基于改进YOLOv7x的车型识别算法

为提高车型识别精度并改善误检问题,本文提出了一种改进YOLOv7x的车型识别算法.首先,对BIT-Vehicle数据集进行提取并人为划分,使数据集符合模型要求;其次,将CBAM(Convolutional block attention module)注意力机制加入backbone网络中,在模型参数增幅较小的情况下,提升主干网络的特征提取能力;最后,引入SIoU损失函数,利用predict box和groundtruth box之间的向量角度,重新定义了损失函数,提高了模型检测的mAP0.5(mean Average Precision,IoU=0.5)与准确率.实验结果表明,改进YOLOv7x算法整体识别结果优于YOLOv7x算法,改进YOLOv7x算法的mAP0.5和准确率分别为98.4%和97.4%,分别提高了0.5%和1.1%,具有更优的精度和更低的误检率,较好地满足了车型识别的需求.

P2X7R过表达的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达观察

目的观察嘌呤能受体P2X配体门控离子通道7的配体(P2X7R)过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞单钠尿酸盐(MSU)晶体诱导痛风炎症反应过程中NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白、IL-1β、TNF-α表达情况。方法取人单核细胞白血病细胞系THP-1,并随机分为过表达组、空白组、模型组、对照组;过表达组和空白组分别转染P2X7R过表达质粒、空白载体质粒,转染5 d,将过表达组、空白组、模型组THP-1细胞用100 ng/mL的PMA刺激3 h后分化为巨噬细胞,另将MSU晶体用氢氧化钠溶解配制成浓度为100μg/mL的MSU乳糜状悬液加入培养液中孵育6 h;对照组正常培养。分别采用RT-PCR法和Western blot法测算巨噬细胞P2X7R mRNA、蛋白,ELISA法检测巨噬细胞上清液IL-1β、TNF-α,Western blot法测算巨噬细胞NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白。结果与对照组比较,过表达组、空白组、模型组P2X7R mRNA和蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与模型组、空白组比较,过表达组P2X7R mRNA、蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。结论P2X7R过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达增加,IL-1β、TNF-α水平升高可能通过激活NLRP3蛋白来实现。

高性能全固态电池Li_(7-x)PS_(6-x)Cl_(x)电解质中氯含量的优化

在全固态电池快速发展的背景下,硫银锗矿型电解质Li_(6)PS_(5)Cl因其高离子导率、加工性能好等特点备受瞩目。电解质中的氯取代显著影响其离子电导率和稳定性等特性,但调节氯含量对界面影响的研究仍有待完善。本文采用固相烧结法制备了x=1.0~1.5的Li_(7-x)PS_(6-x)Cl_(x)电解质,评估氯含量(x=1.0~1.5所对应的氯摩尔分数分别为25%~37.5%)对其理化性质的影响。此外,基于电解质在电池不同部件中的性能表现,结合X光电子能谱与阻抗弛豫时间分布等,系统评估氯含量对界面与性能的影响。Li_(5.7)PS_(4.7)Cl_(1.3)材料在正极中展现出优秀的倍率性能;而对于电解质层,高氯含量材料Li_(5.5)PS_(4.5)Cl_(1.5)将导致正、负极界面劣化,降低循环性能。通过调控氯含量,可平衡离子电导与界面反应,从而提升综合性能。所组装的LiNi_(0.8)Co_(0.1)Mn_(0.1)O_(2)@Li_(5.7)PS_(4.7)Cl_(1.3)|Li_(6)PS_(5)Cl|LiIn电池,在20 mg/cm^(2)载量、0.5C倍率循环300圈后仍有132.8 mA·h/g的比容量。

