化妆品中黄樟素和6-甲基香豆素的气相色谱-质谱测定法

目的研究建立用气相色谱-质谱联用法测定化妆品中黄樟素、6-甲基香豆素的方法。方法样品用甲醇提取,超声后定容,脱水,经0.45μm滤膜过滤,用GC-MS法定性,外标法定量。结果方法的回收率为101.3%～106.0%,RSD为0.9%～1.4%(黄樟素),0.9%～2.1%(6-甲基香豆素),黄樟素和6-甲基香豆素的测定限(以S/N=10计)分别为5、10μg/g。结论该方法准确度和灵敏度均较高,样品用量少,检测周期短,用于测定化妆品中黄樟素、6-甲基香豆素的含量,结果满意。

化妆品中6-甲基香豆素的高效液相色谱测定法

目的建立化妆品中6-甲基香豆素的高效液相色谱测定方法。方法样品用乙醇提取,以乙腈+0.02mol/L磷酸二氢钠(pH=3.5,35∶65)为流动相,C18柱分离,二级管阵列检测器测定6-甲基香豆素。结果线性范围为1.0～25.0mg/L,最低检出限为0.0001%(取样1.0g),相对标准偏差为2.0%～4.4%,回收率为96.6%～99.2%。结论该方法简便、快速、准确,适用于化妆品中6-甲基香豆素的测定。

6-甲基香豆素分子印迹聚合物微球与共聚微球的制备与研究

为了获得6-甲基香豆素分子印迹聚合物微球与共聚微球,以6-甲基香豆素为模板分子,首选采用分散聚合方法制得的纳米级聚苯乙烯微球(PS)为种球,通过单步溶胀聚合法在水相中制备了单分散分子印迹聚合物微球(MIPs);然后选用甲醇/水极性混合溶剂作反应介质,以聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为分散剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,采用分散共聚的方法制备微米级单分散新型苯乙烯/6-甲基香豆素微球;通过扫描电镜、紫外光谱和红外光谱等手段对两种微球进行了表征。研究表明:采用共聚法得到的微球单分散性良好,无破损、无缺陷,非常光滑,微球其平均粒径为450—500 nm左右;所制得的MIPs平均粒径为200—300 nm,表面粗糙,具有一定孔径,特异吸附性能良好;当甲醇和水比例为80∶20时,单体配比为100∶2时,可以得到粒径分布均匀的共聚微球。

尿酸在聚6-甲基香豆素修饰的玻碳电极上的电化学行为

制备了聚6-甲基香豆素修饰玻碳电极,研究了尿酸(UA)在该修饰电极上的电化学行为。实验结果表明:在pH=5.0的磷酸盐缓冲溶液中,扫描速率为50mV/s时,尿酸在修饰电极上于0.352V处产生一个灵敏的氧化峰,在0.278V处有一弱的还原峰。经线性扫描伏安法测定,氧化峰电流与尿酸浓度在2.5×10-6～1.0×10-5mol/L范围内表现出良好的线性关系,检出限为1.0×10-6mol/L。将修饰电极在常温下放置50d及将体系温度升高到75℃时,修饰电极对尿酸的响应电流大体不变,结果满意。

烟用香精香料中二氢香豆素和6-甲基香豆素的GC/MS分析

本文建立了一种烟用香精香料中二氢香豆素和6-甲基香豆素的分析方法,即在烟用香精香料中加入含内标的二氯甲烷溶液稀释试样,并振荡混匀,静置后,取上清液注入气相色谱-质谱联用仪(GC/MS)测定,以萘为内标进行定量。结果表明,二氢香豆素和6-甲基香豆素的平均回收率分别为96.4%和97.8%,相对标准偏差分别为1.64%和2.11%。本法简便、准确、快捷,适合烟用香精香料中二氢香豆素和6-甲基香豆素的同时检测。采用本法测定了215个烟用香精香料样品,结果显示:①有23个样品检出二氢香豆素,检出率为10.69%;②有4个样品检出含有6-甲基香豆素,检出率为1.86%。

气相色谱法测定化妆品中6-甲基香豆素

目的建立测定化妆品中6 甲基香豆素的气相色谱法。方法样品用丙酮溶解 ,超声波均质 ,离心 ,经HP 1色谱柱分离 ,氢焰离子化检测器检测。结果6 甲基香豆素浓度在0 0005%～0 01%范围内 ,线性关系好 ,最低检测浓度0 0001%(取样1g)。测定值相对标准偏差小于4 2 % ,回收率范围为94%～100%。结论该方法简便、快速、灵敏。

