A FACILE TOTAL SYNTHESIS OF 6-PENTYL-α-PYRONE

A facile total synthesis of 6-pentyl-α-pyrone 1 has been described.The key step is the treatment of 2-furyl-pentyl-csrbinol 3 with NBS in aqueous tetrahydrofuran(THF).The overall yield is 34%.

Synergistic Effect in Mixed Capillary Gas Chromatographic Stationap Phases Containing Heptakis(2,3,6-tri-o-pentyl)-β-cyclodextrin and Dibenzo-18-crown-6

used－silical capillary columns containing heptakis（2、3、6－tri－o－pentyl）-β-cyclodextrinand dibenzo-18-crown-6 were prepared．By studying the selectivity of mixed stationary phases forsome solute pairs.as well as comparing with the heptakis（2．3、6-tri-O-pentyl）-β-cyclodextrin and thedibenzo-18-crown-6 used as individual stationary phase、the synergistic effects were observed.These effects were affected by the column temperature．mixed ratio and linear velocity of carrier gas．

绿色木霉LTR-2的ATMT插入突变及5,6-二氢-6-戊基-2H-吡喃-2-酮高产菌株的筛选

通过土壤杆菌介导的T-DNA转化方法,利用土壤杆菌菌株携带的Ti质粒,对绿色木霉LTR-2进行插入突变,获得木霉LTR-2突变体共400株。以串珠镰孢菌为指示菌,采用抑菌圈方法,从中筛选吡喃酮高产突变体6株,PCR和探针杂交证实,T-DNA序列已经插入到木霉LTR-2基因组。经GC-MS分析发现,其中一株突变体T-54在PDA培养基上产生的吡喃酮含量较高,在分生孢子中的含量达到了2.62 mg/g,比出发菌株提高9倍。

6-戊基-2H-吡喃-2-酮对草坪币斑病菌的抑菌活性及其对病害的防治效果

由Clarireedia spp.引起的草坪币斑病是对草坪最具有破坏性的病害之一,6-戊基-2H-吡喃(6-pentyl-2H-pyran-2-one,6PP)是木霉菌属(Trichoderma spp.)重要的抗菌次生代谢产物。为探究6PP对草坪币斑病菌的抑菌活性、防治效果以及草坪币斑病菌对6PP的生理响应,本研究采用菌丝生长速率法测定了6PP对草坪币斑病菌的抑制活性,分别采用室内离体叶片和盆栽试验测定了6PP对草坪币斑病的预防和治疗作用,并分析了在6PP影响下草坪币斑病菌菌丝结构及抗逆相关酶活性的变化。结果显示,6PP对两种草坪币斑病菌C.jacksonii和C.monteithiana均具有高抑制活性,其中对C.monteithiana的平均有效抑制中浓度(EC_(50))为0.37μg/mL,对C.jacksonii的EC_(50)值为0.04μg/mL;经6PP处理后,C.jacksonii和C.monteithiana菌丝生长异常,细胞膜通透性增加,相对电导率上升,细胞膜脂过氧化,细胞膜受损;C.jacksonii过氧化物酶(POD)的活性显著上升,但pH值不变,而C.monteithiana超氧化物歧化酶(SOD)活性、pH值和胞外多糖(EPS)显著上升。1μg/mL的6PP在离体条件下对币斑病的预防效果为91.14%;盆栽条件下,防治效果为72.21%。6PP对草坪币斑病菌抑制作用显著,且在离体和盆栽条件下对病害均有良好的防治效果,具备开发成生态友好型杀菌剂的潜力。

