期刊文献+
共找到40篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4对卵巢癌细胞干性的影响及其机制
1
作者 高瑞芳 孙丽丽 +8 位作者 荀敬 李霞 纪爱玲 杨洁 胡思科 王曼雪 李伟 张颖 刘洪斌 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2024年第3期405-410,共6页
目的:探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4(PFKFB4)对卵巢癌细胞干性的影响及其机制。方法:利用慢病毒系统构建PFKFB4过表达的卵巢癌SKOV3和A2780稳定细胞系。采用Real-time PCR和Western blot检测干性相关转录因子SOX2、OCT4和NA... 目的:探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4(PFKFB4)对卵巢癌细胞干性的影响及其机制。方法:利用慢病毒系统构建PFKFB4过表达的卵巢癌SKOV3和A2780稳定细胞系。采用Real-time PCR和Western blot检测干性相关转录因子SOX2、OCT4和NANOG的表达,成球实验检测细胞的成球能力,确定PFKFB4对卵巢癌细胞干性的影响;利用自噬激活剂雷帕霉素处理卵巢癌细胞,检测SOX2、OCT4和NANOG的表达及细胞的成球能力,评估自噬对卵巢癌细胞干性的影响;Western blot检测自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ和p62的表达,确定PFKFB4对卵巢癌细胞自噬的影响;生物信息学分析卵巢癌中PFKFB4与BNIP3表达的相关性;Real-time PCR和Western blot检测PFKFB4对BNIP3表达的影响。结果:过表达PFKFB4促进SOX2、OCT4和NANOG的表达和卵巢癌细胞的成球能力;雷帕霉素刺激增加SOX2、OCT4和NANOG的表达和卵巢癌细胞的成球能力;过表达PFKFB4增加卵巢细胞自噬水平,包括增加LC3B-Ⅱ蛋白表达、降低p62蛋白表达;生物信息学分析显示,卵巢癌组织中PFKFB4与BNIP3表达高度正相关;过表达PFKFB4增加BNIP3的mRNA和蛋白水平。结论:PFKFB4可能通过激活BNIP3介导的细胞自噬增强卵巢癌细胞的干性。 展开更多
关键词 卵巢癌 6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-磷酸酶4 干性 自噬 BNIP3
下载PDF
玉米6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶基因的克隆 被引量:2
2
作者 胡建广 杨金水 +1 位作者 赵相山 李宝健 《中山大学学报论丛》 1997年第5期72-76,共5页
以玉米F1减弱表达基因的cDNA片段为探针,从建立的玉米cDNA的文库中分离到相应的cDNA克隆.经测序和序列同源分析证明,该cDNA编码6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶,其氨基酸序列与人类、大鼠、牛和... 以玉米F1减弱表达基因的cDNA片段为探针,从建立的玉米cDNA的文库中分离到相应的cDNA克隆.经测序和序列同源分析证明,该cDNA编码6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶,其氨基酸序列与人类、大鼠、牛和鸡等动物肝脏相同基因对应区段的相似性分为为65.7%,63.4%,63.7%和61.2%. 展开更多
关键词 玉米 6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-磷酸 基因克隆
下载PDF
6-磷酸果糖-2-激酶在结直肠癌中的表达及临床意义 被引量:4
3
作者 魏莱 王喆 梁后杰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期983-989,共7页
目的检测6-磷酸果糖-2-激酶(6-phosphofructokinase-2,PFKFB)在结直肠癌及癌旁组织中的表达,并探讨其临床意义。方法应用组织芯片结合免疫组化技术检测本院90例结直肠癌组织标本和相应90例癌旁组织中PFKFB1、PFKFB2、PFKFB3、PFKFB4及... 目的检测6-磷酸果糖-2-激酶(6-phosphofructokinase-2,PFKFB)在结直肠癌及癌旁组织中的表达,并探讨其临床意义。方法应用组织芯片结合免疫组化技术检测本院90例结直肠癌组织标本和相应90例癌旁组织中PFKFB1、PFKFB2、PFKFB3、PFKFB4及缺氧诱导因子-1(HIF1-α)的表达。结果 PFKFB1、PFKFB2、PFKFB3、PFKFB4和HIF1-α在90例结直肠癌组织中高表达例数分别为57、59、59、51和60,表达均显著高于相应癌旁组织(P<0.05)。PFKFB3在结直肠癌组织中的高表达与肿瘤的大小、临床分期、淋巴结转移及预后等密切相关(P<0.05),高表达组比低表达组预后差(P<0.01),临床分期高的结直肠癌患者中,PFKFB3的高表达提示了临床预后差(P<0.01),但在临床分期低的患者中不存在这种差异(P>0.05)。PFKFB3的表达同HIF-1α的表达呈正相关(r=0.627,P<0.01)。而PFKFB1、PFKFB2和PFKFB4的表达与结直肠癌的肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移及预后等无显著相关性(P>0.05)。结论 PFKFB家族在结直肠癌中高表达,且结直肠癌患者中PFKFB3高表达者比低表达者预后差,并且其作用同HIF1-α的表达密切相关。 展开更多
关键词 结直肠癌 组织芯片 6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-磷酸 缺氧诱导因子-1
下载PDF