P2X7受体抑制剂腹腔注射对红藻氨酸诱导小鼠癫痫发作及海马损伤的影响

目的观察P2X7受体(P2X7R)抑制剂对红藻氨酸诱导小鼠癫痫发作及海马损伤的影响。方法雄性C57BL/6小鼠96只,随机分为正常组36只、模型组36只、P2X7R抑制剂组24只。P2X7R抑制剂组于造模前30 min腹腔注射P2X7R特异性抑制剂A438079,模型组、正常组在同时点注射等量生理盐水。模型组、P2X7R抑制剂组腹腔注射红藻氨酸建立癫痫模型,正常组腹腔注射等量生理盐水。采用脑电图观察小鼠癫痫发作情况,Western blotting法检测小鼠海马组织P2X7R蛋白,尼氏染色观察小鼠海马CA1区损伤情况。采用旷场实验观察正常组、模型组小鼠焦虑样行为,若模型组存在焦虑样行为,则进一步将模型组分为焦虑对照亚组及P2X7R抑制亚组,P2X7R抑制亚组每天腹腔注射A438079,焦虑对照亚组每天腹腔注射等量生理盐水,持续14 d后再次进行旷场实验。采用水迷宫实验观察小鼠认知功能,若模型组存在认知功能损害,则进一步将模型组分为认知功能对照亚组及P2X7R抑制亚组,处理方式同上,持续14 d后再次进行水迷宫实验。结果脑电图记录结果显示,正常组未出现癫痫脑电图波形;模型组出现癫痫持续状态,脑电图表现出强放电功率及高振幅;P2X7R抑制剂组出现癫痫发作,但脑电图放电功率及振幅均较模型组减轻;脑电图总功率及平均振幅模型组>P2X7R抑制剂组>正常组(P均<0.05)。模型组海马组织P2X7R蛋白表达高于正常组,P2X7R抑制剂组海马组织P2X7R蛋白表达低于模型组(P均<0.05)。尼氏染色结果显示,对照组海马CA1区结构完整,存活神经细胞数多,尼氏体较大且较多;模型组海马CA1区结构完整性被破坏,神经细胞数量少,尼氏体数量减少;P2X7R抑制剂组海马CA1区结构、神经细胞及尼氏体数量均较模型组有所改善。旷场实验结果显示,模型组进入中心区域次数及中心区域停留时间均少于正常组,焦虑对照亚组进入中心区域次数及中心区域停留时间均少于P2X7R抑制亚组(P均<0.05)。水迷宫实验结果显示,模型组、正常组穿越平台次数及目标象限停留时间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论P2X7R抑制剂可减轻红藻氨酸诱导小鼠癫痫发作的强度和频率,改善癫痫所致海马损伤,且可缓解癫痫小鼠的焦虑样行为。

P2X7受体在心血管疾病中的研究进展

P2X7受体,作为嘌呤受体P2X家族的一员,主要在免疫细胞、心肌平滑肌细胞和内皮细胞中表达。其天然配体ATP在组织缺氧或炎症状态下释放量显著增加。P2X7受体与ATP结合后可激活核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)依赖炎症小体,从而加剧炎症反应。近期研究揭示了P2X7受体在动脉粥样硬化、高血压、心肌梗死和肺动脉高压等心血管疾病中的病理作用。本文旨在综述P2X7受体的分子结构、分布、功能特性,及其在心血管疾病中的研究进展。

