发光二极管630nm红光通过PI3K/AKT/mTOR通路抑制滑膜成纤维细胞炎症反应

发光二极管(Light Emitting Diode,LED)光照疗法是一种低能量光疗(Low-level Light Therapy,LLLT),在皮肤炎症治疗和术后疼痛缓解方面已被广泛研究,但其对类风湿性关节炎的作用及其机制尚不清楚。本研究采用LED 630 nm红光作为光源,以TNF-α刺激模拟炎症的类风湿关节炎患者组织中提取原代滑膜成纤维细胞(RA-FLS细胞)为模型。采用MTT和细胞划痕实验,检测不同剂量的LED 630 nm红光对炎症RA-FLS细胞的活力,及其增殖和迁移的影响。采用RT-qPCR和ELISA方法,检测IL-1β、IL-6和IL-8在细胞中mRNA表达及细胞上清中蛋白表达的变化。采用免疫印迹法,检测细胞中PI3K、AKT、mTOR和TRPV4蛋白表达和磷酸化的变化。结果证实,LED 630 nm红光可抑制RA-FLS细胞的增殖和迁移,降低细胞中IL-1β、IL-6和IL-8炎症因子的mRNA表达水平。光照剂量为39 J/cm^(2)的LED红光降低了RA-FLS细胞中PI3K、AKT、mTOR和TRPV4蛋白的表达和磷酸化水平。结果证实,LED 630 nm红光可以通过下调TRPV/PI3K/AKT/mTOR信号通路以及减少炎症因子的释放,抑制RA-FLS细胞的炎症反应及其增殖和迁移。

630-650 nm红光治疗糖皮质激素依赖性患者下肢Ⅱ°烧伤创面的效果

目的探索630~650 nm红光治疗糖皮质激素依赖性患者下肢Ⅱ°烧伤创面的效果。方法 2016年6月至2019年6月,62例下肢Ⅱ°烧伤伴糖皮质激素依赖性患者,分为对照组(n=25)及实验组(n=37),两组患者均予1%磺胺嘧啶银乳膏换药,实验组每次换药前以630~650 nm红光治疗仪照射创面20 min。于治疗第3、7、14、21天,统计创面愈合率、创面分泌物、创缘反应以及疼痛情况。结果实验组创面愈合率明显高于对照组(P<0.05),且创面分泌物减少、创缘反应降低(P<0.05),患者下肢疼痛也有所减轻(P<0.05)。结论 630~650 nm红光辅助治疗糖皮质激素依赖性患者下肢Ⅱ°烧伤创面,能有效减少创面分泌物,减轻创缘反应,缓解疼痛,促进创面愈合,值得临床推广应用。

630 nm LED红光通过AKT/FOXO3a信号通路抑制人巨噬细胞炎症因子释放的研究

目的探讨630 nm发光二极管(light emitting diode,LED)红光照射对人外周血单核细胞系THP-1来源巨噬细胞炎症反应的作用,寻找其可能发挥作用的信号通路与分子机制。方法人外周血单核细胞THP-1,经佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)诱导为THP-1来源巨噬细胞,并用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理制备巨噬细胞炎症模型;未经630 nm LED红光照射的细胞设为对照组,实验组各组细胞接受光照能量强度分别为14.4、28.8和43.2 J/cm^(2);对不同能量强度LED红光照射处理后的巨噬细胞进行实时荧光定量PCR(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的mRNA与蛋白表达,Western blot检测蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和叉头框蛋白O3a(forkhead box O3a,FOXO3a)蛋白及其磷酸化(p-AKT、p-FOXO3a)表达,并分析其分子通路。结果巨噬细胞经LPS诱导后,与对照组相比,实验组细胞中iNOS的mRNA表达显著升高,同时伴随炎症因子IL-1β、TNF-α的mNRA表达水平显著提升,差异有统计学意义(t值分别为-48.73、-80.96、-38.45,P值均<0.001)。M1巨噬细胞经630 nm LED红光照射处理后,细胞中炎症因子IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平明显降低,同时IL-1β、TNF-α的蛋白表达水平下降,p-AKT/AKT蛋白比值和p-FOXO3a/FOXO3a蛋白比值明显降低,差异有统计学意义(t值分别为60.18、25.30、14.79、17.31、23.64、87.50,P值均<0.05)。SC79干预后,M1巨噬细胞的p-AKT/AKT蛋白比值显著升高,IL-1β的mRNA、蛋白表达显著增加,差异有统计学意义(t值分别为-18.08、-26.43、-18.06,P值均<0.05)。SC79激活M1巨噬细胞AKT磷酸化后,630 nm LED红光可以明显降低SC79干预后M1巨噬细胞中p-AKT/AKT蛋白比值,同时明显下调IL-1β、TNF-α的mRNA表达和IL-1β、TNF-α的蛋白表达,差异有统计学意义(t值分别为15.59、33.56、70.00、5.79、36.25,P值均<0.05)。然而与对照组相比,单独SC79干预后,M1巨噬细胞中TNF-α的mRNA与蛋白表达未显著改变(P>0.05)。结论630 nm LED红光主要通过下调AKT和FOXO3a蛋白磷酸化通路,抑制巨噬细胞中炎症因子释放。

急性皮肤屏障损伤修复过程中各项生理物理参数的变化规律及LED红光对其干预作用的评价

目的:建立皮肤屏障急性损伤模型,通过皮肤无创检测技术了解皮肤屏障修复过程中各项生理物理参数动态变化过程,及各参数变化趋势的相关性;在建模的基础上评价LEDs光源窄谱非相干红光[波长(630±3)nm]的光生物调节对皮肤屏障修复的干预作用,为临床用红光辅助治疗皮肤屏障受损相关疾病提供参考。方法:用连续胶带粘贴法破坏皮肤屏障,在背部建立急性屏障损伤模型,建模前、建模后2min、建模后每隔24h检测经皮水分丢失(TEWL)、角质层含水量(CAP)、皮肤表面酸碱度(p H值)、黑素指数(MI)、红斑指数(EI)、皮脂表面含量(seb)。结果:建模后TEWL、CAP、p H值、EI均显著升高,MI、seb显著降低;修复过程中TEWL持续降低、CAP、seb先降后升,MI、EI均先升后降,p H值最先恢复;不同参数变化趋势在P<0.05或P<0.01的基础上存在或强或弱的相关性。(630±3)nm LED红光对TEWL、CAP、MI、EI等指标在皮肤屏障修复中晚期阶段有促进作用。结论:随着皮肤屏障的修复,各项生理物理参数呈现一定的变化规律,且参数之间有一定的依存关系。630nm红光能加快皮肤屏障的修复。