黄芩素-7-甲醚对高原缺氧诱导小鼠心肌组织损伤的保护作用研究

目的探讨黄芩素-7-甲醚对高原缺氧诱导小鼠心肌组织损伤的保护作用。方法将40只雄性BALB/C小鼠随机分为正常对照组(注射用水灌胃)、缺氧模型组(注射用水灌胃)、芦丁组(500mg/kg灌胃)和黄芩素-7-甲醚组(500mg/kg灌胃),每组10只。除正常对照组外,其余3组均置于模拟高原环境8000m条件下缺氧12h。然后所有小鼠均眼眶采血,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性;最后处死小鼠取心肌组织,检测过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量,测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,同时检测核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)及血红素加氧酶1(HO-1)的表达水平。结果与正常对照组比较,缺氧模型组血清CK和LDH活性升高,心肌组织H2O2和MDA含量升高,心肌组织SOD、CAT和GSH-Px活性降低,心肌组织Nrf2和HO-1表达升高(P<0.01)。与缺氧模型组比较,芦丁组和黄芩素-7-甲醚组血清CK和LDH活性降低,心肌组织H2O2和MDA含量降低,心肌组织SOD、CAT和GSH-Px活性升高,心肌组织Nrf2和HO-1蛋白表达进一步升高(P<0.01)。结论黄芩素-7-甲醚对模拟高原缺氧导致的心肌组织损伤具有一定的保护作用,机制可能与清除自由基、激活Nrf2/HO-1信号途径、提高抗氧化酶活性、降低机体氧化应激水平有关.

黄芩素-7-甲醚对高原缺氧小鼠脑组织保护作用研究

研究黄芩素-7-甲醚对高原缺氧小鼠脑组织的保护作用及机制。用50只小鼠进行常压耐缺氧实验,测定黄芩素-7-甲醚的有效剂量。然后将88只小鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、芦丁组和黄芩素-7-甲醚组,连续灌胃给药5天,最后一个给药60 min后,置于模拟海拔8000 m氧舱内停留12 h,检测脑组织中含水量、过氧化氢(H2O2)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、抗氧化酶以及Nrf2和HO-1蛋白的表达情况。结果发现:低压低氧能够诱导小鼠脑含水量、脑组织中H_2O_2、NO和MDA含量以及LDH活性显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性显著减低,Nrf2和HO-1蛋白表达增强。经黄芩素-7-甲醚预处理后能够显著降低高原缺氧小鼠脑组织中H_2O_2、MDA和NO含量以及LDH活性,提高抗氧化酶的活性,同时进一步增加Nrf2和HO-1蛋白的表达。以上结果表明:黄芩素-7-甲醚能够缓解高原缺氧导致脑组织氧化应激损伤,作用机制可能与清除自由基,激活Nrf2/ARE/HO-1信号途径,提高抗氧化酶活性有关。

沙漠嘎子中总黄酮及圣草酚-7-甲醚、异樱花素的含量测定

目的:建立沙漠嘎子中总黄酮及圣草酚-7-甲醚、异樱花素的含量测定方法。方法:以圣草酚-7-甲醚为指标性成分,用紫外分光光度法(UV)测定总黄酮的含量,检测波长506nm;采用高效液相色谱法(HPLC),使用YMC-Pack ODS-A(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱,以乙腈-0.2%磷酸溶液(35∶65)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长288nm,以外标法计算沙漠嘎子中圣草酚-7-甲醚和异樱花素的含量。结果:总黄酮量在0.1228-0.7368mg范围内线性关系良好(r=0.9991),平均回收率(n=6)为100.5%(RSD=1.41%);圣草酚-7-甲醚、异樱花素进样浓度分别在3.016-30.16μg/ml(r=0.9999),3.304-33.04μg/ml(r=0.9999)范围内呈良好的线性关系,平均回收率(n=6)为98.9%(RSD=1.20%),96.8%(RSD=1.38%)。结论:紫外分光光度法和高效液相色谱法均简便、准确、重现性好,适用于沙漠嘎子中总黄酮及圣草酚-7-甲醚、异樱花素的含量测定。

