MicroRNA-664对人脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的探究microRNA-664(miR-664)对人脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用Lipofectamine 2000脂质体法将miR-664模拟剂(miR-664 mimics)、miR-664抑制剂(miR-664 inhibitor)转染至人脑胶质瘤细胞U251中,并设置相应对照组(miR-NC、anti-NC);采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-664的表达,MTT法检测各组细胞增殖情况,划痕实验及Tanswell小室法检测各组细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞中核蛋白(Ki67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及MMP-9的表达。结果与miR-NC相比,转染miR-664 mimics后明显上调U251细胞中miR-664的表达,并促进U251细胞增殖、迁移和侵袭能力,并显著上调细胞中Ki67、PCNA、MMP-2及MMP-9的表达(P <0. 05);与anti-NC相比,转染miR-664 inhibitor后明显下调U251细胞中miR-664的表达,并抑制U251细胞增殖、迁移和侵袭能力,并显著下调细胞中Ki67、PCNA、MMP-2及MMP-9的表达(P <0. 05)。结论 miR-664可能通过上调Ki67、PCNA、MMP-2及MMP-9的表达,促进人脑胶质瘤细胞U251细胞的增殖、迁移和侵袭,可作为潜在的肿瘤标志物。

MicroRNA-21和microRNA-664减轻肾缺血再灌注损伤的研究

目的探讨microRNA-21和microRNA-664对肾缺血再灌注损伤(IRI)的影响。方法应用agomir-21和agomir-664预处理BALB/c小鼠,采用双侧肾蒂阻断法复制小鼠肾IRI模型,小鼠肾缺血再灌注后24 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)法和Western blot检测缺血后肾组织中microRNA-21和microRNA-664及其靶基因、靶蛋白的表达,观察肾脏病理组织学的变化。结果 agomir-21和agomir-664预处理BALB/c小鼠经肾IRI后,肾脏损伤减轻,表现为肾小管上皮细胞坏死降低,进一步检测发现microRNA-21和microRNA-664的靶基因PTEN、PDCD4和MAPK表达降低,靶蛋白Caspase-3和ERK1/2表达受抑制。结论 Micro RNA-21和microRNA-664可以通过调控其靶基因、靶蛋白的表达,从而减轻肾缺血再灌注损伤。

基于P89C664的人机接口面板设计与实现

针对目前小电流系统故障选线装置的人机信息交互问题,设计一种基于单片机的独立于装置核心板的简易人机接口面板.该面板以LCM320240液晶和LED灯模块显示信息,利用扫描法访问键盘模块实现信息的查询或输入,扩展了2个RS232串口且分别用于面板与后台DSP核心板和用户通信,实现装置的信息交互功能,同时节约了DSP的资源开销.对接口电路整体进行实验测试,测试结果表明该面板具有可操作性强、反应速度快等优点,达到设计要求.

硫喷妥钠调控miR-664-1-5p对氯化钴诱导的心肌细胞缺氧损伤的保护作用

目的研究硫喷妥钠对氯化钴(CoCl_(2))诱导的大鼠心肌细胞H9c2缺氧损伤的保护作用及潜在机制。方法对H9c2细胞进行CoCl_(2)处理建立缺氧损伤模型(模型组),分别采用125、250、500 nmol/L的硫喷妥钠处理600μmol/L CoCl_(2)的DMEM培养液培养H9c2细胞,分别记为药物1、2、3组,对照组为不含CoCl_(2)的DMEM培养液培养H9c2细胞。CCK8法和流式细胞术分别检测细胞存活率和凋亡率,Western blot测定P21和Caspase-3蛋白水平,分光光度法测定H9c2细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,qRT-PCR检测CoCl_(2)诱导后H9c2细胞miR-664-1-5p的表达水平。结果与对照组相比,模型组心肌细胞H9c2中MDA、P21和Caspase-3含量升高,细胞存活率降低,凋亡率升高,miR-664-1-5p含量和SOD活性均降低,差异均具有统计学意义(均P<0.05);与模型组相比,药物2组和药物3组H9c2细胞中MDA、P21和Caspase-3含量降低,细胞存活率升高,凋亡率降低,miR-664-1-5p含量和SOD活性均上升,差异均具有统计学意义(均P<0.05);过表达miR-6641-5p可抑制CoCl_(2)诱导的H9c2细胞凋亡,提高细胞存活率;抑制miR-664-1-5p能减弱硫喷妥钠对CoCl_(2)诱导的心肌细胞缺氧损伤的保护作用。结论硫喷妥钠通过miR-664-1-5p提高CoCl_(2)诱导的大鼠心肌细胞H9c2存活率,抑制细胞凋亡,减轻细胞损伤。

