7次跨膜超蛋白家族成员4基因对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的观察7次跨膜超蛋白家族成员4（TMTSF4）基因表达水平对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法构建TM7SF4慢病毒表达载体，转染MCF-7人乳腺癌细胞株，下调TM7SF4基因的表达，运用Cellomics、流式细胞术、碘化丙锭．荧光活化细胞分类计（PI-FACS）法及克隆形成实验，研究TM7SF4基因对NCF-7细胞的增殖、凋亡、细胞周期及克隆形成能力的影响。结果（1）对MCF-7细胞增殖能力的影响：MCF-7细胞连续培养5d后，实验组细胞数为：（239．1±37．7）、（508．4±52．8）、（282．2±84．0）、（308．0±167．1）、（131．6±82．6）个/孔；而空白细胞组细胞数为：（382．8±38．0）、（1115．0±155．9）、（1426．2±192．4）、（2468．4±232．6）、（2903．0±165．7）个/孔，空质粒组细胞数为：（380．8±39．0）、（1090．0±145．9）、（1426．0±180．3）、（2379．0±228．6）、（2855．0±156．6）个／孔，结果显示实验组细胞生长及细胞增殖倍数明显受到抑制，与空白对照组及空质粒组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；（2）对细胞周期的影响：实验组MCF-7细胞处于G0／G1期、s期、G2／M期的细胞数为（61．87±0．27）、（20．31±0．11）、（17．83±0．35）个／孔；而空白对照组处于C0／G1期、S期、G2／M期的细胞数为（57．46±1．40）、（30．42±0．36）、（12．83±0．55）个／孔；空质粒组处于C0／G1期、S期、G2／M期的细胞数为（57．78±1．23）、（30．11±0．47）、（13．30±0．79）个／孔。实验组与空白对照组、实验组与空质粒组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；（3）对细胞凋亡的影响：实验组散点图MCF-7细胞的凋亡率为（9．94±0．57）％，峰型图MCF-7细胞的凋亡率为（27．37±1．11）％；空白对照组散点图MCF-7细胞的凋亡率为（5．88±0．23）％，峰型图MCF-7细胞的凋亡率为（23．34±0．50）％；空质粒组散点图MCF-7细胞的凋亡率为（5．80±0．24）％，峰型图的凋亡率为（23．37±0．46）％，实验组与空白细胞对照组及实验组与空质粒组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；（4）对细胞克隆形成的影响：实验组形成细胞克隆集落数目为（11±3）个，空白细胞对照组为（34士2）个，空质粒组为（29±1）个。实验组与空白细胞组及空质粒组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TM7SF4基因具有促进MCF-7乳腺癌细胞增殖、克隆形成的能力，同时抑制细胞凋亡及细胞周期进展。TM7SF4基因通过影响乳腺癌细胞生物学行为发挥促癌发生发展的作用。