6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶(PFKFB3)抑制剂3PO对高糖环境下人脐静脉血管内皮细胞新生血管形成的影响 被引量:4
4
作者 胡萍 韦芳 +3 位作者 顾青 曹阳 田敏 吕红彬 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第5期428-432,共5页
目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶(6-phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 3,PFKFB3)抑制剂3-(3-吡啶基)-1-(4-吡啶基)-2-丙烯-1-酮[3-(3-pyridinyl)-1-(4-pyridinyl)-2-propen-1-one,3PO]对高糖环境下人脐... 目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶(6-phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 3,PFKFB3)抑制剂3-(3-吡啶基)-1-(4-吡啶基)-2-丙烯-1-酮[3-(3-pyridinyl)-1-(4-pyridinyl)-2-propen-1-one,3PO]对高糖环境下人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖、迁移和管腔形成的影响。方法将传代培养的HUVEC随机分为4组:正常对照组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)、高渗组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+24.5 mmol·L^(-1)甘露醇)、高糖组(30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖)及高糖+3PO组(30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖+10μmol·L^(-1) 3PO)。细胞同步化后按分组情况更换相应培养基,继续培养细胞,用于后续实验。采用MTS实验检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移率,体外管腔形成实验检测细胞成管情况,实时荧光定量PCR检测PFKFB3 mRNA表达,Western blot检测PFKFB3及ERK蛋白表达情况。结果与正常对照组相比,高渗组细胞增殖能力降低(均为P<0.05);24 h高糖组细胞增殖能力无明显升高(P>0.05),48 h高糖组细胞增殖能力升高(P<0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组细胞增殖能力明显被抑制(均为P<0.05)。与正常对照组相比,高渗组细胞迁移率明显升高(均为P<0.05);24 h高糖组细胞迁移率明显升高(P<0.05),但在48 h高糖组中细胞迁移率升高不明显(P>0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组细胞迁移率明显降低(均为P<0.05)。与正常对照组相比,高渗组及高糖组细胞管腔形成能力均明显减弱(均为P<0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组细胞管腔形成能力减弱(P<0.05)。与正常对照组相比,高渗组PFKFB3 mRNA的表达水平变化不大(P>0.05),高糖组PFKFB3 mRNA的表达升高(P<0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组PFKFB3 mRNA的表达明显降低(P<0.05)。与正常对照组相比,高渗组及高糖组中p-ERK/ERK蛋白比值及PFKFB3蛋白表达均升高(均为P<0.05)。与高糖组相比,高糖+3PO组p-ERK/ERK蛋白比值及PFKFB3蛋白表达下降(均为P<0.05)。结论 PFKFB3抑制剂3PO可明显降低高糖环境下HUVEC的增殖、迁移和管腔形成的能力,其作用机制可能与MAPK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 高糖 6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2 6-磷酸 3-(3-吡啶基)-1-(4-吡啶基)-2-丙烯-1- 新生血管 糖尿病视网膜病变
下载PDF
6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4对癌细胞的增殖及迁移的影响及机制研究 被引量:2
5
作者 高瑞芳 荀敬 +5 位作者 李宁昕 李霞 张颖 沈丽琳 罗娜 刘洪斌 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2021年第3期503-508,共6页
目的:探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4(PFKFB4)对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法:利用慢病毒构建PFKFB4沉默和过表达的卵巢癌A2780稳定细胞系,并用qPCR和Western blotting检测PFKFB4沉默和过表达效果,通过CCK-8实... 目的:探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4(PFKFB4)对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法:利用慢病毒构建PFKFB4沉默和过表达的卵巢癌A2780稳定细胞系,并用qPCR和Western blotting检测PFKFB4沉默和过表达效果,通过CCK-8实验、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell实验、流式细胞术和试剂盒分别检测A2780细胞的增殖和迁移能力以及糖酵解水平。结果:成功构建了PFKFB4沉默和过表达的A2780稳定细胞系。与对照组相比,沉默PFKFB4后,A2780细胞的PFKFB4 mRNA和蛋白水平、增殖和迁移能力以及葡萄糖消耗和乳酸分泌水平显著降低,ROS水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);过表达PFKFB4后,A2780细胞的PFKFB4 mRNA和蛋白水平、增殖和迁移能力以及葡萄糖消耗和乳酸分泌水平显著升高,ROS水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PFKFB4可通过增强糖酵解活性,发挥促进卵巢癌细胞的增殖和迁移的作用。 展开更多