心房利尿钠肽C-664G基因多态性与冠心病危险因素的分析

目的:探讨心房利尿钠肽(ANP)C-664G基因多态性与冠心病(CHD)危险因素的相关关系。方法:采用聚合酶链反应和限制型片断长度多态性(PCR-RFLP)的方法,分析158例CHD患者和165例非冠心病对照人群的C-664G(RsaI)基因多态性分布。结果:总研究人群中ANPC-664G的G和C两种等位基因分布频率为2.0%和98.0%。ANPC-664G基因型分布在两组人群中未发现显著性差异(P>0.05)。Logistic分析结果提示,男性、吸烟、高血压病史、糖尿病史、高血压家族史、血浆高胆固醇为冠心病的独立危险因素,但ANPC-664G型未能进入回归方程。且这种基因多态性分布与研究人群中的性别、体重指数、血脂、高血压病家族史、高血压病史、糖尿病家族史、糖尿病史、脑卒中家族史,脑卒中病史以及冠心病家族史之间并无显著关联(P>0.05)。结论:研究结果提示,ANPC-664G基因型与冠心病史并无显著相关性,可能不是冠心病的基因易感因素。

民用飞机ARINC429总线和ARINC 664总线应用权衡研究

日趋复杂的航空电子系统对机载数据总线提出了更高的要求。本文对ARINC429总线和ARINC 664总线进行了简介,并对ARINC429总线和ARINC 664总线进行了权衡,最终得出:针对新研制的飞机,建议选用ARINC 664总线。

宫颈癌组织和Hela细胞中miR-664的表达及其对顺铂化疗敏感性的影响

目的:探讨miR-664在宫颈癌组织和Hela细胞中的表达及其对顺铂化疗敏感性的影响。方法:采用RTPCR法检测142例宫颈癌组织及相应癌旁组织标本miR-664的表达,分析其表达与患者临床病理参数的关系。将宫颈癌Hela-229细胞分为3组:对照组、顺铂组、顺铂+转染组。其中,顺铂+转染组细胞转染miR-664拟似物。细胞培养结束后,采用MTT法检测各组细胞活力、镜下观察单克隆形成数目,流式细胞术检测细胞凋亡率、G_1期细胞比例,Transwell细胞迁移实验测定穿膜细胞数,RT-PCR法检测细胞miR-664表达水平,ELISA法检测细胞培养液中的Caspase-3、Caspase-9浓度。结果:(1)宫颈癌组织miR-664表达水平明显低于癌旁组织(P <0.01); TNM分期越高、病理学分期越高、有复发、有淋巴结转移的病例,miR-664阳性表达率明显下降(均P <0.01);(2)体外细胞实验中,顺铂组、顺铂+转染组细胞存活率、单克隆形成数目、G_1期细胞数、细胞穿膜数均明显低于对照组(均P <0.01),细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9浓度、miR-664表达显著高于对照组(P <0.01);顺铂+转染组存活率、单克隆形成数目、G_1期细胞比率、细胞穿膜数明显低于顺铂组(均P <0.01),细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9浓度、miR-664表达显著高于顺铂组(均P <0.01)。结论:miR-664在宫颈癌组织中表达降低; miR-664通过诱导Caspase-3、Caspase-9过表达,进而抑制宫颈癌细胞株的增殖、迁移、浸润,增强宫颈癌细胞对顺铂化疗的敏感性。