紫花牡荆素通过抑制7次跨膜超蛋白家族成员4的表达抑制膀胱癌细胞增殖迁移和侵袭

目的探讨紫花牡荆素(CAS)对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法体外培养T24细胞, 分为对照组、5、10、20 μmol/L CAS组、si-NC组、si-TM7SF4组、CAS+pcDNA组和CAS+pcDNA-TM7SF4组, 采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组细胞的增殖抑制情况, Transwell法检测细胞迁移和侵袭的能力, Western blot法检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9和7次跨膜超蛋白家族成员4(TM7SF4)蛋白的表达水平, 实时荧光定量PCR检测TM7SF4 mRNA的表达水平。结果 5、10、20 μmol/L CAS组T24细胞增殖抑制率分别为(17.68±1.41)%、(33.54±3.16)%和(61.44±5.50)%, 均高于对照组[(0.00±0.00)%, 均P<0.001]。5、10、20 μmol/L CAS组细胞迁移数分别为(72.83±5.66)个、(59.13±4.27)个和(41.25±3.22)个, 细胞侵袭数分别为(55.83±5.15)个、(42.19±3.06)个和(31.13±3.22)个, 均低于对照组[分别为(86.11±5.16)个和(68.82±5.29)个, 均P<0.001]。5、10、20 μmol/L CAS组T24细胞中cyclin D1、MMP-2、MMP-9、TM7SF4蛋白表达水平、TM7SF4 mRNA表达水平均低于对照组(均P<0.001), p21蛋白表达水平高于对照组(P<0.001)。si-TM7SF4组T24细胞增殖抑制率[(50.35±4.67)%]高于si-NC组[(6.31±0.58)%, P<0.001], si-TM7SF4组细胞迁移数[(53.51±4.18)个]和细胞侵袭数[(42.92±3.81)个]均低于si-NC组[分别为(85.26±4.99)个和(67.93±4.64)个, 均P<0.001]。si-TM7SF4组T24细胞中TM7SF4、cyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均低于si-NC组(均P<0.001), p21蛋白表达水平高于si-NC组(P<0.001)。CAS+pcDNA-TM7SF4组T24细胞增殖抑制率[(21.45±2.46)%]低于CAS+pcDNA组[(64.06±4.49)%, P<0.001], CAS+pcDNA-TM7SF4组细胞迁移数[(75.66±6.57)个]和侵袭数[(59.35±5.40)个]均高于CAS+pcDNA组[分别为(40.43±3.85)个和(30.25±3.32)个, 均P<0.001]。CAS+pcDNA-TM7SF4组T24细胞中TM7SF4、cyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均高于CAS+pcDNA组(均P<0.001), p21蛋白表达水平低于CAS+pcDNA组(P<0.001)。结论 CAS可能通过抑制TM7SF4表达抑制膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭。

四次跨膜蛋白1在肾透明细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨肾透明细胞癌组织中四次跨膜蛋白1(TM4SF1)的表达改变及临床意义。方法选取2018年至2019年青岛大学医学院附属医院经手术切除的肾透明细胞癌的住院患者标本20例作为试验组,癌旁组织作为对照组。采用荧光定量PCR技术和蛋白印迹方法检测TM4SF1在肾透明细胞癌组织中表达的改变,并与癌旁组织相比较,探讨TM4SF1在肾透明细胞癌发生发展中的变化。结果与癌旁组织比较,肾癌组织中TM4SF1的mRNA表达水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);与癌旁组织比较,肾癌组织中TM4SF1的蛋白表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TM4SF1可能是未来肾癌治疗的潜在靶点。TM4SF1在不同组织中的表达结果不一致可能与组织类型有一定的关系。

子宫内膜癌组织KIF23、LAPTM4B、Snail表达与患者临床病理参数及预后的关系

目的:探讨子宫内膜癌组织驱动蛋白家族成员23(KIF23)、溶酶体相关4次跨膜蛋白质β(LAPTM4B)、Snail表达与患者临床病理参数及预后的关系。方法:选择2012年10月至2015年2月期间在我院治疗的130例子宫内膜癌患者进行临床研究,采用免疫组织化学染色法检测KIF23、LAPTM4B、Snail的表达,分析KIF23、LAPTM4B、Snail的表达与各项临床病理参数及预后的关系。Cox比例风险回归分析子宫内膜癌患者预后的影响因素。结果:子宫内膜癌组织中KIF23、LAPTM4B、Snail阳性率明显高于癌旁正常组织(x^2=61.356、67.031、82.028,均P=0.000)。子宫内膜癌组织中KIF23、LAPTM4B、Snail表达与淋巴结转移、肌层浸润和FIGO分期相关(P<0.05)。KIF23、LAPTM4B、Snail阳性患者5年总生存率明显低于KIF23、LAPTM4B、Snail阴性患者(P<0.05)。FIGO分期、KIF23、LAPTM4B和Snail是子宫内膜癌患者预后的影响因素(HR=1.409、1.478、1.523、2.178,P<0.05)。结论:KIF23、LAPTM4B和Snail在子宫内膜癌中阳性表达率升高,并且均与子宫内膜癌淋巴结转移、肌层浸润、FIGO分期和预后相关,在子宫内膜癌的诊断和预后评估中具有一定临床意义。