^60Co-γ射线辐射灭菌方法对栓塞用微胶囊材料稳定性的研究

利用60Co-γ射线辐射方法,对栓塞用海藻酸钠/壳聚糖/海藻酸钠(ACA)微胶囊进行灭菌研究,考察了辐射灭菌对微胶囊稳定性,包括形态、机械强度、材料结构以及材料降解情况的影响。分别利用激光粒度仪、球磨法、傅里叶红外光谱仪以及乌氏粘度法和锥板粘度计测定了辐射灭菌前后微胶囊的粒径、强度、结构以及壳聚糖分子量和海藻酸钠粘度的变化。结果表明,经过60Co-γ射线辐射灭菌后,ACA微胶囊颜色变深呈黄色,ACA微胶囊略有膨胀,且破碎率升高强度下降,由于辐射引发的自由基反应,海藻酸钠和壳聚糖的分子结构中有双键生成,并且壳聚糖和海藻酸钠材料均发生降解而使分子量降低粘度下降,辐射灭菌的降解作用随壳聚糖分子量的增大而增强。

60Co-γ射线辐射灭菌对天麻药材指纹图谱及有效成分的影响

目的:建立天麻药材指纹图谱,考察不同剂量60Co-γ射线辐照灭菌对天麻药材中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、柠檬酸5个有效成分含量的影响。方法:利用HPLC法,采用wondasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)液相色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 ml·min^(-1);检测波长为220 nm;柱温为30℃,进样量为10μl,建立天麻药材HPLC指纹图谱。分别选择辐照剂量2,6,10 k Gy对天麻进行辐照,比较辐照前后天麻指纹图谱及5个有效成分的变化,并采用SPSS 22.0软件分析5个有效成分辐照前后含量变化。结果:共确定14个共有峰,不同剂量辐照前后天麻药材指纹图谱的相似度为0.918~0.999;辐照剂量不超过6 k Gy时,天麻药材中的天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、柠檬酸含量变化无统计学意义(P>0.05)。结论:所建立的天麻指纹图谱及5个成分含量测定方法可作为天麻质控方法,在辐照剂量不超过6 k Gy时,60Co-γ辐照灭菌法可用于天麻药材的灭菌。

60Co-γ射线辐射灭菌对连翘药材指纹图谱及有效成分的影响

目的:探索60Co-γ射线辐照灭菌对连翘药材有效成分的影响及辐照前后指纹图谱的变化,为连翘辐照灭菌提供指导依据。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min^(-1);检测波长:280 nm;柱温:30℃,建立连翘药材HPLC指纹图谱。采用SPSS 22.0软件比较3,6,10 k Gy剂量下60Co-γ射线辐照对连翘中芦丁、连翘酯苷A、连翘酯苷B、连翘苷含量,及对指纹图谱相似度的影响。结果:芦丁、连翘酯苷B、连翘酯苷A、连翘苷的进样量分别在0.046~2.297,0.030~1.465,0.294~14.553,0.091~4.504μg范围内线性关系良好(r≥0.999 1);平均回收率分别为99.24%(RSD=0.59%),100.49%(RSD=0.49%),97.61%(RSD=0.74%),102.25%(RSD=0.33%)(n=9)。当辐照剂量不超过6 kGy时,连翘药材中的芦丁、连翘酯苷A、连翘酯苷B、连翘苷含量变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论:60Co-γ射线辐照灭菌对连翘药材有效成分和指纹图谱无影响,可作为其有效灭菌手段。

^(60)Co-γ射线对不同无花果品种一年生枝条的辐射效应分析

【目的】研究^(60)Co-γ射线对不同无花果品种一年生枝条死亡率、抗氧化酶活性等相关理化指标的影响,确定最佳辐射诱变剂量,为利用^(60)Co-γ射线辐射诱变技术提高无花果遗传多样性、创造新种质、培育优良新品种提供科学依据。【方法】以无花果品种布兰瑞克和中华紫果一年生休眠枝为试材,采用^(60)Co-γ射线为辐照源,设置不同剂量0、30、45、60、75 Gy的辐射处理,分析辐照引起枝叶死亡率、酶活性等变化。【结果】随着辐射剂量的增加,2个无花果品种扦插苗成活率呈下降趋势,株高、茎粗、节间长度、叶片长度、叶片宽度和分枝数指标呈下降趋势,叶片长宽比差异不显著。中华紫果品种的SOD、POD、CAT等酶活性均呈现先增后减的趋势,分别在45、60 Gy剂量时达到峰值,MDA含量呈现一直上升趋势,H_(2)O_(2)含量呈现先增后降趋势。布兰瑞克品种的SOD、POD、CAT酶活性,随着辐射剂量的增加均呈现先降后增趋势。MDA、H_(2)O_(2)含量基本保持上升趋势。【结论】辐射导致无花果扦插苗幼苗生长缓慢、株高矮化、茎粗变细、叶片变小、分枝减少。中华紫果的半致死辐射剂量为56 Gy,布兰瑞克为70 Gy,布兰瑞克对辐射的耐受性高于中华紫果。