关键词 6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-磷酸酶4 卵巢癌 增殖 迁移 糖酵解
下载PDF
双功能酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶4(PFKFB4)在肿瘤中的作用与研究进展 被引量:2
6
作者 余朝军 赵宁辉 《医学研究杂志》 2020年第3期166-170,共5页
即使微环境中氧气充足,肿瘤细胞仍以较高的糖酵解率来代谢葡萄糖,这种独特的代谢方式称为有氧糖酵解(Warburg效应).这种肿瘤细胞的代谢重编程可诱导肿瘤细胞中代谢酶系和代谢方式的改变.代谢酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶(6-ph... 即使微环境中氧气充足,肿瘤细胞仍以较高的糖酵解率来代谢葡萄糖,这种独特的代谢方式称为有氧糖酵解(Warburg效应).这种肿瘤细胞的代谢重编程可诱导肿瘤细胞中代谢酶系和代谢方式的改变.代谢酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatases,PFKFB)家族成员是果糖-2,6-二磷酸(F-2,6-BP)的最强变构激活剂,F-2,6-BP可变构激活糖酵解反应的关键酶磷酸果糖激酶-1(PFK-1),控制糖酵解通量,影响肿瘤生长.PFKFB4在多种肿瘤中过表达,是癌细胞生存和生长所必需的.本文综述了肿瘤进展中PFKFB4在糖酵解及糖酵解以外的功能,并讨论了靶向PFKFB4治疗的研究进展. 展开更多
关键词 6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-磷酸酶4 糖酵解 代谢重编程 肿瘤
下载PDF
缺氧诱导因子1α/6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3信号通路对糖酵解诱导胰岛β细胞去分化作用的研究进展
7
作者 张茜 魏皓月 +3 位作者 魏代浩 马琨 沈瑛锴 黄延芹 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期222-226,共5页
胰岛β细胞去分化是导致T2DM患者Ins分泌缺陷或IR的重要原因。缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)信号通路是与T2DM相关的生物途径,参与高糖环境下无氧糖酵解诱导胰岛β细胞去分化。本文综述HIF-1... 胰岛β细胞去分化是导致T2DM患者Ins分泌缺陷或IR的重要原因。缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)信号通路是与T2DM相关的生物途径,参与高糖环境下无氧糖酵解诱导胰岛β细胞去分化。本文综述HIF-1α/PFKFB3信号通路对糖酵解诱导胰岛β细胞去分化作用的研究进展。 展开更多
关键词 糖尿病 2 去分化 糖酵解 缺氧诱导因子1α亚基/6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-磷酸酶3信号通路 胰岛β细胞
原文传递
miR-103a-3P调控PFK-2对结直肠癌细胞增殖及糖酵解的作用机制
8
作者 冯盼盼 王恒 王晓霞 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第2期454-459,共6页
目的探究微小RNA(miR)-103a-3P调控6-磷酸果糖激酶(PFK)-2对结直肠癌细胞增殖及糖酵解的作用机制研究。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测正常结肠上皮细胞及4种结直肠癌细胞系中miR-103a-3p、PFK-2表达水平,将阴性对照、miR-103a-3... 目的探究微小RNA(miR)-103a-3P调控6-磷酸果糖激酶(PFK)-2对结直肠癌细胞增殖及糖酵解的作用机制研究。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测正常结肠上皮细胞及4种结直肠癌细胞系中miR-103a-3p、PFK-2表达水平,将阴性对照、miR-103a-3P、PFK-2类似物转染至结直肠癌细胞中,EdU法检测细胞增殖,葡萄糖检测试剂盒和乳酸检测试剂盒检测糖酵解相关指标,双荧光素酶报告实验证实miR-103a-3P和PFK-2的相互作用。结果结直肠癌细胞系中的miR-103a-3P、PFK-2 mRNA表达量显著高于正常结直肠癌上皮细胞系NCM460(P<0.05),其中HCT116的miR-103a-3P、PFK-2 mRNA升高最大(P<0.05),选其备用。与CC组相比,MN组及PN组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量无统计学差异(P>0.05),MI组、PI组、MP组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显降低(P<0.05)。与MN组相比,MM组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显升高(P<0.05)。