湖北光敏核不育水稻农垦58S叶片60kD蛋白特异性及其功能的讨论

湖北光敏核不育水稻(Hubei photoperiod-sensitive genic male-sterile rice, HPGMR)是在我国发现并开始应用研究的。人们在应用研究中发现的许多问题,如光敏不育特性转育到籼稻上多变成温敏不育等,很难达成共识。加强机理研究已成为光敏水稻研究深入发展的当务之急。除了对不同时期“农垦58”与58S的代谢做各种分析外,寻找特异蛋白与特异基因是光敏水稻机理研究中两个重要方面。在蛋白研究方面,目前已报道发现35kD、45kD、60kD、61kD等与光敏不育材料有关的特异蛋白。这些结果表明,在“农垦58”与58S之间是可以找到特异蛋白的,但还不能确定这些蛋白与光敏不育性状的关系。为了解决已发现的特异蛋白与光敏不育性状的相关性问题,我们采用多对照的方法,对已知在农垦58S中稳定表达而在“农垦58”中不出现的60kD蛋白做了进一步的研究。

性病门诊就诊者沙眼衣原体60KD抗体的检测

目的了解泌尿生殖道沙眼衣原体感染者针对衣原体不同抗原成分的血清学反应。方法应用沙眼衣原体细胞培养、免疫印迹试验和微量免疫荧光试验（ＭＩＦ），对３００例性病门诊就诊者进行观察。结果沙眼衣原体培养阳性者７５例，其中６２例（８２．６％）出现６０ＫＤ抗体，培养阴性者２２５例，其中７６例（３３．８％）（Ｐ＜０．０１）出现该抗体。然而，培养阴性又出现６０ＫＤ抗体者正是ＭＩＦ阳性者。９６．６７％的就诊者主要外膜蛋白（ＭＯＭＰ）抗体阳性。结论检测沙眼衣原体６０ＫＤ抗体在某些人群中可能具有血清学辅助诊断价值。

SS－A52KD和60KD多肽抗体的研究

ＳＳ－Ａ５２ＫＤ和６０ＫＤ多肽抗体的研究张晓，汤美安，余步云（中山医科大学第三附属医院风湿科，广州５１０６３０）自从认识到多种抗体存在于风湿病中￣［１］以来，人们就开始寻找与某种疾病或某一临床亚型相关的自身抗体，结果发现针对ＳＳ－Ａ的抗体与系统性红斑...

亲和层析法纯化系统性红斑狼疮特异性60KDRo/SSA抗原

目的:建立亲和层析法纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法:从猪脾提ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀、离子交换层析进行初步纯化。挑选单纯抗60KDSSA抗体阳性的病人的血清,制备亲和层析柱。用ELISA法检测所制备的抗原。结果: 60KDSSA抗体阳性标准血清ELISA检测为阳性,Sm和RNP、Jo-1、Scl-70的标准抗血清为阴性。结论:该方法可获得高纯度的抗原,可用于ELISA检测等目的。

系统性红斑狼疮特异性抗原60KD Ro/SSA的提取和纯化

目的建立从猪脾纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法从猪脾提取ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀结合离子交换层析分离ENA蛋白组分,并用对流免疫电泳检测60KDSSA抗原的活性,以得到纯化60KDSSA抗原的具体条件。结果60KDSSA抗原在Tris-HCl缓冲液(pH8.3)中的硫酸铵沉淀范围是硫酸铵饱和度50%～60%。60KDSSA抗原在50mMTris-HCl缓冲液(pH8.3)+NaCl中的DE52离子交换层析洗脱范围为电导值35～40ms/cm。结论结合硫酸铵沉淀和DE52离子交换层析两种纯化方法所得的60KDSSA抗原相对于其它ENA有较高的纯度,并能有效分离中SSA中60KD、52KD两个组分。

莱姆病螺旋体60kD抗原的基因克隆及表达

利用质粒ｐＡＴ１５３为载体，构建了莱姆螺旋体全细胞ＤＮＡ基因文库，用菌落原位固相酶斑法从文库中初选出一株表达６０ｋＤ抗原的克隆子，命名为ｐＬＷ２２７。经免疫印迹分析、核酸杂交、连续亚克隆分析，证明此重组菌株表达了莱姆螺旋体６０ｋＤ抗原，编码该抗原的基因表达单位为２．２ｋｂ或更小，位于莱姆螺旋体的染色体上。该抗原的表达为进一步研究莱姆病的致病机理打下了基础。

自身抗原Ro60kD重组融合蛋白的纯化和鉴定

将表达Ro60kDGST融合蛋白的重组体导入大肠杆菌JM109 中表达重组抗原, 经GST亲和层析柱纯化后用标准抗Ro血清鉴定, 经免疫印迹法证实, 纯化重组蛋白具有Ro 抗原性,