小鼠心肌梗死进程中巨噬细胞CD59和P2X7表达的动态变化

目的探讨小鼠心肌梗死进程中巨噬细胞亚群的动态变化与CD59、P2X7表达的动态变化。方法将成年雄性C57BL/6J小鼠36只随机分为对照组(不做任何处理,6只)和心肌梗死组(30只)。通过冠状动脉左前降支结扎建立小鼠急性心肌梗死模型,心肌梗死组30只小鼠又随机分为A、B、C、D、E组,分别在心肌梗死后1、3、5、7、14 d取材。收取小鼠的外周血和心脏组织,采用流式细胞术检测巨噬细胞亚群的动态变化与CD59和P2X7的表达情况。结果心肌梗死后1、3 d外周血中单核细胞数量均高于对照组[(9.5±1.7)、(10.3±3.7)×10^(4)/ml比(3.2±3.1)×10^(4)/ml](均P<0.05)。心肌梗死后1、3、5 d心脏组织白细胞计数、巨噬细胞计数均高于对照组(均P<0.05)。心脏组织中Ly6C^(high)巨噬细胞计数在心肌梗死后3 d达到高峰,而Ly6C^(low)亚群在心肌梗死后5 d达到高峰,均高于对照组(均P<0.05)。心肌梗死后1 d P2X7^(-)CD59^(-)巨噬细胞占Ly6C^(high)巨噬细胞百分比高于对照组,而P2X7^(+)CD59^(+)巨噬细胞占比低于对照组(均P<0.05)。心肌梗死后1、3、5 d P2X7^(+)CD59^(+)巨噬细胞占Ly6C^(low)巨噬细胞百分比均低于对照组,而P2X7^(-)CD59^(+)巨噬细胞占比均高于对照组(均P<0.05)。结论在小鼠急性心肌梗死的不同阶段,心脏组织巨噬细胞的亚群呈现动态变化,同时伴随CD59和P2X7表达的动态变化。

基于嘌呤能受体P2X7R的痛风性关节炎病理研究

目的 观察冰水泳浴对痛风大鼠模型病理变化的影响并探究其中P2X7R的调控机制。方法 雄性SD大鼠分为正常(NORM)组和实验组,实验组包括痛风对照(GC)组、冰水泳浴(IWS)组和亮蓝G(BBG,P2X7R拮抗剂)组。实验组大鼠通过尿酸酶抑制法联合Coderre法塑造高尿酸血症合并痛风性关节炎模型。冰水泳浴组大鼠在Coderre法造模后的0 h和12 h,分别于深约0.5 m的冰水混合物中进行5 min的耐力游泳,BBG组则在造模后立即腹腔注射BBG溶液1次。公式计算踝关节肿胀指数;尿酸酶法检测大鼠血清尿酸水平;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量;HE染色观察踝关节和滑膜组织的病理变化;Western blot和免疫组化分别检测滑膜组织中P2X7R和NLRP3蛋白表达。结果 与正常组相比,实验组大鼠血清尿酸水平及踝关节肿胀指数均显著升高(P<0.05或P<0.01),且滑膜组织均存在不同程度的炎性浸润。与痛风对照组相比,冰水泳浴组踝关节肿胀指数在12 h显著升高(P<0.05),血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量(P<0.01)及滑膜组织中P2X7R、NLRP3蛋白量均有显著表达(P<0.05);病理结果显示软骨表面破损,滑膜组织出现严重增生与糜烂,并伴有大量炎性细胞聚集。BBG组大鼠滑膜组织的P2X7R、NLRP3蛋白表达与病理损伤较痛风对照组无显著变化(P>0.05),而血清IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均有显著改善(P<0.01)。结论 冰水泳浴模拟的寒冷刺激和剧烈运动可加重痛风性关节炎的病理损伤,其机制可能与关节局部P2X7R的高表达有关。