化瘀祛斑胶囊 60Co-γ 射线辐照灭菌剂量的探究

目的:探究化瘀祛斑胶囊60Co-γ射线辐照灭菌的合适剂量。方法:建立化瘀祛斑胶囊特征图谱,采用特征峰数量、相对保留时间和特征图谱相似度对不同60Co-γ射线辐照量剂量(0、3、6、9 kGy)灭菌的化瘀祛斑胶囊进行对比分析。结合微生物限度检查和黄芩苷含量测定综合分析,确定化瘀祛斑胶囊60Co-γ射线辐照剂量。结果:不同剂量60Co-γ射线灭菌后的化瘀祛斑胶囊特征图谱的相似度、特征峰数量和特征峰相对保留时间差异均无统计学意义(P>0.05),不同剂量60Co-γ射线灭菌后的化瘀祛斑胶囊微生物限度均合格,黄芩苷含量基本一致。结论:60Co-γ射线辐照灭菌对化瘀祛斑胶囊质量无显著影响,特征图谱结合微生物限度检查和黄芩苷含量测定综合分析,辐照剂量为6 kGy效果更佳。

^(60)Co-γ辐射对2种锦带幼苗生长及生理指标的影响

为了探究辐射诱变对“白花锦带花”和“锦带花”形态及生理特性的影响,采用不同剂量(0~300 Gy)的^(60)Co-γ射线辐射“白花锦带花”与“锦带花”休眠期种子,观测辐射对锦带花生长的影响,测定其生长量及幼苗叶片的叶绿素含量、叶绿素荧光指标、光合作用参数、SOD、POD、MDA和可溶性蛋白含量。研究结果显示,由于辐射剂量的增大,苗高、叶长、叶宽、节间距、叶绿素荧光、光合作用参数、SOD活性、POD活性出现了明显的先升高后降低的趋势,在50 Gy时到达了峰值。同时,随着辐射剂量的增加,叶绿素含量和可溶性蛋白含量呈现出下降的趋势,MDA含量明显升高。综上所述,在(2 Gy/min)剂量率的辐射条件下“白花锦带花”种子较适宜的诱变剂量为50 Gy,而“锦带花”以50~100 Gy最合适。

^(60)Co-γ射线辐照灭菌前后发酵虫草菌粉(Cs-4)中脂肪酸类成分稳定性研究

目的:建立同时测定^(60)Co-γ射线辐照前后发酵虫草菌粉(Cs-4)中棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和α-亚麻酸的含量的方法,并对5种脂肪酸类成分的稳定性进行考察。方法:采用气相色谱法,色谱柱为DB-WAX毛细管柱(30 m×0.53 mm×0.25μm),程序升温,检测器为氢离子火焰检测器,检测器温度为280℃,进样口温度为270℃,载气为高纯氮气,流速为0.5 mL/min,进样量为1μL,进样分流比为10∶1。通过影响因素试验、加速试验及长期试验考察^(60)Co-γ射线辐照前后发酵虫草菌粉中脂肪酸类成分的稳定性。结果:通过方法学考察,5种脂肪酸类成分在59.68~477.44,23.58~188.61,91.40~594.10,158.72~1587.20,27.97~279.70μg/mL内线性关系良好(r>0.997);平均加样回收率为97.87%~100.77%,RSD≤3.00%。稳定性考察结果表明,5种脂肪酸类成分均较稳定,含量变化无显著差异。结论:本研究所建方法准确可靠、重复性好,^(60)Co-γ射线辐照灭菌前后发酵虫草菌粉中5种脂肪酸类成分在不同条件存放后未有明显变化,为发酵虫草菌粉辐照灭菌方式的选择提供了实验依据。