与MM组相比,MI组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显降低(P<0.05)。与PN组相比,PM组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显升高(P<0.05)。与PM组相比,PI组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显降低(P<0.05);MI组与PI组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量无统计学差异(P>0.05)。与PI组相比,MP组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显降低(P<0.05)。双荧光素酶报告结果显示,转染miR-103a-3P后可显著促进PFK-2-3′-UTR-WT的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变基因无显著影响(P>0.05),且PFK-2与miR-103a-3P呈正相关。结论抑制miR-103a-3P表达可降低结直肠癌细胞增殖,并有效改善糖酵解,其作用机制可能与抑制PFK-2有关。 展开更多
关键词 MicroRNA-103a-3P 6-磷酸果糖激酶(PFK)-2 结直肠癌 细胞增殖 糖酵解
下载PDF
Structure and Expression Analyses of a Gene Encoding Fructose-6-Phosphate, 2-Kinase/Fructose-2,6-Bisphosphatase from Maize 被引量:1
9
作者 王东 杜喜玲 +3 位作者 张红生 钱晓茵 杨金水 翟虎渠 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第4期466-471,共6页
A full-length cDNA encoding fructose-6-phosphate, 2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase from maize (Zea mays L.) was cloned by the methods of reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and rapid amplifica... A full-length cDNA encoding fructose-6-phosphate, 2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase from maize (Zea mays L.) was cloned by the methods of reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and rapid amplification of cDNA ends (RACE), and designated as mF2KP. The encoded protein is composed of two regions. Its COOH-terminal region is catalytic region and homologous to the enzymes from other eukaryotes; and its NH 2-terminal region is common and special region only in plant. A truncated fragment of mF2KP covering integrated catalytic region was expressed in Escherichia coli. The fusion protein had the activities of fructose-6-phosphate, 2-kinase as well as fructose-2,6-bisphosphatase. Northern blot showed that the transcript level of mF2KP in seedlings initiated from strong-vigor seeds is lower than that from weak-vigor seeds. 展开更多
关键词 maize fructose-2 6-bisphosphate fructose-6-phosphate 2-kinase/fructose-2 6-bisphosphatase seed vigor
下载PDF
果糖激酶和脂联素对心力衰竭心脏能量代谢的影响 被引量:3
10
作者 林立 廖禹林 《心血管病学进展》 CAS 2010年第4期599-602,共4页
能量代谢与心力衰竭存在着复杂的关系。结合我们的研究成果,以6-磷酸果糖激酶2/果糖-2,6-二磷酸酶与脂联素的研究进展为重点,介绍能量代谢对心脏的影响,并对临床意义做简要探讨。
关键词 能量代谢 心力衰竭 6-磷酸果糖激酶2 果糖-2 6-磷酸 脂联素
下载PDF
微小RNA-488靶向6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3基因对前列腺癌细胞增殖与糖酵解的影响 被引量:5
11
作者 李小娟 王骏 +8 位作者 李军 温志强 孙东麟 李志广 韩跃辅 纪梓良 冷区 曾春贤 温星桥 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1535-1537,共3页