链霉菌Sm4-1986对水稻纹枯病的防治效果

链霉菌Sm4-1986是中国科学院华南植物园植物病理研究组前期研究过程中获得的1株植物根际细菌,具有广谱抑菌特性。为了拓展水稻纹枯病的生防菌资源,测定了链霉菌Sm4-1986对水稻纹枯病菌生长的影响,采用离体叶片试验、无菌苗试验、盆栽试验以及大田试验,研究了链霉菌Sm4-1986对水稻纹枯病的防效,并分析了其代谢物对水稻纹枯病菌的抑制效果及对水稻的促生作用。结果表明,共培养条件下链霉菌Sm4-1986的代谢物与挥发物均能显著抑制立枯丝核菌菌丝生长,抑制率分别为67.31%与88.46%。叶片离体试验中,喷施链霉菌Sm4-1986后,水稻叶片纹枯病病害严重度较喷施无菌水处理下降87.50%;无菌苗试验、盆栽试验、大田试验中,接种病原菌5 d后,链霉菌Sm4-1986对水稻纹枯病的防效分别达100%、72.98%、60.35%。接种立枯丝核菌后,喷施链霉菌Sm4-1986发酵液的水稻叶片MDA含量较喷施清水处理降低48.06%。链霉菌Sm4-1986能够产生6-戊基-2H-吡喃-2-酮(6-PP),6-PP可以显著抑制立枯丝核菌菌丝生长,菌丝生长抑制率为50%、90%所需质量浓度(IC50、IC90)及最低杀菌浓度(MFC)分别是0.007 3、0.11、0.6 mg/mL;且6-PP可以显著促进水稻幼苗生长。可见,链霉菌Sm4-1986可以作为生物防治剂或者生物菌肥应用于水稻纹枯病防治。

天然物6-正戊基吡喃-2-酮(6PP)的全合成

6-Pentyl-α-pyrone (6PP), a natural product with a number of bioactivies, has been synthesized from furfural in a five steps route. The key step is the epoxidation of 2-furyl-pentylcarbinol (3) with NBS in a mixed solvent system THF and H2O(4: 1). The overall yield is 34%.

百里香内生真菌塞缪尔斯木霉Trichoderma samuelsii 2-63菌株的鉴定及其抗真菌活性

植物病原真菌是导致作物产量损失和品质下降的重要因素之一,因此,开发低毒高效的抑菌剂一直是研究的热点。本研究从百里香植株茎中分离得到1株内生真菌2-63菌株,通过形态学结合分子生物学鉴定其为塞缪尔斯木霉Trichoderma samuelsii。平板拮抗活性表明:T.samuelsii 2-63菌株对8种植物病原真菌的拮抗活性均达70.0%以上,其中对枸杞黑霉病菌Alternaia alternata拮抗活性最高可达87.1%;平板共培养试验表明:T.samuelsii 2-63菌株挥发性有机化合物(VOCs)也表现出对病原菌不同程度的抑制活性,抑制率在31.0%~68.5%;但T.samuelsii 2-63菌株液体发酵液和粗提物的抑菌活性较低。抑菌活性结果结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析试验结果表明:T.samuelsii 2-63菌株抑菌活性的关键成分为VOCs,其主要组分为6-戊基-2H-吡喃-2-酮(6-PP)。探索性试验表明:固体发酵条件下,大米培养基比大麦培养基更利于6-PP的产生,最大产量为38.6 mg/mL;浅层液体培养条件下,6-PP随着培养时间的增加出现先上升后下降的趋势,在培养第15天时产量最大,为0.1 mg/mL。该研究结果为基于木霉菌的微生物菌剂和农药的开发提供了一定的理论依据和试验基础。

0.2% α-吡喃酮WP对植物病原真菌的防治效果

0.2%α-吡喃酮WP的有效成分为5,6-二氢-6-戊基-2H-吡喃-2-酮(5,6-dihydro-6-pentyl-2H-pyran-2-one)。采用菌丝速率法测定了0.2%α-吡喃酮WP的抗菌谱,含药浓度20μg/ml的PDA培养基对测试的11种植物病原真菌均有抑制作用,其中对禾谷丝核菌的抑制作用最强,抑制率为89.3%。温室条件下用干种子量0.5%的0.2%α-吡喃酮WP拌种处理对小麦纹枯病的防治效果达61.6%,对棉花立枯病的防治效果达85.6%,较干种子量1%的40%多菌灵拌种处理防治效果分别提高了14.6%和17.9%。