^(60)Co-γ射线辐照灭菌对全蝎药粉品质的影响研究

目的研究不同剂量^(60)Co-γ射线辐照灭菌对全蝎药粉成分及卫生学指标的影响,为全蝎灭菌工艺提升提供依据。方法使用4、6、8、10 kGy^(60)Co-γ射线对全蝎药粉进行辐照灭菌,对灭菌前后样品的水分、总灰分、酸不溶性灰分、黄曲霉毒素、酸溶性浸出物、重金属及有害元素等药典要求检查项进行测定,以及对微生物含量等卫生学指标进行测定,并对不同剂量^(60)Co-γ射线辐照灭菌的全蝎药粉进行HPLC成分含量分析。结果不同剂量^(60)Co-γ射线辐照前后全蝎药粉中的水分、总灰分、酸不溶性灰分、黄曲霉毒素、酸溶性浸出物、重金属及有害元素无明显差异;全蝎药粉在不同剂量^(60)Co-γ射线辐照灭菌前后,各试验组之间卫生学指标差异极显著,4 kGy及以上的^(60)Co-γ射线动态辐照可对微生物进行有效杀灭,6 kGy及以上的剂量灭菌效果好;高效液相色谱测定灭菌前后5种核苷类成分及17种氨基酸含量无显著差异,灭菌前后质量稳定。结论^(60)Co-γ射线辐照可有效杀灭全蝎药粉中微生物,6~10 kGy的剂量效果最佳,辐照灭菌前后药粉药典检查项无明显差异,辐照后的药粉品质更优。

^(60)Co-γ射线辐射西瓜种子对叶片光合色素含量和气体交换参数的影响

以12个不同千粒重的西瓜(Citrullus lanatus)品种干种子为试验材料,设置6个^(60)Co-γ射线剂量辐射处理,研究不同辐射剂量对西瓜种子的影响,并通过大田试验观察辐射材料的性状表现(开花期及果实性状)。结果表明,西瓜种子经^(60)Co-γ射线辐射后,叶片中的叶绿素a、类胡萝卜素含量随着辐射剂量的增大总体呈先增加后减小的趋势,叶绿素b含量及气孔导度、净光合速率、蒸腾速率总体随着辐射剂量的增加而减少;^(60)Co-γ射线辐射对不同千粒重西瓜干种子的敏感性由强到弱依次为大种子、小种子、中等种子;不同基因型西瓜种子辐射敏感性由强到弱依次为杂交种子、常规种子。

猕猴桃^(60)Co-γ射线辐射诱变育种适宜剂量的研究

以果肉红色的‘红阳’猕猴桃、果肉黄色‘桂海4号’猕猴桃和果肉绿色的‘长果’猕猴桃的枝条为试材,用4种剂量的60Co-γ射线辐射处理,以未照射枝条为对照,采用随机区组设计进行田间嫁接。对嫁接成活率、植株生长量的调查分析。结果显示:在25～150Gy辐射剂量范围内,随辐射剂量的加大,对嫁接成活率及生长的抑制作用逐渐增强。不同品种的猕猴桃对辐射的敏感性差异较大。3个品种猕猴桃辐射半致死剂量分别为50.6Gy(红阳)、64.4Gy(桂海4号)、71.7Gy(长果猕猴桃)。试验结果可以为猕猴桃辐射育种适宜剂量的确定提供依据。

晚香玉^(60)Co-γ射线辐射诱变适宜剂量的研究

对晚香玉的种球进行5种剂量的印60Co-γ射线辐射处理,以未照射种球为对照,采用随机区组设计栽培。对出苗率、成苗率和苗高的调查分析显示:在10-50 Gy辐射剂量范围内,随辐射剂量加大,对出苗及生长的抑制作用逐渐加强。小种球的辐射敏感性强于大种球。以半致死剂量LD50和半致矮剂量GR50为标准,根据出苗率、成苗率和生长量的分析以及回归分析的结果可确定:晚香玉小种球的适宜剂量为15～20 Gy,大种球的适宜剂量为25～30 Gy。

^(60)Co-γ射线辐射对滇特色花卉生长速率及叶绿素含量的影响

试验研究6 0 Co γ射线辐射后对球根海棠、蝴蝶兰、仙客来、大丽花生长速率和叶绿素含量的影响结果表明 ,低剂量辐射处理的花卉前期生长速率较高 ,长势优于对照 ,高剂量辐射处理的花卉后期生长速率高 ,并对其生长均有一定抑制作用 ,且抑制作用与处理剂量间呈正相关关系。经 10Gy辐射处理后球根海棠 (籽 )、蝴蝶兰、大丽花与高剂量辐射处理后球根海棠 (根 )、仙客来 (籽 )均有较高的光合作用和抗逆性 ,其中球根海棠 (根 )经辐射处理后花色、瓣形出现明显变异 。