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-488对前列腺癌细胞株增殖及糖酵解能力的影响及其机制。 方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-488在前列腺癌细胞株的表达。生物信息学、双荧光素酶实验验证miR-488的靶点,转染miR-48... 目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-488对前列腺癌细胞株增殖及糖酵解能力的影响及其机制。 方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-488在前列腺癌细胞株的表达。生物信息学、双荧光素酶实验验证miR-488的靶点,转染miR-488模拟物24 h后,以25 μg蛋白行Western blot、Real-time PCR检测6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)的表达。转染miR-488模拟物或同时转染过表达PFKFB3质粒24 h后,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测PC-3、DU145细胞增殖,通过糖摄取及乳酸分泌实验检测糖酵解能力。结果 与正常前列腺上皮细胞RWPE-1比较,miR-488在PC-3、DU145细胞中的表达水平分别为0.26±0.03(P=0.031)、0.19±0.04(P=0.021),而在22RV1、LNCaP细胞中的表达差异无统计学意义。上调miR-488表达后,PC-3、DU145细胞的糖摄取率分别为对照组的0.54±0.03(P=0.042)、0.52±0.01(P=0.032),乳酸分泌率分别为对照组的0.55±0.02(P=0.037)、0.61±0.17(P=0.048),提示糖酵解能力明显下降,细胞增殖能力明显降低。生物信息学及双荧光素酶实验均表明PFKFB3是miR-488的靶点,上调miR-488表达后,PFKFB3 mRNA及蛋白表达均明显降低。同时上调miR-488与PFKFB3表达后,细胞的糖摄取分别为0.79±0.12、0.82±0.11,乳酸分泌分别为对照组的0.77±0.07(P=0.015)、0.83±0.04(P=0.026),提示糖酵解能力升高。此外,细胞增殖能力也明显升高。结论 miR-488可通过下调靶蛋白PFKFB3的表达,从而调控前列腺癌细胞的增殖与糖酵解。 展开更多
关键词 微小RNA-488 6-磷酸果糖激酶-2/果糖磷酸-2同工酶3 前列腺癌 增殖 糖酵解
原文传递
6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3基因敲除小鼠模型的构建 被引量:3
12
作者 王骏 李师耿 +5 位作者 王喻 彭叔彬 陈延雄 韩飞 李骏 温星桥 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2986-2989,共4页
目的建立6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)基因敲除小鼠模型。方法利用类转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)技术,通过构建针对PFKFB3基因的TALEN质粒,并将构建好的TALEN质粒在体外反转录为mRNA。利用原核显微注射... 目的建立6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)基因敲除小鼠模型。方法利用类转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)技术,通过构建针对PFKFB3基因的TALEN质粒,并将构建好的TALEN质粒在体外反转录为mRNA。利用原核显微注射分别将0.1μl转录后的浓度为50ng/山的mRNA注射到C57BL/6品系小鼠受精卵中,将受精卵回送到ICR代孕母鼠输卵管中,得到F0代基因敲除杂合子小鼠。将FU代饲养至10周龄后合笼,从而构建基因敲除纯合子小鼠。所有子代鼠出生1周后剪尾,提取RNA后反转录,PCR产物作为模板进行基因测序鉴定基因型。结果通过TALEN技术成功构建了f1D代基因敲除杂合子小鼠3只,基因测序结果表明分别于靶基因位置缺失了10、4、1对碱基对;因PFKFB3基因敲除纯合子具有胚胎致死性,6只F1代基因敲除小鼠的基因测序结果显示,针对靶基因,编号4、5的小鼠缺失了1对碱基对,6号小鼠缺失4对碱基对,7、8、9号小鼠缺失10对碱基对。结论成功构建了PFKFB3基因敲除杂合子(+/-)小鼠.。 展开更多
关键词 6-磷酸果糖激酶-2/果糖磷酸-2同工酶3 类转录激活样效应因子核酸酶技术 原核显微注射 基因敲除
原文传递
6-磷酸果糖-2-激酶3抑制剂的研究进展 被引量:2
13
作者 侯云雷 张昱 +1 位作者 夏娟娟 赵燕芳 《中国药物化学杂志》 CAS CSCD 2016年第1期65-70,共6页
6-磷酸果糖-2-激酶3/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)是近年来发现的参与细胞代谢的新型激酶之一,它对细胞的生长和增殖具有重要的调节作用。PFKFB3的高表达或过度激活与许多肿瘤疾病的发生发展密切相关,目前已经成为抗肿瘤药物研发的新靶点... 6-磷酸果糖-2-激酶3/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)是近年来发现的参与细胞代谢的新型激酶之一,它对细胞的生长和增殖具有重要的调节作用。PFKFB3的高表达或过度激活与许多肿瘤疾病的发生发展密切相关,目前已经成为抗肿瘤药物研发的新靶点。PFKFB3抑制剂的不断发现为多种肿瘤疾病的治疗提供了新的希望。该文就PFKFB3及其抑制剂的研究进行简要综述。 展开更多
关键词 6-磷酸果糖-2-激酶3 抑制剂 抗肿瘤活性
原文传递
6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3在胃癌中的表达和意义
14
作者 杨鹏 黄义勤 王杰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2563-2565,共3页