《中图法》(第4版)“TS664家具”类多重列类中诸多问题的探讨

对《中国图书馆分类法》(第 4版 )“TS664家具”类“多重列类”中的诸多问题进行了探讨 ,并就此提出了修改建议。

miRNA-664在宫颈癌患者血浆中的表达及其预后评估价值

目的:探讨微小核糖核酸-664(miRNA-664)在宫颈癌患者血浆中的表达及其对患者预后的评估价值。方法:采用RT-PCR方法检测96例宫颈癌患者(宫颈癌组)、40例宫颈上皮内瘤变患者(CIN组)和健康体检者(对照组)血浆中miRNA-664、鳞状细胞癌抗原(SCCA)及糖类抗原125(CA125)表达水平,分析miRNA-664表达与宫颈癌临床病理特征的关系。Kaplan-Meier和COX比例风险回归模型分析miRNA-664对宫颈癌患者预后的影响。结果:宫颈癌组血浆miRNA-664、SCCA及CA125表达水平均明显高于CIN组和对照组[miRNA-664(2-ΔΔCt):4.73±1.26、1.65±0.51和1.20±0.37;SCCA(ng/ml):8.92±2.28、1.95±0.62和0.72±0.18;CA125(U/ml):40.85±10.16、15.68±6.40和12.65±5.82,均P<0.001]。KaplanMeier生存分析结果显示,miRNA-664高表达患者的无进展生存时间(PFS)和总生存时间(OS)明显短于miRNA-664低表达患者。COX比例风险模型单因素及多因素分析显示,临床分期、淋巴结转移、浸润深度及miRNA-664高表达是影响宫颈癌患者预后的独立危险因素[OR(95%CI)=1.853(1.218~2.735)、3.052(2.206~4.237)、1.416(1.185~2.208)、2.183(1.762~4.064)]。Pearson相关分析显示,宫颈癌患者血浆miRNA-664与SCCA呈正相关(P<0.01)。结论:血浆miRNA-664异常表达与宫颈癌临床病理特征及预后密切相关,有望作为预测宫颈癌预后的潜在标志物。

miR-664及其靶基因在肝癌细胞及组织中的表达及其与化疗敏感性关系研究

目的:探讨miR-664及其靶基因CREB1在肝癌细胞和肝癌组织中的表达及其与化疗敏感性的关系。方法:双荧光素酶实验验证miR-664对CREB1的调控作用;生物数据库分析CREB1在肝组织的表达及患者的生存期;qRT-PCR检测肝癌细胞及组织标本miR-664和CREB1的表达,并分析miR-664的表达与患者临床病理参数的关系。体外细胞实验:采用脂质体瞬时转染法将miR-644 mimic和mimic NC转染至肝癌细胞株HepG2。采用MTT法、癌细胞单克隆形成、流式细胞术、划痕实验及Transwell小室实验测定细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase-3、Bax的表达水平。结果:双荧光素酶实验验证了miR-664对CREB1的靶向调控作用。生物数据库显示CREB1在肝组织中的表达越高,患者生存期越短(P<0.001)。肝癌组织miR-664表达水平明显低于癌旁组织,CREB1表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。体外细胞实验:与miR-control组相比,miR-664组、DDP组、DDP+miR-664组细胞增殖、迁移、侵袭能力、Bcl-2表达量均明显降低(P<0.05);细胞凋亡能力、caspase-3蛋白、miR-664表达量均显著增多(P<0.05)。与DDP组相比,DDP+miR-664组各项指标效果均更加显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-664在肝癌组织及细胞中表达量减少,过表达miR-664能有效抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,且miR-664能够增强肝癌细胞对DDP化疗的敏感性,有望成为联合DDP治疗肝癌的潜在靶点。

