回收效果的影响。实验结果表明:以甲苯为萃取剂,在萃取温度30℃、萃取时间15m in、500mL废液中萃取剂加入量130mL的最佳条件下,萃取率为96.5%;在提取温度为65℃左右、结晶温度低于10℃的条件下,PAA收率大于89%,纯度大于99%;所得PAA产品质量好,可用于青霉素G等医药产品的生产。

D-氨基酸氧化酶和戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰基转移酶基因在大肠杆菌中的克隆和共表达 Luo H等[Enzyme Microb Technol，2004，35（6-7）：514．518]

为了将头孢菌素C转化成-7-氨基头孢烷酸(7-ACA)，克隆了来源于变异三角酵母的D-氨基酸氧化酶(DAAO)基因和来源于假单孢菌的戊二酰-7-氨基头孢烷酸(GL-7-ACA)酰基转移酶基因，并在重组大肠杆菌中表达。对DAAO重组菌BL21(DE3)/pET-DAAO而言，通过分批补料培养可获得250U／ml的高DAAO活性。信号肽序列缺失的GL-7-ACA酰基转移酶基因也成功地在重组大肠杆菌BL21(DE3)／pET-ACY中得到表达，

6,6-二溴青霉烷砜酸的合成工艺

以6-APA(6-氨基青霉烷酸)为起始原料,经重氮化、溴化、成盐、氧化反应制得6,6-二溴青霉烷砜酸,重氮化、溴化反应在水相和有机相中进行,反应温度为-5～-10℃,氧化反应在水相进行,反应温度为5～10℃,总收率为78.8%。反应条件较温和,操作简单,易于工业生产生产。

6-APA溶解度和等电点的测定

利用激光法测定了常温下6-APA在水、水—乙醇和水—丙酮体系中的溶解度以及在水中的等电点pk值。

6-APA溶剂回收工艺模拟

采用Aspen Plus软件对6-APA生产废液中的溶剂回收进行了模拟。讨论了理论塔板数、回流比、进料板位置等参数对回收结果及塔操作参数的影响,获得了优化的模拟条件并计算得到了塔径、热负荷等参数,为6-APA生产工艺的设计提供了参考依据。

混合溶剂法生产6-APA中溶剂回收的工艺模拟

萃取直通法生产6-APA会产生大量含有机溶剂的废水。利用Aspen Plus软件,采用VLLE平衡和NRTL方程,模拟计算了6-APA废水中醋酸正丁酯和正丁醇混合溶剂的回收工艺。考察了理论塔板数、气相采出量等操作参数对产品纯度的影响,获得了优化的模拟条件。结果表明,采用20块理论板,塔顶气相采出量为2600 kg/h时,经分相后得到的有机相产品纯度约为90.4%,其中醋酸正丁酯和正丁醇基本被完全回收,为6-APA工艺废水的处理与利用提供了参考。

超滤技术在6-APA直通工艺中的应用

6-APA直通车工艺是指青霉素发酵液经过滤、乙酸丁酯提取、脱色、脱酯得到青霉素盐的水溶液,然后经酶裂解、萃取、结晶,得到6-APA成品。由于青霉素滤液中含有大量可溶性蛋白质很难除去,给6-APA直通工艺的应用带来了困难。本文使用Hyflux截留分子量为1×103的中空纤维超滤膜除去青霉素滤液中大部分蛋白类杂质,省去原工艺中破乳剂和丁醇的使用,产品的总收率较对照提高4.6%。超滤处理装置投入运行后1、2年即可收回投资。

应用超滤技术提高6-APA质量和收率

6-APA直通工艺的研究中发现有大量可溶性蛋白质很难除去,给6-APA直通工艺的应用带来了困难,使用超滤技术可以很方便地除去这些杂质。经过对比实验,发现在青霉素滤液后增加一步超滤膜纯化,可以除去大部分大分子蛋白类杂质,避免破乳剂的使用,产品的收率和质量都比对照有显著提高。

6APA反应结晶热力学性质的研究

采用激光法测定了6-氨基青霉烷酸(简称6APA)在不同温度、溶液pH值、离子强度、混合溶剂体系以及杂质条件下的水溶液溶解度数据,同时考察并得到了不同温度、初始溶液浓度、盐酸流加速度以及晶种加入量条件下的6APA反应结晶介稳区数据。这将为6APA的工艺试验和过程设计放大提供基础数据。

6-氨基青霉烷酸和7-氨基头孢烷酸职业暴露工人血清骨膜蛋白、IgE的水平及意义

目的探讨职业暴露6-氨基青霉烷酸(6-aminopenicillanic acid,6-APA)、7-氨基头孢烷酸(7-aminocephalosporanic acid,7-ACA)工人血清骨膜蛋白、IgE的表达水平及意义。方法选择90名接触7-ACA、6-APA粉尘哮喘或变应性鼻炎患者为病例组,117名接触7-ACA、6-APA粉尘无哮喘或鼻炎工人为接尘组,192名不接触粉尘健康体检者作为对照组。用ELISA法测定血清骨膜蛋白和IgE水平,比较三组测定结果。结果病例组、接尘组血清骨膜蛋白、IgE水平均高于对照组(P<0.05),而病例组与接尘组血清骨膜蛋白、IgE水平差异无统计学意义(P>0.05);与低浓度接尘工人相比,高浓度接尘工人血清骨膜蛋白水平明显升高(P<0.05),IgE水平升高不明显(P>0.05);不同接尘工龄工人血清骨膜蛋白、IgE水平差异无统计学意义(P>0.05);血清骨膜蛋白与IgE之间均呈明显正相关关系(P<0.001)。结论职业暴露7-ACA、6-APA可导致血清骨膜蛋白、IgE表达水平升高,且血清骨膜蛋白水平升高与接尘浓度有关,有潜力成为7-ACA或6-APA所致职业性哮喘相关的生物标志物。