目的 检测6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在胃癌组织中的表达,分析PFKFB3对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测87例胃癌患者癌和癌旁组织中PFKFB3 mRNA表达水平,... 目的 检测6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在胃癌组织中的表达,分析PFKFB3对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测87例胃癌患者癌和癌旁组织中PFKFB3 mRNA表达水平,并用统计学方法分析PFKFB3 mRNA表达水平与临床病理特征的相关性.用小干扰RNA (siRNA)干扰胃癌细胞MGC803中PFKFB3的表达,并用噻唑蓝(MTT)法比较干扰后胃癌细胞增殖能力的改变,Transwell法比较干扰后胃癌细胞迁移能力的改变.结果 87例胃癌患者癌组织中PFKFB3的mRNA水平平均是癌旁组织的2.1倍.胃癌组织中PFKFB3的高表达与脉管内癌栓形成、淋巴结转移和TNM分期明显相关.siRNA干扰胃癌细胞中PFKFB3的表达后,胃癌细胞的增殖能力和迁移能力的明显下降.结论 PFKFB3在胃癌癌发生发展过程中发挥重要作用. 展开更多
关键词 胃癌 有氧糖酵解 6-磷酸果糖激酶-2/果糖磷酸-2 细胞增殖 细胞迁移
原文传递
6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3基因对前列腺癌细胞增殖的影响 被引量:1
15
作者 严彬元 王骏 +11 位作者 李小娟 吴涛 曾春贤 陈忠 温志强 李志广 孙东麟 权伟合 周青春 唐金琦 续奇志 温星桥 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期1661-1663,共3页
目的观察6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在前列腺癌组织中的表达及其对PC3和DU145前列腺癌细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学染色(抗体浓度1∶50)方法,观察PFKFB3基因在前列腺癌组织及癌旁组织中的表达。实... 目的观察6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在前列腺癌组织中的表达及其对PC3和DU145前列腺癌细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学染色(抗体浓度1∶50)方法,观察PFKFB3基因在前列腺癌组织及癌旁组织中的表达。实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR,40个循环,188 bp)、Western blot法[30 μl,10%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)]检测PFKFB3 mRNA和蛋白在前列腺癌细胞及前列腺上皮细胞中的表达。采用平板克隆形成实验(40 μmol/L H2O2)与细胞生长实验[20 μl噻唑蓝(MTT)]对比观察敲除PFKFB3基因前后前列腺癌细胞的生长。结果PFKFB3基因在前列腺癌组织中的表达(2.42±0.16)明显高于癌旁组织(1.38±0.10),差异有统计学意义(P=0.031);前列腺癌细胞中PFKFB3 mRNA和蛋白表达水平均高于前列腺上皮细胞,分别为2.0~2.6倍和2.5~4.5倍(P=0.015);敲除PFKFB3基因后,平板克隆形成实验结果显示细胞克隆形成率为敲除前的22%~35%(P=0.018),细胞生长实验结果显示前列腺癌细胞的增殖在第4天受抑制,为对照组的28%~30%(P=0.026)。结论PFKFB3基因在前列腺癌细胞和组织中高表达,PFKFB3基因对前列腺癌细胞的增殖有一定的促进作用。 展开更多
关键词 6-磷酸果糖激酶-2/果糖磷酸-2同工酶3 前列腺癌 增殖
原文传递
铜绿假单胞菌对肺血管内皮细胞功能的影响及其机制
16
作者 张雷 王俊轶 +3 位作者 何翔 吴敏 李国平 黄锦伟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期1-10,共10页
目的探究铜绿假单胞菌(PA)感染对肺血管内皮细胞功能的影响,并探讨其加重小鼠肺部炎症反应的可能机制。方法PAO1菌株感染人肺微血管内皮细胞HULEC-5a 2 h后,采用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测自噬相关基因5(ATG5)、6-磷酸果糖-2-... 目的探究铜绿假单胞菌(PA)感染对肺血管内皮细胞功能的影响,并探讨其加重小鼠肺部炎症反应的可能机制。方法PAO1菌株感染人肺微血管内皮细胞HULEC-5a 2 h后,采用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测自噬相关基因5(ATG5)、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)和钙黏蛋白5(CDH5)的mRNA表达,免疫荧光检测ATG5、PFKFB3和血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的蛋白表达。采用小干扰RNA(siRNA)分别敲减ATG5、PFKFB3后,RT-qPCR检测ATG5、PFKFB3和CDH5的mRNA表达,免疫荧光检测PFKFB3和VE-cadherin的蛋白表达,并采用乳酸测定试剂盒检测细胞内乳酸的水平。采用PAO1菌株感染小鼠后,肺组织切片病理染色观察小鼠肺部炎症,激光共聚焦显微镜观察并分析荧光标记的内皮细胞PFKFB3和VE-cadherin的表达量。结果与对照组比较,PAO1感染HULEC-5a细胞后,PFKFB3 mRNA和蛋白表达均增加(P均<0.05),CDH5 mRNA表达减少(P=0.023),VE-cadherin蛋白表达减少(P<0.001),且连续性被破坏,乳酸含量升高(P=0.017)。