基于P2X7R/NF-κB通路探讨清解化攻方对重症急性胰腺炎肠屏障的保护作用机制

目的研究清解化攻方基于P2X7R/NF-κB信号通路对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜屏障的保护作用及潜在作用机制。方法制备SAP大鼠模型,使用乌司他丁和清解化攻方干预后,采集各组大鼠血清、胰腺和回肠组织。HE染色观察胰腺和回肠组织病理变化;ELISA检测血清内毒素、D-乳酸含量;Western Blot法检测回肠组织P2X7R、p-IKK、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达情况;IHC检测回肠组织MUC-2和Claudin-1蛋白表达;透射电境观察回肠组织线粒体自噬情况。结果与正常组相比,模型组胰腺及回肠组织出现明显的病理改变,血清内毒素、D-乳酸含量明显升高(P<0.05),P2X7R、p-IKK、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平上调(P<0.05),Muc-2和Claudin-1蛋白表达明显降低(P<0.05);回肠组织线粒体数量减少,膜厚度增加,结构空洞,自噬小体减少;与模型组比较,清解化攻方各组和乌司他丁组大鼠胰腺及回肠组织病理损伤均缓解,血清内毒素、D-乳酸含量降低(P<0.05);P2X7R、p-IKK、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平下调(P<0.05);MUC-2和Claudin-1蛋白表达量升高(P<0.05);回肠组织线粒体数量增多,结构较完整,自噬小体增多。结论清解化攻方可以调控P2X7R/NF-κB信号通路,减轻炎症反应,起到改善SAP大鼠肠黏膜屏障损伤作用。

阻塞性睡眠呼吸暂停患者血清P2X7R、NF-κB水平与认知功能障碍的相关性

目的 研究阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)患者血清P2X7受体(P2X7R)和核因子-κB(NF-κB)水平与认知功能障碍的相关性。方法 选择2021年10月至2022年12月期间青海省人民医院收治的126例OSA患者作为OSA组,进一步根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分分为MoCA评分<26分的认知功能障碍组(n=68)和MoCA评分≥26分的认知功能正常组(n=58);另取同期体检的健康志愿者作为对照组(n=105)。检测血清P2X7R、NF-κB水平,采用logistic回归模型分析OSA患者认知功能障碍的影响因素,采用ROC曲线分析各指标对OSA患者认知功能障碍的诊断价值。结果 OSA组患者的血清P2X7R、NF-κB水平高于对照组,差异有统计学意义(t=17.295、7.088,P<0.05);认知功能障碍组患者的血清P2X7R、NF-κB水平高于认知功能正常组,差异有统计学意义(t=8.469、8.497,P<0.05);血清P2X7R、NF-κB水平升高是OSA患者认知功能障碍的危险因素(P<0.05);OSA患者血清P2X7R、NF-κB水平与MoCA评分呈负相关(P<0.05);血清P2X7R、NF-κB水平诊断OSA患者认知功能障碍的曲线下面积分别为0.862(95%CI:0.800~0.923,P<0.05)和0.859(95%CI:0.794~0.923)。结论 OSA患者血清P2X7R、NF-κB水平升高且与认知功能障碍相关,血清P2X7R、NF-κB对OSA患者认知功能障碍具有诊断效能。

亮蓝G通过抑制P2X7/NLRP3通路减轻脑缺血再灌注大鼠神经炎症

目的:研究嘌呤受体P2X7在脑缺血再灌注损伤(CIRI)中的作用。方法:使用右侧大脑中动脉闭塞法(MCAO)制备大鼠CIRI模型,通过腹腔注射给予P2X7抑制剂亮蓝G(BBG)或NLRP3抑制剂MCC950处理。神经功能评分检测大鼠神经功能的改变,伊文思蓝染色检测血脑屏障完整性,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠脑脊液中IL-1β和IL-18的含量,通过Western Blot检测右侧大脑皮质中P2X7、CD11b和NLRP3的表达。结果:BBG或者MCC950处理能改善CIRI大鼠神经功能,同时降低脑组织中伊文思蓝的含量,并降低脑脊液中IL-1β和IL-18的水平。此外,BBG可以降低右侧大脑皮质中CD11b和NLRP3的表达,但是MCC950只能降低CD11b表达,对P2X7表达没有明显影响。结论:BBG通过抑制P2X7/NLRP3通路减轻CIRI大鼠神经炎症。

DW-107/7-X型活塞压缩机活塞环磨损过快的原因及处理措施

对DW-107/7-X型压缩机在日常运行中出现的活塞环磨损过快问题进行分析,提出相应的解决措施,并对比改造前后的设备运行状况。经现场试运行可知,改造后的活塞环使用寿命达到预期目标,有效减少了易损件及人工成本的投入。

