HPLC法间接测定人和猪红细胞硫嘌呤甲基转移酶活性及其差异分析

目的建立测定红细胞内6-甲基-巯基嘌呤（6-MMP）浓度的HPLC法，换算出红细胞和肝组织中硫嘌呤甲基转移酶（TPMT）活性，探讨猪与人肝脏TPMT酶活性的差异。方法使用岛津2010C系列高效液相色谱仪，Symmetry C18（150mm×3．9mm，5μm）色谱柱。样品用乙酸乙酯萃取后进样，0．1％的乙酸：甲醇为流动相梯度洗脱，总流速1．0mL／min，280nm波长检测，内标法定量。结果标准曲线在6．25-100nmol／mL范围内有良好线性，方法回收率为98．08%～100．05％，萃取回收率为88．1％～92．4％，批内RSD为1．0％～1．5％，批间RSD为1．0%～4．4％。测定显示人TPMT活性为（17．45±3．62）U，家猪TPMT活性为（7．65±1．35）U，版纳猪TPMT活性为（8．73±1．55）U。结论本方法适用于临床和科研中测定人和猪红细胞和肝组织TPMT活性。实验结果提示猪对嘌呤类药物的代谢能力低于人类。