与PAO1感染HULEC-5a细胞比较,PAO1感染敲减PFKFB3的HULEC-5a细胞后,CDH5 mRNA表达增加(P=0.043),VE-cadherin荧光连续性得到恢复,乳酸含量降低(P=0.047);PAO1感染敲减ATG5的HULEC-5a细胞后,PFKFB3 mRNA(P=0.013)和蛋白表达(P=0.003)均增加,CDH5 mRNA(P=0.020)和VE-cadherin蛋白表达(P=0.001)均减少,乳酸含量升高(P=0.015)。PAO1感染小鼠后,病理HE染色结果显示,肺泡内明显的红细胞渗漏,炎症细胞浸润,肺泡间隔增宽和部分血管内皮细胞脱落。免疫荧光染色结果显示,与正常小鼠比较,PAO1感染小鼠内皮细胞PFKFB3表达增加,VE-cadherin荧光减弱,且不连续。结论PA可能通过AGT5调控PFKFB3通路,破坏肺血管内皮细胞功能,进而加重小鼠肺部炎症反应。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 肺血管内皮细胞 6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-磷酸酶3 自噬相关基因5 感染
下载PDF
PFKFB4、CXCL8与宫颈癌临床病理特征的关系及在预后评估中的临床价值
17
作者 丁文艳 陈亚军 王平 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第8期897-901,907,共6页
目的 探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4(PFKFB4)及CXC趋化因子配体8(CXCL8)在宫颈癌(CESC)组织中的表达,构建CESC不良预后预测模型并分析其临床应用价值。方法 选取2018年1月至2019年12在南京医科大学附属妇产医院接受根治性... 目的 探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4(PFKFB4)及CXC趋化因子配体8(CXCL8)在宫颈癌(CESC)组织中的表达,构建CESC不良预后预测模型并分析其临床应用价值。方法 选取2018年1月至2019年12在南京医科大学附属妇产医院接受根治性手术的62例CESC患者作为研究对象。采用免疫组织化学法检测组织中PFKFB4、CXCL8水平,并分析其与CESC临床病理特征的关系,Kaplan-Merier生存曲线分析PFKFB4、CXCL8表达对CESC生存情况的影响,多因素Logistic回归模型评估CESC不良预后的危险因素,并由此构建风险预测模型并转化为风险评分体系,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价模型预测CESC不良预后的效能。结果 CESC组织中PFKFB4和CXCL8表达水平高于正常对照组织,差异有统计学意义(P<0.05),并且PFKFB4和CXCL8表达水平升高,患者的生存率降低(Log-rank P=0.028、1.5×10^(-5));PFKFB4、CXCL8表达水平在不同TNM分期、肿瘤分化程度、宫颈浸润深度及淋巴结转移的患者中比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,TNMⅡa期、肿瘤低分化程度、宫颈浸润深度≥2/3、有淋巴结转移,以及PFKFB4、CXCL8高表达是CESC患者不良预后的危险因素(P<0.05)。由此构建的预测模型曲线下面积为0.872,灵敏度为0.925 9,特异度为0.828 6。结论 构建的模型对CESC不良预后的预测具有较好的参考价值,可为临床筛选CESC不良预后高风险人群提供评价依据。 展开更多
关键词 宫颈癌 6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-磷酸酶4 CXC趋化因子配体8 不良预后 预测模型
下载PDF
利心冲剂通过SIRT3/PFKFB3/HIF-1_(α)信号通路促进心肌梗死后心力衰竭小鼠心肌血管新生的作用机制 被引量:5
18
作者 陆文江 刘雨辰 +3 位作者 高想 苏忆玲 王力 陆齐 《中西医结合心脑血管病杂志》 2022年第8期1392-1399,共8页
目的通过检测心肌梗死后心力衰竭小鼠心肌组织沉默调节蛋白3(SIRT3)/6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶3(PFKFB3)/缺氧诱导因子1_(α)(HIF-1_(α))的表达,探讨利心冲剂促进心肌梗死后心力衰竭小鼠心肌血管新生的可能机制。方法将C57B... 目的通过检测心肌梗死后心力衰竭小鼠心肌组织沉默调节蛋白3(SIRT3)/6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶3(PFKFB3)/缺氧诱导因子1_(α)(HIF-1_(α))的表达,探讨利心冲剂促进心肌梗死后心力衰竭小鼠心肌血管新生的可能机制。方法将C57BL/6J雄性小鼠结扎左冠状动脉前降支4周建立心力衰竭模型。将小鼠随机分为对照组、模型组、利心冲剂低剂量组(28 g/kg)、利心冲剂高剂量组(56 g/kg)和美托洛尔组(0.06 g/kg),连续给药4周。采用免疫组化CD31染色检测血管密度,蛋白免疫印迹法检测SIRT3、PFKFB3和HIF-1_(α)表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠心脏功能变差,血管新生减少,心肌SIRT3、PFKFB3、HIF-1_(α)蛋白水平下降(P<0.05)。利心冲剂各剂量组小鼠心脏功能明显改善,血管新生增加,心肌SIRT3、PFKFB3、HIF-1_(α)蛋白水平升高(P<0.05),且与剂量成正比。结论利心冲剂可能通过调控SIRT3/PFKFB3/HIF-1_(α)信号通路,促进心肌梗死后心力衰竭小鼠心肌血管新生。 展开更多