6-甲基香豆素联合紫杉醇对人食管癌细胞增殖、迁移的影响

目的:探讨6-甲基香豆素(COU)联合紫杉醇(PTX)对人食管癌Ec109细胞增殖、迁移的影响。方法:用COU(0.000、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000 mg/L)及PTX(0.00、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mg/L)处理Ec109细胞,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,绘制细胞增殖抑制率曲线,计算半数抑制浓度(IC 50)。将Ec109细胞分为4组,分别给予常规培养基、6.5 mg/L的COU、1.0 mg/L的PTX、6.5 mg/L的COU+1.0 mg/L的PTX培养24 h,划痕实验检测细胞迁移能力,qRT-PCR方法检测细胞中CyclinD1、EGFR、FOXO3a、Caspase-3 mRNA的表达。结果:COU、PTX对Ec109的IC 50分别为6.33 mg/L、0.94 mg/L。6.5 mg/L的COU或1.0 mg/L的PTX单独作用后,Ec109细胞迁移能力降低(P<0.05),EGFR、CyclinD1 mRNA表达下调(P<0.05),FOXO3a、Caspase-3 mRNA表达上调;两药联用具有协同增效的作用(P<0.05)。结论:COU联合PTX可显著抑制人食管癌Ec109细胞的增殖及迁移。

化妆品中6-甲基香豆素的高效液相色谱-紫外检测器法测定

建立了高效液相色谱-紫外检测器法测定化妆品中6-甲基香豆素含量的方法。样品通过甲醇超声提取20 min,离心、过滤,Agilent ZORBAX300SB-C18(4.6×250 mm,5μm)分析柱分离分析,紫外检测器检测,外标法定量。方法在0.101 9～10.19μg/mL范围内线性关系良好,相关系数(r)=0.999 99,回收率在94.67%～103.15%之间,相对标准偏差(RSD)小于3%,检出限(S/N=3)为0.05 mg/kg,定量限(S/N=10)为0.10 mg/kg。采用该方法测定了15种化妆品中6-甲基香豆素的含量,结果满意,可以满足实验室日常检测工作的需要。

HPLC-DAD法和GC-FID法测定化妆品中6-甲基香豆素的方法比较

对化妆品中6-甲基香豆素测定的HPLC-DAD法和GC-FID法进行了比较,如有阳性样品,用GC-MS法进行确证。用甲醇提取化妆品中6-甲基香豆素,优化两种方法的色谱条件,并对样品进行测定,比较了两种方法的回收率、精密度、相关系数、检出限及定量限。结果表明,两种测定方法的线性关系良好,HPLC-DAD法加标回收率为92.20%~102.80%,RSD为0.77%~2.00%,检出限为0.05 mg/kg,定量限为0.17 mg/kg;GC-FID法加标回收率为97.30%~103.28%,RSD为0.47%~4.87%,检出限为1.3 mg/kg,定量限为5.0 mg/kg;HPLC-DAD法比GC-FID法的检出限更低且灵敏度更高,对含量低的样品更有优势。

3-(3,4-二甲氧基苯基)-6-甲基香豆素合成方法的改进

目的:探讨3-芳基取代香豆素衍生物的简易合成方法。方法:以5-甲基水杨醛和3,4-二甲氧基苯乙酸为原料,在醋酐和三乙胺条件下,经加热环合反应,合成3-(3,4-二甲氧基苯基)-6-甲基香豆素。结果:与文献方法相比,本法的一步反应收率从12%～33%提高到73.6%。结论:本法操作简单,收率高,更具实用性。

HPLC同时测定化妆品中苯甲酸和6-甲基香豆素

建立了化妆品中苯甲酸和6-甲基香豆素的高效液相色谱测定方法。样品用甲醇提取,以甲醇:0.02 moL/L磷酸二氢钠缓冲溶液(pH=3.5)为流动相,C18柱分离,紫外检测器测定。结果显示:线性范围为0.1～20.0 mg/L,苯甲酸和6-甲基香豆素最低检出限分别为17.0μg/g、0.05μg/g,回收率为91.3%～100.0%。该方法为化妆品中多种防腐剂的同时测定提供了一个新的思路。