亲和层析法纯化系统性红斑狼疮特异性60KD Ro／SSA抗原

目的建立亲和层析法纯化Ro／SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法从猪脾提ENA(可提取核抗原)，以硫酸铵沉淀、离子交换层析进行初步纯化。挑选单纯抗60KD SSA抗体阳性的病人的血清，制备亲和层析柱。用ELISA法检测所制备的抗原。结果60KD SSA抗体阳性标准血清ELISA检测为阳性，Sm和RNP、Jo-1、Scl-70的标准抗血清为阴性。结论该方法能获得高纯度的抗原，可用于ELISA检测等目的。

发热伴血小板减少综合征病毒核蛋白特异结合宿主细胞60kD SSA/Ro

为了初步探索发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)核蛋白(nucleoprotein,NP)对宿主细胞免疫功能的影响。将SFTSV NP和NSs蛋白的编码基因插入真核表达载体VR1012中,通过免疫共沉淀(IP)、SDS-PAGE、质谱检测及蛋白质免疫印迹等方法寻找宿主细胞中与NP相互作用,同时又与免疫功能有关的蛋白质分子,并利用细胞免疫荧光方法检测SFTSV NP与该分子在细胞中的共定位情况。IP和质谱检测结果显示NP能与免疫功能相关的60kD SSA/Ro蛋白发生特异性结合,细胞免疫荧光试验进一步显示NP与60kD SSA/Ro蛋白在细胞质中存在共定位。提示SFTSV可能通过其核蛋白与免疫相关分子60kD SSA/Ro蛋白发生特异性结合,从而引起机体一系列的免疫反应和临床症状。

抗入肝细胞癌单克隆抗体的产生及其相应抗原P60的免疫组化定位研究

本文用肝癌手术标本,制备细胞悬液,免疫BALB/c小鼠,融合产生杂交瘤,用ABC染色法筛选单克隆抗体,获得特异性较好的杂交瘤-HAb_(18),抗体亚类为小鼠IgG1,抗原经亲和层析获得,分子量为60KD,过碘酸-Schiffs染色阴性,脂蛋白电泳阴性,PI:8.2。肝癌免疫组化染色阳性率为75％。

运用UP-PCR技术进行食源性感染常见致病菌Hsp60基因的扩增与酶切鉴定

目的 扩增、鉴定食源性感染常见致病菌Hsp60基因。 方法 选取 13种食源性感染常见致病菌 ,采用UP -PCR法扩增其Hsp60基因 ,并对PCR产物进行酶切鉴定分析。 结果 13种食源性感染常见致病菌均可以扩增出约 1.1KB的基因片段 ,蜡样芽孢杆菌PCR产物经HindIII酶切后形成约 684bp和 470bp片段 ,小肠结肠炎耶尔森菌PCR产物经BglII酶切后形成 861bp和 2 96bp片段。 结论 UP -PCR技术能同时扩增出食源性感染常见致病菌Hsp60基因 ,为进一步进行致病菌的种属鉴定和分型研究奠定基础。

KD60集群消息传递接口群集通信算法优化

大规模集群已经发展到多核的时代,多核架构对并行计算提出了新的要求。消息传递接口(MPI)是最常用的并行编程模型,而群集通信又是MPI中的重要组成部分。研究高效的群集通信算法对并行计算效率的提升有着重要的作用。KD60平台是采用首款国产多核芯片——龙芯3号搭建的国产万亿次多核集群。首先分析了KD60平台多核集群的体系特征以及多核架构下通信具有的层次性特征;然后分析原有群集通信算法实现原理及其不足;最后以广播为例,在原有算法基础上,采用一种基于片上多核(CMP)架构改进算法,改变原有算法通信模式,同时结合实验平台KD60体系特征,对算法做了体系相关优化。实验结果表明,改进算法能够很好地利用多核结构的特点,提高了群集通信广播算法的性能。

60 kD人SSA抗原表位免疫反应的特异性

目的：根据６０ｋＤＳＳＡ抗原分子不同表位的氨基酸序列，人工合成多倍体寡肽抗原表位（ｍｕｌｔｉｐｌｅａｎｔｉｇｅｎｉｃｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＭＡＰｓ），以检测这些表位的免疫特性。方法：用ＭＡＰｓ做亲和层析柱，用抗ＳＳＡ抗体的病人血清过柱，纯化抗ＭＡＰｓ抗体。这些纯化后的抗ＭＡＰｓ抗体可与６０ｋＤＳＳＡ抗原及ＭＡＰｓ反应。这种反应能被６０ｋＤＳＳＡ抗原及相对应的ＭＡＰｓ抑制。以ＭＡＰｓ做抗原检测６７份具有抗ＳＳＡ抗体的血清。结果：６７份病人血清中，６３份阳性，阳性率９４％，这些血清结合的ＭＡＰｓ不同，可以从１至２０个ＭＡＰｓ不等。结论：研究表明，６０ｋＤＳＳＡＭＡＰｓ保留了６０ｋＤＳＳＡ抗原的抗原性。