miR-664b-5p对食管癌细胞EC9706和TE-1生物学行为的影响

目的探讨miR-664b-5p对食管癌细胞EC9706和TE-1生物学行为的影响。方法在人食管癌细胞株EC9706和TE-1转染miR-664b-5p mimic或inhibitor后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-664b-5p的表达情况;通过CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;通过Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;通过Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果转染miR-664b-5p mimic后,食管癌细胞EC9706和TE-1中miR-664b-5p的表达增加(P<0.05),转染miR-664b-5p inhibitor后,miR-664b-5p的表达降低(P<0.05);增殖实验结果表明,与mimic NC组比较,miR-664b-5p mimic组食管癌细胞增殖能力下降,克隆形成数目减少(P<0.05),miR-664b-5p inhibitor组较inhibitor NC组食管癌细胞增殖能力增强,克隆形成数目增多(P<0.05);Transwell实验结果表明,miR-664b-5p mimic组食管癌细胞迁移和侵袭数目少于mimic NC组(P<0.05);miR-664b-5p inhibitor组食管癌细胞迁移和侵袭数目多于inhibitor NC组(P<0.05);Western blot实验结果表明,miR-664b-5p mimic组食管癌细胞Bax表达增加,Bcl-2表达下降(P<0.05),而miR-664b-5p inhibitor组Bax表达下降,Bcl-2表达增加(P<0.05)。结论 miR-664b-5p可以抑制食管癌细胞EC9706和TE-1的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,为进一步研究miR-664b-5p在哈萨克族食管鳞癌中的分子机制提供了基础。

用P89C664实现I^2C总线大批量数据的自动存储

结合Flash Magic软件对PhilipsP89C664单片机ISP功能进行详细介绍,同时详细叙述利用P89C664硬件I2C接口接收数据并转发到电脑,实现I2C总线大批量数据的自动保存技术,并附有完整的源程序清单及必要的注释。

ARINC664网络终端系统测试技术研究

ARINC664网络是一种先进的航空电子全双工以太网,是未来商用飞机上的核心机载通信网络,具有高速、确定性和双余度等特点,并已经成功应用在空客A380机型;在网络的实际应用中,ARINC664终端系统的性能指标和可靠性直接决定了整个网络的通信质量,因此需要对终端系统进行全面的性能测试;为此,提出了一种ARINC664终端系统的测试方案,对重要参数按照测试规范进行验证,结果表明该方案可以对ARINC664总线的协议一致性、互操作性进行合理的测试。

朝天椒新品种红泰664的选育

红泰664是以雄性不育系481-4-1A为母本、自交系939-1-1-1-1-1-1为父本培育的三系杂交单生朝天椒新品种。中晚熟,始花节位在第18~19节;果实小尖椒,果纵径8.6 cm、果横径1.1 cm、果肉厚0.10 cm;平均单果质量6.2 g,平均单株挂果146.8个,平均每667 m2鲜椒产量在1800 kg以上;青熟果实为绿色,成熟果实为红色,果面光滑,味辣,果肉薄;抗病毒病、疫病,中抗炭疽病。综合性状优良,商品性好,适宜泡制、干制及火锅底料加工。

舒伯特《A大调钢琴奏鸣曲(D.664)》第一乐章演奏技巧分析

弗朗茨·舒伯特(Franz Schubert)作为跨越古典主义与浪漫主义时期的音乐家,其钢琴作品既有古典主义钢琴奏鸣曲结构的创作特征,又有浪漫主义时期音乐表现的风格特征。笔者在检索舒伯特作品时,笔者发现学界更多是对其艺术作品进行研究,很少有人对其早期钢琴奏鸣曲进行阐述。而舒伯特早期的钢琴奏鸣曲是十分精美的。