渐绿木霉抑菌物质的分离纯化及其对植物病原菌的抑制作用

【目的】从木霉(Trichoderma spp.)代谢产物中获得对疫霉菌(Phytophthora spp.)有抑制作用的活性拮抗化合物,并评价其对其他植物病原菌的生防潜力,为木霉生防菌株及其产生拮抗化合物的利用提供依据。【方法】用玻璃纸筛选法筛选产生拮抗化合物的木霉菌株,这些化合物对疫霉菌有强烈的抑制活性。在PDA上培养获得的木霉菌株作为接种体,进一步接种在稻米培养基上扩大培养,用于拮抗化合物的提取。木霉培养物经乙酸乙酯萃取、过滤和浓缩等程序,获得最初的粗提物。粗提物进一步通过柱层析、薄层层析纯化和生物活性测定,确定活性组分并获得纯的样品。依据样品的化学特性,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)进行化学结构鉴定,确定拮抗化合物的化学分子式和结构。选用不同类群的植物病原菌,包括卵菌门的辣椒疫霉(P.capsici)和黄瓜疫霉(P.melonis)、子囊菌门中的尖镰孢(Fusarium oxysporum)和担子菌门的立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),测定拮抗化合物对它们发育不同阶段的拮抗活性。【结果】最初筛选试验结果显示,渐绿木霉(T.viridescens)菌株TS0404能产生对疫霉菌有强烈抑制活性的拮抗化合物。分离、纯化和生物活性试验表明,具有生物活性的活性组分是一种黄色油状液体。质谱图揭示该化合物最大离子峰166,化合物被鉴定为6-戊基-2H-吡喃酮(6-pentyl-2H-pyran-2-one,6-PP)。生物活性测定结果显示,该化合物对辣椒疫霉、黄瓜疫霉、立枯丝核菌、尖镰孢菌丝生长有显著抑制作用(EC50分别为115.26、99.58、126.46和315.75μg·m L-1),其中对黄瓜疫霉抑制效果最好,300μg·m L-1浓度完全抑制黄瓜疫霉菌丝生长。该化合物对辣椒疫霉和黄瓜疫霉游动孢子囊萌发也有显著抑制效果(EC50分别为168.67和111.87μg·m L-1),其中对黄瓜疫霉游动孢子囊萌发抑制效果最好,在400μg·m L-1时,完全抑制其游动孢子囊的萌发。此外,6-戊基-2H-吡喃酮还对尖镰孢分生孢子和立枯丝核菌菌核萌发有显著的抑制效果,其对尖镰孢分生孢子萌发抑制的EC50为151.81μg·m L-1;300μg·m L-1时,完全抑制立枯丝核菌菌核的萌发。【结论】从渐绿木霉筛选分离获得了6-戊基-2H-吡喃酮,其对卵菌中的辣椒疫霉和黄瓜疫霉子实体有强烈的抑制活性,对尖镰孢和立枯丝核菌菌核也有显著的抑制作用,显示该物质是一种广谱性的拮抗化合物,在作物疫病防治中具有潜在的应用价值。

高分辩气相色谱法手性固定相拆分α-羟基酮光学异构体

使用高分辩气相色谱法环糊精接枝聚硅氧烷 (二环〔2 ,6 二 O 戊基 3 O 己烯基 ( 5 )〕五环〔2 ,6 二 O 戊基 3 O 甲基〕 β 环糊精 聚硅氧烷 )作手性固定相 ,实现了α 羟基酮的有效拆分 ,并测定了一系列光学活性 3 羟基 2 丁酮的对映体过剩值 (e .e值 )。结果表明 ,所选取的手性固定相对测定此类不对称催化反应产物的光学产率 ,评价催化体系的手性选择性均具有较好的效果。

MN9202在Beagle犬肝微粒体酶中的代谢动力学

目的研究MN9202在Beagle犬肝微粒体酶中的代谢。方法差速离心法制备Beagle犬肝微粒体酶,0.4μmol.L-1的MN9202与1.0g.L-1的肝微粒体酶在37℃水浴中孵育30min,加入0.5mL碱化液终止反应,然后采用RP-HPLC法测定孵育液中MN9202原形药物的浓度。根据所测浓度与反应速度做Lineweave-Brurk双倒数曲线,推导出药物的米氏常数Km和最大反应速度Vmax,并计算机体内在清除率。同时观察不同浓度和不同种类的人肝微粒体酶(CYP450)抑制剂对MN9202代谢的影响。结果MN9202在Beagle犬肝微粒体酶中的Km为(22.6±8.0)μmol.L-1;Vmax为(0.54±0.17)μmol.g-1.min-1;CLint为(0.0242±0.0009)L.g-1.min-1。醋竹桃霉素(Tro)和酮康唑(Ket)能够显著抑制MN9202的代谢;反苯环丙胺(Tra)对MN9202的代谢也有一定的抑制作用,而其他CYP450抑制剂对MN9202的代谢无明显影响。结论CYP3A和CYP2C19参与了MN9202的代谢,人CYP3A和CYP2C19的抑制剂可能使MN9202的代谢受到抑制,造成药物的药效或毒性的增加。