^(60)Co-γ射线对路易斯安那鸢尾种子的辐射效应研究

为探索路易斯安那鸢尾育种的新途径,利用0(CK)、100、200、300 Gy 4个不同剂量的^(60)Co-γ射线对6个路易斯安那鸢尾品种的自交种子进行辐射处理,研究^(60)Co-γ射线对路易斯安那鸢尾种子的辐射效应。结果表明,与CK相比,100 Gy辐射处理可以提高路易斯安那鸢尾种子萌发率和成苗率,并有效促进F1M1花茎伸长和花朵直径增加;200 Gy的辐射处理具有明显的致死效应,种子成苗率显著下降;低于200 Gy的^(60)Co-γ射线辐射对其中5个品种F1M1的花色分离具有促进作用,剂量越高,花色分离率越高;300 Gy辐射处理下,6个品种种子成苗率均低于2%,表明300 Gy具有强烈的致死效应。由此可知,100 Gy辐射处理可以促进种子萌发,用于种苗生产;200 Gy可以作为诱变剂量用于诱变育种;300 Gy则不适宜选作辐射育种剂量。本研究结果为路易斯安那鸢尾的辐射育种技术的应用提供了一定的理论依据和技术参考。

60Co-γ射线和电子束辐照灭菌对葛根提取物抗氧化活性及指纹图谱的影响

为评价60Co-γ射线和电子束辐照灭菌对葛根提取物品质的影响效应及其差异性,采用不同剂量的60Co-γ射线(0、2.8、5.7、8.3、10.6 kGy)和电子束(0、2.4、5.1、7.7、10.3 kGy)辐照处理葛根提取物,研究辐照对其微生物总数、抗氧化活性及指纹图谱的影响。结果表明,60Co-γ射线和电子束辐照均能有效降低葛根提取物中需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数,随着吸收剂量增大,抑制作用增强。60Co-γ射线和电子束辐照吸收剂量分别为5.7 kGy和5.1 kGy时,葛根提取物均达到《中国药典》所规定的微生物限度标准(需氧菌总数为103 CFU·g^-1、霉菌和酵母菌总数为102 CFU·g^-1);吸收剂量分别为5.7 kGy和7.7 kGy时,需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数均降至10 CFU·g^-1以下。此外,大肠埃希氏菌(Escherichia coli)与沙门氏菌(Salmonella)均未检出。2种辐照方式均对葛根提取物的DPPH自由基(DPPH·)清除率、羟自由基(·OH)清除率以及总还原能力无显著影响(P>0.05)。不同剂量60Co-γ射线和电子束辐照处理葛根提取物特征峰的相似度达到1.0,且相对保留时间的相对标准差(RSD)均小于0.5%,表明2种辐照方式对葛根提取物指纹图谱均无显著影响(P>0.05)。综上所述,60Co-γ射线和电子束辐照对葛根提取物微生物具有较强的抑制作用,2种辐照方式均不会对葛根提取物的抗氧化活性及指纹图谱产生显著影响,不影响葛根提取物的有效性及质量稳定性。该研究为2种辐照技术,特别是电子束辐照在葛根药材、饮片及其中成药制剂灭菌中的合理应用提供了科学参考。

两种月季的^(60)Co-γ射线辐射敏感性及半致死剂量研究

【目的】探讨^(60)Co-γ射线对2个不同月季品种扦插苗的辐射诱变效应,确定其辐射处理的半致死剂量,为月季的辐射育种提供理论基础。【方法】以2个月季品种"绯扇"、"卡罗拉"的扦插苗为材料,采用5个剂量的^(60)Co-γ射线进行辐射处理,分析比较不同剂量下的成活率、死亡率以及植株生长、变异情况,明确辐射剂量与死亡率之间的关系,并确定半致死剂量。【结果】随着辐射剂量的增加,成活率逐渐降低,死亡率逐渐增加,辐射剂量与死亡率之间呈正相关;"绯扇"的半致死剂量为71 Gy、"卡罗拉"的半致死剂量为68 Gy;辐射剂量越大辐射效应越显著;植株变异为性状变异,表现为叶片和花朵的变异。【结论】不同月季品种对^(60)Co-γ射线辐射的敏感性不同,辐射剂量越大辐射效应越显著,不同月季品种的半致死辐射剂量存在差异。