关键词 心力衰竭 心肌梗死 利心冲剂 沉默调节蛋白3/6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2 6-磷酸酶3/缺氧诱导因子1_(α)通路 血管新生 小鼠 实验研究
下载PDF
PFKFB3、S1P2在2型糖尿病大鼠视网膜中的表达及tBHQ的干预作用 被引量:4
19
作者 田敏 余曦 吕红彬 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第2期131-135,共5页
目的研究6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3,PFKFB3)、1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine 1-phosphate receptor 2,S1P2)在2型糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜中的... 目的研究6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3,PFKFB3)、1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine 1-phosphate receptor 2,S1P2)在2型糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜中的表达,并探讨叔丁基对苯二酚(tertiary butylhydroquinone,t BHQ)与PFKFB3、S1P2的关系。方法雄性Sprague Dawley大鼠60只,分为正常对照组(NC组)、DM组和t BHQ组。后两组诱导2型DM模型,其中t BHQ组于造模成功后7 d在高脂高糖饲料中添加10 g·L-1t BHQ进行干预,DM组大鼠继续使用高脂高糖饲料喂养。于t BHQ干预后4周和12周各组大鼠心脏采血,检测血清空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹血清胰岛素(fasting serum insulin,FINs)含量。采用免疫组织化学法及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法定量检测各组大鼠视网膜中PFKFB3、S1P2、VEGF蛋白及m RNA的分布和表达。采用TUNEL法检测各组大鼠视网膜神经节细胞的凋亡指数。结果三组大鼠在4周和12周的FPG、FINs总体比较差异均有统计学意义(均为P=0.000)。4周和12周时各组中均可见PFKFB3、S1P2、VEGF蛋白的阳性表达,且主要分布于视网膜神经节细胞层、内核层。免疫组织化学及q RT-PCR检测结果显示,各组大鼠在造模后不同时间点视网膜中PFKFB3、S1P2、VEGF蛋白及m RNA的相对表达量的总体比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。4周和12周时,DM组PFKFB3、S1P2、VEGF的表达较NC组增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05);t BHQ组PFKFB3、S1P2、VEGF的表达较DM组降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与4周比较,12周时DM组PFKFB3、S1P2、VEGF的蛋白和m RNA表达均增加(均为P<0.05),t BHQ组S1P2蛋白和m RNA的表达较4周降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。TUNEL法检测结果显示,4周和12周时DM组凋亡指数均较NC组增多,t BHQ组均较DM组减少(均为P<0.05);与4周比较,12周时DM组凋亡指数增高,t BHQ组降低(均为P<0.05)。结论PFKFB3、S1P2及VEGF共同参与2型DM大鼠视网膜的病理过程,其可能是通过PFKFB3/VEGF/S1P2信号途径起作用,并可能与视网膜神经节细胞的凋亡相关;tBHQ对2型DM大鼠视网膜有一定的保护作用。 展开更多
关键词 6-磷酸果糖激酶-2/果糖磷酸-2同工酶3 1-磷酸鞘氨醇受体2 叔丁基对苯二酚 糖尿病 视网膜
下载PDF
甘蔗F2KP基因的分子改造及其表达载体的构建
20
作者 王婷 何炜 +2 位作者 何文锦 叶冰莹 陈由强 《亚热带农业研究》 2013年第3期207-211,共5页
果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(fructose-6-phosphate,2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase,F2KP)是影响生物碳积累和分配的调控关键酶,同时也是一个具有激酶和酯酶两种催化活性的双功能酶。为筛选出高酯酶酶活性的改造酶分... 果糖-6-磷酸,2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(fructose-6-phosphate,2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase,F2KP)是影响生物碳积累和分配的调控关键酶,同时也是一个具有激酶和酯酶两种催化活性的双功能酶。为筛选出高酯酶酶活性的改造酶分子,本研究通过定点突变与片段缺失方法改造蔗叶F2KP基因,将蔗叶F2KP基因的Asp442、His508和Arg446分别突变为Gly、Ala和Pro,并且将分别缺失F2KP基因的酯酶的大部分和激酶的大部分构建F2KP激酶重组片段和酯酶重组片段,将突变后的基因与表达载体pPIC9K双酶切后进行连接,构建重组质粒。经过菌落PCR和双酶切重组质粒均证明已将目的片段转到酵母表达载体pPIC9K内。 展开更多
关键词 表达载体构建 果糖_6-磷酸 2-激酶 果糖-2 6-磷酸酯酶(F2KP) 定点突变
下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部