深绿木霉HB20111产挥发性物质及其功能分析

为了解深绿木霉HB20111产挥发性物质的成分以及潜在的生物学功能,采用顶空气相色谱-质谱法测定了深绿木霉HB20111产挥发性物质的主要成分,并进行了成分分析;采用对扣法测定了深绿木霉HB20111产挥发性物质对5种植物病原菌的抑菌率;同时测定了深绿木霉HB20111产挥发性物质对小麦幼苗生长的影响。结果表明,深绿木霉HB20111产挥发性物质烯类的相对含量最高,为49.68%、醇类为21.78%,酮类为8.56%,其余类别相对含量较低;这些挥发性物质对5种植物病原菌均有一定的抑制效果,其中对立枯丝核菌抑菌率最高,为50.62%;挥发性物质还可以促进小麦幼苗生长,与对照相比,对小麦幼苗的株高有显著的促进作用(P<0.05)。这些结果为深绿木霉HB20111的开发应用提供了理论基础。

白酒酿造环境绿色木霉新菌株及其在低度潮饮酒方面的应用

本文探讨了木霉以丢糟为原料生产具有生物活性和椰香风味的6-戊基-2H-吡喃-2-酮,提高丢糟的应用价值及在低度潮饮酒Alco-pop方面的应用。利用高乳酸浓度霉菌培养基,从酿酒生产环境中筛选出1株耐酸木霉菌株(WLY-L-M-01),通过菌株形态特征和分子生物学特征,鉴定为绿色木霉,已在中国普通微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为CGMCC No.20254。该菌株具有以下特性:最高耐受乳酸浓度为52.62 g/L;最低耐受pH值为1.97;具有一定的大曲黄曲霉抑制能力;代谢主产物为6-戊基-2H-吡喃-2-酮,代谢副产物主要有3-甲基丁醇、苯乙醇、己醇等香气成分;最适代谢温度为26~30℃。分别以纯丢糟、纯高粱、丢糟和高粱混合物3种培养基进行浅盘发酵,实验结果表明,该菌株在3种原料中都能生长代谢产6-戊基-2H-吡喃-2-酮,在丢糟和高粱混合培养基中代谢产率最高,达1200 mg/L以上。该产物在低度乙醇体系中风味突出,通过特殊蒸馏过程进入酒体,可以改善酒体风味,应用于勾调低度潮饮酒,具有广阔的探索空间和应用前景。

基于GC-MS分析蜜炙对甘草中挥发性成分的影响

目的:分析蜜炙对甘草中挥发性成分组成及相对质量分数的影响,为该炮制品的炮制机制研究提供参考。方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对甘草不同样品中的挥发油成分进行确认,Restek Rxi-5ms毛细管柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),程序升温(40℃,保持5 min,以7℃·min^(-1)升温至170℃,保持40 min,以2.0℃·min^(-1)升温至220℃,以5.0℃·min^(-1)升温至280℃),流量1.0 m L·min^(-1),载气为氦气;离子源为电子轰击电离源,分流比29∶1,电子能量70 e V,离子源温度200℃,接口温度280℃,溶剂延时3.5 min,检测器电压0.8 kV,灯丝发射电流750μA,倍增器电压1.2 kV。以面积归一化法计算各组分的相对质量分数。结果:生甘草中鉴定出36种成分,炙甘草中鉴定出20种成分。其中有4种为二者的共有组分,分别为乙苯、环己酮、邻苯二甲酸丁基2-戊基酯和6,6-二甲基富烯。甘草蜜炙后,4个共有组分的相对含量均有明显变化,分别由0.03%,0.12%,0.14%,0.12%提高到3.37%,13.24%,7.57%,10.84%。结论:甘草蜜炙后,其挥发性成分的组成和相对质量分数均发生非常显著的变化。