^(60)Co-γ射线对日本结缕草干种子的辐射效应研究

用不同剂量(200~500 Gy)的60Co-γ射线辐射日本结缕草Zoysia japonica干种子,通过对辐射后干种子的发芽和幼苗生长情况进行了室内外观测,结果表明:低剂量辐射处理促进日本结缕草干种子的萌发,提高其发芽率,随着辐射剂量的增加,发芽率逐渐降低,临界辐射剂量(剂量率为1.0 Gy/min)为450 Gy;田间出苗率临界辐射为250 Gy,低于临界辐射剂量时,随辐射剂量的增大,田间出苗率增加,高于临界辐射剂量时,随辐射剂量增大,田间出苗率降低;不同的剂量处理,干种子发芽后根系和幼苗的生长差异显著(P<0.05),在主根长度、幼苗高度和幼苗鲜质量方面表现为先促进后抑制,临界辐射剂量分别为400、300和250Gy;根据辐射剂量与相对出苗率的关系折线图可以初步确定,日本结缕草干种子辐射育种的半致死剂量为480 Gy。

^(60)Co-γ射线辐射对姜黄的诱变效应研究

为探讨^(60)Co-γ射线对姜黄的诱变效应,本研究以姜黄种根为研究对象,采用不同剂量(60、70、80、90 Gy)的^(60)Co-γ射线进行辐射处理,分析VM_(1)和VM_(2)材料的田间表现。结果表明,姜黄种根经^(60)Co-γ射线辐射后VM_(1)生长受到明显的抑制,植株的出苗率、株高、叶长、叶宽、地上部分干重、根茎鲜重等指标均显著低于对照(CK)。VM_(2)中辐射处理的抑制作用仍然存在,但抑制效应减弱。适宜剂量辐射对姜黄VM_(2)的姜黄素类成分有促进作用,其中辐射剂量为60 Gy时,姜黄VM_(2)的姜黄素含量较CK显著提高30.7%(P<0.05);在姜黄VM_(2)中,随着辐射剂量的增加,挥发油呈先增加后降低的趋势。^(60)Co-γ射线辐射对姜黄具有诱变作用,其辐射的半致死剂量(LD50)在70~80 Gy之间。本研究结果为姜黄药材的诱变育种提供了参考依据。

^(60)Co-γ射线辐照澳洲坚果种子后的苗期辐射效应

为探明^(60)Co-γ射线辐照对不同澳洲坚果品种种子的辐射效应,以经^(60)Co-γ射线辐照的4个澳洲坚果品种的种子萌发生长而成的苗木为试验材料,研究不同辐照剂量(0、40、100、200 Gy)对澳洲坚果不同品种辐照处理群体的辐射效应。结果表明,随着辐照剂量的增加,云澳57、云澳51、云澳58 3个品种的地径年均增长量均受到抑制,云澳41群体的地径年均增长量呈上升趋势;与对照群体(CK)相比,辐照处理增大了辐照群体地径的变异系数,增大了辐照群体内地径的最大值和最小值及其极差,使株间变异更加丰富;通过比较澳洲坚果不同品种辐照群体与CK开花株数百分率和结实株数百分率,从云澳58和云澳41的辐照群体中筛选出4株性状优良的突变单株。本研究结果为今后利用^(60)Co-γ射线辐照诱变技术培育高产优质的澳洲坚果新品种提供了理论依据。

^(60)Co-γ射线辐射对2种露地菊叶片生理生化特性的影响

为探究露地菊对^(60)Co-γ射线辐射的耐受性,以露地菊品种东林瑞雪和粉翎的生根脚芽为试验材料,研究不同辐照处理对2种露地菊品种叶片生理生化指标的影响。结果表明,随着辐照剂量的增加,东林瑞雪和粉翎叶绿素含量和可溶性蛋白含量均呈下降趋势;脯氨酸和丙二醛(MDA)含量均呈逐渐增加的趋势;超氧化物歧化酶(SOD)活性均呈先增加后降低的趋势;过氧化物酶(POD)均呈逐渐增加的趋势;东林瑞雪过氧化氢酶(CAT)活性呈先增加后降低的趋势,粉翎的CAT活性呈逐渐增加的趋势。综上可知,粉翎对辐射的耐受能力强于东林瑞雪。本研究结果为露地菊辐射诱变研究提供了一定的理论依据和技术参考。