miR-664b-3p调控Caspase-1介导细胞焦亡在深静脉血栓形成中的作用

目的观察深静脉血栓形成(DVT)患者外周血微小RNA-664b-3p(miR-664b-3p)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)水平变化,分析二者在细胞焦亡中的调控关系。方法选择健康志愿者(健康对照组)和DVT患者(DVT组)各30例,空腹抽取外周静脉血,分离血清及单个核细胞(PBMC)。Western blotting法检测PBMC中活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Cleaved Caspase-1)、焦孔素D(GSDMD)活性片段(GSDMD-N)蛋白,qPCR法检测PBMC中的miR-664b-3p,ELISA法检测血清中的细胞焦亡相关炎症因子白细胞介素(IL)1β和IL-18蛋白。采用Target Scan 7.2生物信息学软件,预测miR-664b-3p与Caspase-1 mRNA的3′非翻译区(3′UTR)是否存在互补结合位点;分别构建包含结合位点的野生型及突变型Caspase-1 mRNA 3′UTR质粒,双荧光素酶报告基因系统检测miR-664b-3p对其荧光素酶报告基因活性的影响。结果DVT组PBMC中Cleaved Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达及血清IL-1β、IL-18蛋白水平均高于健康对照组,miR-664b-3p表达低于健康对照组(P均<0.05);生物信息学分析显示,miR-664b-3p与Caspase-1 mRNA的3′UTR存在互补结合位点;转染miR-664b-3p mimics可以降低野生型Caspase-1 mRNA 3′UTR荧光素酶报告基因活性(P<0.05),但对突变型Caspase-1 mRNA 3′UTR报告基因活性无显著影响(P>0.05)。结论DVT患者PBMC中miR-664b-3p表达降低,可解除对靶基因Caspase-1的表达抑制,Caspase-1活性增强使GS⁃DMD-N表达升高,进而导致细胞焦亡及相关炎症因子(IL-1β、IL-18)表达升高,最终导致DVT。

基于FPGA的ARINC664/AFDX端系统设计

ARINC664标准是ARINC组织为下一代航空电子系统数据传输所定义的一个确定性航空电子数据传输网络标准。其中第7部分定义了一个确定性航空电子设备全双工交换以太网(AFDX),由航空电子设备子系统、AFDX端系统、AFDX互联网络等三部分组成。AFDX端系统是其它两部分之间的通信接口,极为重要,在分析研究该协议的基础上给出了一种可行的AFDX端系统设计方案。

ARINC664标准符合性验证基本方法研究

该研究主要依据ARINC664P7标准的要求,针对需求展开验证方法的研究。根据标准中涉及到的需求,需要相应的开发互操作性规范和数据加载规范等,来明确ARINC664P7中定义的需求,以充分地满足这些需求,并使得这些需求可以更好地得到验证。

基于Wireshark的民用飞机A664数据总线系统解析

Arinc664数据总线协议是某大型客机上应用的航电系统数据主干网,飞机各系统通过该网络进行数据交互,其上传输了海量的机载数据参数,对这些参数的实时解析,从而得到系统的输入输出参数响应,是系统综合试验测试与试飞测试的一项重要而基本的要求。目前试验室大多部署了工控机,配置订制的数据采集和ICD(接口控制文件)解析软件,能够实现对数据的读取和分析,但是设备专用性较强,且不便于外场测试。Wireshark是一款开源的以太网数据监听软件,可以运行于个人笔记本上,该文通过wireshark的插件机制提出了一种机载Arinc 664数据的数据实时解析方案,为系统集成试验与排故试验解决了Arinc664数据便携解析问题。

基于PI3K/Akt/GSK3β/NFATc1通路分析沉默miR-664-3p对去卵巢骨质疏松大鼠的干预作用

目的探究基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶(GSK)3β/活化T细胞核因子(NFATc1)通路分析沉默miR-664-3p对去卵巢骨质疏松大鼠的干预作用。方法选取30只SD雌性大鼠,将其中10只设为正常组,剩余20只建立去卵巢骨质疏松大鼠模型,并随机分为模型组、沉默组。检测对比骨密度变化,Micro-CT扫描重建股骨微结构,采用酶联免疫吸附试验、免疫透射比浊法分别对血清骨钙素(OC)水平、碱性磷酸酶(ALP)含量进行检测,通过Western印迹法检测各组骨髓基质细胞(BMSCs)的PIK3、Akt、GSK3β、NFATc1的磷酸化水平,miR-664-3p表达。结果模型组骨细胞指数、骨密度Tb.N、Tb.Th、BV/TV均低于正常组,Tb.Sp、miR-664-3p、PI3K、Akt、NFATc1均高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);沉默组TB.Sp、miR-664-3p、PI3K、Akt、NFATc1均低于模型组,骨密度、骨细胞指数及Tb.N、Tb.Th、BV/TV、GSK3β高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默miR-664-3p通过对PI3K/Akt/GSK3β/NFATc1通路调控促进BMASc增殖,对成骨细胞凋亡产生抑制,从而达到治疗骨质疏松目的。