6-甲基香豆素对乙型肝炎病毒转录和复制的影响

目的探讨6-甲基香豆素对乙型肝炎病毒(HBV)转录和复制的影响。方法MTT法检测6-甲基香豆素在HepG2.2.15和HepG2-NTCP细胞中的细胞毒性。使用含0.1%DMSO的生理盐水(阴性对照),6-甲基香豆素(5、10、20μmol/L)及恩替卡韦(25 nmol/L,阳性对照)处理HepG2.2.15和HepG2-NTCP细胞6 d。RT-qPCR检测细胞中HBV DNA和HBV RNA的水平,ELISA检测细胞上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平。雄性HBV转基因小鼠每2天腹腔注射含0.1%DMSO的生理盐水(阴性对照),6-甲基香豆素(5 mg/kg)和恩替卡韦(0.02 mg/kg,阳性对照)1次,每6天采血及称重1次。药物处理24 d后,处死小鼠并解剖取肝脏。RT-qPCR检测小鼠血清和肝脏组织中HBV DNA水平及肝脏组织中HBV RNA水平,ELISA检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、HBsAg和HBeAg水平。结果与对照组相比,6-甲基香豆素可以呈浓度依赖性的降低HepG2.2.15和HepG2-NTCP细胞中HBV DNA和HBV RNA及细胞分泌的HBsAg和HBeAg水平(P<0.05)。6-甲基香豆素在不影响小鼠体重及AST、ALT的同时,可以显著降低HBV转基因小鼠血清中HBV DNA、HBsAg和HBeAg水平及小鼠肝脏组织中HBV DNA和HBV RNA水平(P<0.05)。结论在HepG2.2.15细胞、HepG2-NTCP细胞和HBV转基因小鼠模型中6-甲基香豆素均具有较强的抑制HBV转录和复制的作用。

6-甲基-4-苯基-3,4-二氢香豆素的合成工艺改进

目的:以浓磷酸为催化剂制备6-甲基-4-苯基-3,4-二氢香豆素。方法:以对甲酚和苯甲醛为主要原料,经脱水、环合等方法制备目标产物。结果:产品收率达74.2%。结论:该方法有效降低了酸对设备的腐蚀程度,使合成工艺条件得到了优化,利于工业化生产。

正交设计法优化6-甲基-4-苯基-3,4-二氢香豆素的制备工艺

目的:优化6-甲基-4-苯基-3,4-二氢香豆素的制备工艺条件。方法:以对甲酚和肉桂酸为主要原料,以浓磷酸为催化剂,经脱水、环合制备标题化合物。结果:获得了目标产物,收率达81.7%。结论:使用浓磷酸做催化剂,能够制得目标产物,降低了试剂对设备的腐蚀,使合成工艺条件得到了优化。

线粒体靶向6-(4-(二甲氨基)吡啶)甲基香豆素的合成及其辐射增敏作用

通过溴化和亲电两步反应得到线粒体靶向的抗肿瘤及辐射增敏药物6-(4-(二甲氨基)吡啶)甲基香豆素,探讨其对肺癌细胞系A549的抑制作用及辐射增敏作用。采用MTT法检测其对A549细胞的抑制率;克隆形成法检测辐射增敏作用(通过多靶单击方程拟合A549细胞的吸收剂量存活曲线,求出辐射增敏比,评价增敏效果);DCFH-DA法测定活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量。结果表明:A549细胞抑制率与药物浓度基本呈正相关;和照射组相比,联合组(照射加给药)存活分数明显降低(p<0.05),辐射增敏比RSE=1.585;各剂量下,联合组与照射组相比,ROS均有显著性提高(p<0.05)。结果提示,6-(4-(二甲氨基)吡啶)甲基香豆素对A549细胞具有抑制作用,且呈剂量依赖性;对A549细胞具有辐射增敏作用;可以显著提高A549细胞中的ROS含量。

