阴离子交换蛋白1在HEK293t细胞中的高效表达与鉴定

目的 在人胚肾HEK2 93t(2 93t)细胞高效表达具有阴离子转运活性的阴离子交换蛋白1(AE1)。方法 用传统磷酸钙转染法将质粒pRBG4- AE1转入2 93t细胞,免疫荧光及Westernblotting验证蛋白表达及正常的细胞膜定位后,应用6 - 甲氧基- N- (3- 磺丙基)喹啉铵(SPQ)观察表达的AE1是否具有阴离子转运活性。结果 在2 93t细胞中,显示AE1高效表达。转染pRBG4 - AE1后2 93t细胞相对于正常以及转染空载体对照组的阴离子交换功能明显增强。结论 利用传统磷酸钙转染法,在2 93t可高效表达具有正常跨膜拓扑结构及阴离子转运活性的AE1,为进一步研究其相关功能奠定了基础。