血清CXCR7、SGK1水平与急性心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗术后预后不良的关系

目的探讨血清C-X-C基序趋化因子受体7(CXCR7)、血清/糖皮质激素调节激酶1(SGK1)水平与急性心肌梗死(AMI)经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后预后不良的关系。方法选取2020年9月—2022年12月于南京医科大学第二附属医院急诊科接受PCI术的AMI患者100例为AMI组,同期医院健康体检者50例为健康对照组,根据PCI术后1年预后情况将AMI患者分为预后不良亚组30例和预后良好亚组70例。采用酶联免疫吸附法检测血清CXCR7、SGK1水平;多因素Logistic回归分析AMI患者PCI术后预后不良的影响因素;建立受试者工作特征(ROC)曲线评价血清CXCR7、SGK1水平对AMI患者PCI术后预后不良的预测价值。结果与健康对照组比较,AMI组血清CXCR7水平降低,SGK1水平升高(t/P=9.613/<0.001、9.955/<0.001);100例AMI患者PCI术后1年不良预后发生率为30.00%(30/100);与预后良好亚组比较,预后不良亚组血清CXCR7水平降低,SGK1水平升高(t/P=6.254/<0.001、5.329/<0.001)。多因素Logistic回归显示,Gensini评分高、KILLIP分级≥Ⅲ级、SGK1升高为AMI患者PCI术后预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=1.071(1.025~1.119)、4.501(1.172~17.282)、1.132(1.046~1.224)],CXCR7升高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.956(0.926~0.987)]。血清CXCR7、SGK1及二者联合预测AMI患者PCI术后预后不良的AUC分别为0.794、0.779、0.902,二者联合的AUC大于血清CXCR7、SGK1单独预测(Z/P=3.062/0.002、2.930/0.003)。结论AMI患者血清CXCR7水平降低、SGK1水平升高,是PCI术后不良预后的影响因素,二者联合对其预测价值较高。

P2X7受体在癌痛中作用的研究进展

P2X7受体是一种ATP门控离子通道,在肿瘤条件下,P2X7受体的激活触发了促炎细胞因子的释放,刺激了伤害性神经元的兴奋,从而加剧了疼痛的传递。在临床前癌疼痛模型中,具有作为癌疼痛管理的新治疗靶点的潜力。

基于YOLOv7x的接触网吊弦缺陷检测方法

【目的】针对铁路运行时由于接触网吊弦缺陷造成的安全隐患问题,提出一种基于改进YOLOv7x的接触网吊弦缺陷识别方法。【方法】首先在主干特征提取层的末端引入Swin Transformer网络替换原有的扩展高效层聚合网络模块,提高网络掌握全局信息的能力,再引用SIoU(SCYLLA-IoU)损失函数替换原网络的损失函数,为预测框收敛过程添加方向惩罚机制,最后使用coordinate attention(CA)注意力机制融合颈部层中的扩展高效层聚合网络模块,增强颈部网络模块的全局感受野。【结果】仿真结果表明,此改进算法训练出的模型精度达到95.9%,相较于原YOLOv7x算法检测精度提高了4.7%,检测速度也达到了52帧/s。【结论】改进算法解决了在吊弦缺陷识别领域检测效率低下的问题,在实际作业中能够提高接触网吊弦缺陷排查工作的效率。

冬凌草甲素对海马CA1星形胶质细胞P2X7受体电流的影响

目的:探索冬凌草甲素是否对海马CA1星形胶质细胞P2X7受体电流有影响。方法:采用Autodock软件对冬凌草甲素与P2X7蛋白进行分子对接;采用全细胞膜片钳记录冬凌草甲素对海马CA1星形胶质细胞P2X7受体激动剂Bz-ATP激发电流的影响。结果:冬凌草甲素与P2X7蛋白的结合能为-5.86 kcal/mol,可与P2X7蛋白的Lys592残基形成氢键,与Tyr550残基形成疏水作用;Bz-ATP能激发海马CA1区星形胶质细胞的电流反应,且1000μmol/L Bz-ATP激发的电流反应较强;10μmol/L冬凌草甲素溶液孵育1 h后,海马CA1区星形胶质细胞对谷氨酸能受体激动剂NMDA和AMPA溶液的电流反应无明显变化;对Bz-ATP的电流反应降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:冬凌草甲素可与P2X7蛋白对接形成稳定的复合物,具有较好的亲和力;冬凌草甲素可抑制海马CA1星形胶质细胞P2X7受体电流。