8-或6-(3-氯苯甲酰)香豆素衍生物的合成、表征、生物活性及与牛血清白蛋白的相互作用

合成了2个新化合物7-羟基-8-(3-氯苯甲酰基)-4-甲基香豆素(1)和7-羟基-6-(3-氯苯甲酰基)-4-甲基香豆素(2).X射线单晶衍射分析表明,2个化合物的晶体同属于单斜晶系,P21/c空间群,化合物1:a=1.21527(14)nm,b=1.01550(12)nm,c=1.5045(2)nm,β=112.377(2)°,V=1.7169(4)nm3,Dc=1.396 g/cm3,Z=4,F(000)=752,R1=0.0415,wR2=0.0981[I>2σ(I)],S=1.063;化合物2:a=2.0168(2)nm,b=0.76229(12)nm,c=2.25497(17)nm,β=123.987(6)°,V=0.8745(6)nm3,Dc=1.454 g/cm3,Z=8,F(000)=1296,R1=0.0604,wR2=0.1384[I>2σ(I)],S=0.948.抗菌实验结果表明,2个化合物对大肠杆菌(E.coli)、枯草杆菌(B.subtilis)和金色葡萄球菌(S.aureus)均有中等程度的抑制作用;体外抗氧化实验结果表明,2个化合物对超氧阴离子自由基(O2-.)、羟基自由基(.OH)和二苯代苦味肼基自由基(DPPH.)均有良好的清除能力.采用荧光光谱法研究了不同温度下2个化合物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,结果表明,2个化合物对BSA的荧光猝灭均属于静态猝灭;热力学数据表明,化合物1(ΔH>0,ΔS>0,ΔG<0)与BSA主要以疏水作用力相结合,化合物2(ΔH<0,ΔS<0,ΔG<0)与BSA主要以氢键或范德华力相结合;BSA与化合物1和化合物2间的距离分别为2.59和2.38 nm,说明2个化合物与BSA之间可能发生了非辐射能量转移.

6-甲基-4-羟基香豆素的合成研究

香豆素类化合物是一种具有很强的生理活性、药理活性及生物活性的天然产物。4-羟基香豆素是合成香豆素类衍生物的一类重要的有机中间体。本文以4-甲基苯酚为原料,通过乙酰化,重排,缩合反应,合成6-甲基-4-羟基香豆素,三步反应总收率为40.0%,其结构经质谱和~1HNMR确证。

7-羟基-香豆素硝基衍生物的合成及抑菌活性

设计合成了7个7-羟基-香豆素硝基衍生物,以~1H NMR确证了其结构,并以菌丝生长速率法对其抑菌活性进行了测定。合成衍生物中4-甲基-7-羟基-6-硝基-香豆素抑菌活性最强,对苹果腐烂病菌及苹果轮纹病菌的EC50约10mg·L^(-1),4-甲基、7-羟基、6-硝基对香豆素抑菌活性有利。

高效液相色谱法测定化妆品中三种香豆素的含量

建立了测定三种香豆素类物质———香豆素,7-甲氧基香豆素,6-甲基香豆素在化妆品中含量的高效液相色谱法。采用甲醇超声提取,液相色谱分离测定。结果为三种被测物在0.1μg/mL^40μg/mL均与对应的峰面积呈良好线性关系(R>0.999 9)。在添加质量浓度为0.1μg/mL、0.4μg/mL、2.0μg/mL时,回收率在86.2%~97.2%,精密度RSD<4.3%,最低检出限香豆素0.03μg/mL(S/N=3.8)、7-甲氧基香豆素0.01μg/mL(S/N=3.6)和6-甲基香豆素0.03μg/mL(S/N=2.4)。

气相色谱质谱法测定化妆品中三种香豆素类物质的含量

建立了测定三种香豆素类物质——香豆素,6-甲基香豆素,7-甲氧基香豆素——在化妆品中含量的气相色谱质谱法。采用甲醇超声提取,气相色谱法分离测定。色谱柱为HP-5柱,流动相为高纯氮气,流速为1.5ml/min,分流比为10∶1,气化室温度为240℃,程序升温,初温100℃,保留1min,以5℃/min的速率升至120℃,继续以20℃/min的速率升至250℃,保留1min。总分析时长12.5min。检测器温度为280℃。结果为三种被测物在1～50μg/mL范围内均与对应的峰面积呈良好线性关系(r>0.9999)。在添加浓度为1.1,2.0,5.0μg/mL时,回收率在90.0%～102.8%之间,精密度RSD<2.7,最低检出限为香豆素0.3μg/mL(S/N=3.0),6-甲基香豆素0.3μg/mL(S/N=3.2),7-甲氧基香豆素0.5μg/mL(S/N=5.0)。最后使用质谱进行验证。该法简便、快速、准确,可用于化妆品中的此三种物质含量的检测。