细胞外ATP激活受体P2X7在骨质疏松症中的作用机制

骨质疏松症已逐渐成为一个重大的医疗和社会经济问题,其典型特征包括骨密度下降、骨微结构损坏以及骨折风险的增加。现有的治疗策略主要集中在症状管理上,但其并未能从根本上改变病情的发展趋势。因此,寻找并开发针对新的治疗靶点是更有效的治疗策略,已经成为当前研究的重要方向。P2X7作为一种由胞外ATP激活的离子通道,在近年的研究中已证实其在骨形成细胞和骨吸收细胞的生长、功能和存活方面发挥了关键作用,对于骨质疏松症的治疗具有巨大的潜力。因此,P2X7有望成为骨质疏松症治疗的新靶点。笔者对P2X7在骨质疏松症中的作用以及如何针对这一新靶点的治疗进行综述,旨在为开发新的骨质疏松症治疗策略提供新的思路和方向。

拮抗P2X7受体在减轻子痫抽搐大鼠海马损伤中的作用

目的研究干预嘌呤能离子通道型受体7(P2X7)受体可减轻子痫抽搐海马损伤的作用机制。方法SD雌鼠28只按随机数字表法分为4组(每组n=7),将雌雄鼠进行2∶1合笼,第2天阴道涂片镜下观察到精子细胞记为妊娠第0天(GD0),通过GD14尾静脉注射LPS、GD16~18连续腹腔注射PTZ的方式制备子痫抽搐孕鼠模型。于GD18腹腔注射PTZ后立即腹腔注射P2X7抑制剂(A-438079)制备抑制剂组。即分组为:①正常妊娠组(P组);②类子痫抽搐组(LPS+PTZ组);③P2X7抑制剂组(LPS+PTZ+A-438079组);④类子痫对照组(LPS+PTZ+NS组)。根据Racine评分标准判断大鼠癫痫发作时等级以此评估各组孕鼠抽搐程度记录各期持续时间;Western blot检测孕鼠海马P2X7、NLRP3蛋白表达水平;ELISA测定孕鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、胎盘生长因子(PIGF)、可溶性fms样酪氨酸激酶1(sFlt-1)炎症因子表达情况。结果LPS+PTZ组、LPS+PTZ+NS组大鼠与P组大鼠相比,抽搐行为学评分显著增高;LPS+PTZ组、LPS+PTZ+NS组大鼠与LPS+PTZ+A-438079组大鼠相比,1期癫痫发作潜伏期、5期癫痫发作潜伏期、1-4期癫痫发作持续时间减少;5期癫痫发作比率和5期癫痫发作持续时间均延长。Western blot结果显示,与LPS+PTZ组和LPS+PTZ+NS组相比,LPS+PTZ+A-438079组孕鼠海马P2X7、NLRP3表达升高。ELISA结果显示,与P组相比,LPS+PTZ组、LPS+PTZ+NS组孕鼠血清炎症因子标志物TNF-α和IL-1β;先兆子痫标志物sFlt-1;PIGF升高,而给予P2X7受体抑制剂后,各项指标均有所降低。结论干预P2X7受体可能通过降低类子痫抽搐孕鼠的全身炎症反应,减轻神经海马损伤,提高抽搐阈值,抑制子痫抽搐的发生。

承压设备用5 mm超薄X7Ni9钢板叠轧工艺

介绍了采用叠轧工艺生产的5 mm超薄X7Ni9钢板的技术要求、工序工艺控制点及实物质量,通过合理控制坯料成分、坯料复合、轧制及热处理工艺,采用叠轧工艺成功生产出5 mm超薄X7Ni9钢板,叠轧钢板厚度及不平度均能满足EN 10029:2010厚度大于等于3 mm的热轧钢板的尺寸、外形及允许偏差标准要求,钢板性能良好,拉伸性能据标准值有较大的富余量,显微组织中存在的逆转奥氏体可确保钢板具有良好的低温冲击性能。

小胶质细胞不同极化状态下P2rx7剪接变异体差异化表达

目的P2X7受体(P2rx7)的选择性剪切影响P2rx7基因外显子的表达,是调节P2rx7功能的主要方式之一。本研究分析小胶质细胞M1/M2极化状态下P2rx7不同剪接异构体的差异表达。方法培养并增殖BV2永生化小鼠小胶质细胞,利用药物脂多糖(LPS,100 ng/mL)或白细胞介素-4(IL-4,40 ng/mL)分别刺激BV2细胞,培养48 h后通过流式细胞仪分析确定细胞M1/M2极化状态,并采用实时定量PCR分析小鼠P2rx7-v1、-v2、-v3、-v4和-vk等5种P2rx7剪接异构体的表达量。结果正常培养条件下小鼠小胶质细胞系BV2中所有P2rx7各转录本均可在mRNA水平检测到,其中P2rx7-v1是BV2细胞系中表达的主要形式,P2rx7-v2、-v3、-v4和-vk等异构体表达量相对较少或几乎没有。应用LPS刺激培养BV2细胞48 h后,显著抑制了M2相关标志物CD206的表达(P<0.01),M1相关标志物CD86的表达略有升高但差异无统计学意义(13.0%vs.78.8%,P=0.054),此时P2rx7-v1、-v2、-v3、-v4和-vk等异构体表达量均有明显增加(P<0.01),P2rx7-v4表达量增加相对较小(15.8%,P<0.05)。IL-4刺激培养BV2细胞48 h后,M2相关标志物CD206表达显著增加(280.2%,P<0.01),而M1相关标志物CD86表达明显减少(47.6%,P=0.035),进一步检测显示P2rx7-v1、-v4异构体表达量明显减少(64.9%vs.52.9%,P<0.01),P2rx7-v3的表达量则略有增加(61.7%,P<0.01)。结论小胶质细胞M1/M2极化状态下5种P2rx7剪接异构体呈现不同程度表达改变,进一步研究不同P2rx7剪接异构体的结构功能是否影响小胶质细胞极化状态很有必要。

人参皂苷Rc调节P2X7r-NLRP3信号通路改善酒精性肝病作用机制

目的探讨人参皂苷Rc(Ginsenoside Rc,简称Rc)对酒精性肝病的保护作用及其作用机制。方法采用50 mmol/L乙醇(EtOH)刺激小鼠肝细胞(AML-12)12 h后,采用不同浓度Rc处理24 h。Western blot方法检测AML-12细胞中P2X7r、NLRP3和IL-23蛋白表达情况;RT-qPCR测定AML-12细胞中SREBP1、Lipin-1、P2X7r、NLRP3的mRNA表达情况;通过ELISA法分析肝细胞上清液中IL-1β和IL-18水平。结果与对照组比较,EtOH能够诱导AML-12细胞脂质变性和炎症因子释放,Rc能够有效下调P2X7r、NLRP3和IL-23的蛋白或mRNA表达,抑制EtOH诱导AML-12细胞中SREBP1和Lipin-1的mRNA表达,抑制EtOH诱导AML-12细胞中IL-1β和IL-18向胞外释放(均P<0.001)。结论Rc能够抑制酒精性肝病进程,作用机制可能与抑制P2X7r-NLRP3信号通路有关。