黄芩素-7-甲醚对缺氧致PC12细胞损伤的保护作用

目的研究黄芩素-7-甲醚对缺氧PC12细胞的保护作用。方法将PC12细胞分为正常对照组、缺氧模型组、芦丁组和黄芩素-7-甲醚组,培养24 h后,MTT法检测黄芩素-7-甲醚对细胞活力的影响;酶标仪法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性以及细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)水平;2′,7′-二氯荧光素探针法检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;实时荧光定量PCR和Western blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA和蛋白的表达。结果与正常对照组相比,缺氧导致PC12细胞活力显著降低,LDH、MDA和ROS水平显著升高,抗氧化酶SOD和CAT的活力显著降低。黄芩素-7-甲醚预处理能够逆转这些变化。此外,缺氧能够诱导细胞内Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达增加,而黄芩素-7-甲醚能够进一步提高Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达。结论黄芩素-7-甲醚对缺氧致PC12细胞损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1通路,抑制氧化应激损伤有关。

RP-HPLC同时测定不同采收期江香薷两种成分的含量

目的：同时测定不同采收期江香薷药材中木犀草素、黄芩素-7-甲醚的含量。方法：采用Angilent Zorbax，Extend C-18 （4．6mm×250mm，5μm）色谱柱；以甲醇-0．4％磷酸水溶液（体积比为50：50）为流动相进行等度洗脱，柱温：35℃；流速：1．0mL／min；榆测波长：350nm。结果：木犀草素、黄芩素-7-甲醚分别在0．04～0．61μg、0．20～3．01μg范围内线性关系良好，相关系数均为0．9999。药材提取方法的平均回收率分别为99．54％、98．60％，精密度、稳定性及重复性均良好。不同采收期江香薷药材中木犀草素和黄芩素-7-甲醚含量有较大差异，以8月份药材中木犀草素和黄芩素-7-甲醚含量最高，分别为264．8μg／g、2746．3μg／g。结论：所建立的方法灵敏快速，操作简便，重现性好，可用于江香薷药材的质量控制。

不同地区香薷各部位总黄酮及游离黄酮的分析研究

目的测定不同地区香薷各部位总黄酮和游离黄酮的含有量,找出含黄酮量较高的药材产地和黄酮的主要储存部位。方法以紫外可见分光光度法(UV-Vis)测定香薷总黄酮,最适条件是0.05 mol/L三氯化铝,pH值为5.0的乙酸缓冲液,水浴温度50℃,水浴时间30 min,检测波长420 nm。采用反相高效液相色谱法测定3种主要游离黄酮,色谱柱为Welchrom TM C18(200 mm×4.6 mm,5μm),以0.4%磷酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长350 nm;柱温25℃。结果木犀草素、芹菜素和黄芩素-7-甲醚分别在0.88～176μg/mL、1.1～219.2μg/mL和1.55～149.4μg/mL范围内表现出良好的线性(r>0.999);方法的回收率在98.80%～102.01%之间,RSD均小于5%,精密度和稳定性良好。以江西和湖北产的香薷总黄酮含有量较高,其全草中总黄酮的质量分数分别为5 955.35μg/g和4 362.28μg/g,特别是江西和湖北产香薷花苞中总黄酮的质量分数分别高达13 335.99μg/g和12 936.46μg/g。结论不同地区香薷总黄酮含有量由高到低依次为江西、湖北、河南、浙江,不同部位总黄酮的含有量由高到低依次为苞、尖、茎、根。江西产香薷的总黄酮和3种主要游离黄酮的量均较高,且主要集中在茎以上部位。

亳菊花中黄酮类化合物的分离鉴定

菊花为菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥头状花序,为了进一步揭示药理活性的物质基础,为该中药的开发利用和质量评价提供依据,安徽亳州亳菊花中的黄酮类化合物进行了系统研究。亳菊经醇提、萃取、硅胶柱层析与纯化得到4个黄酮类化合物。通过理化常数和波谱解析鉴定了其中3个化合物的结构,分别为:芹菜素-7-甲醚(Apigenin-7-methyl ether)(Ⅰ)、芹菜素(Apigenin)(Ⅱ)和木犀草素(Luteolin)(Ⅲ),另外1个化合物的结构尚在鉴定中。上述3个化合物均为首次从该植物中分到的已知化合物。

中药香薷不同部位总黄酮及3种主要黄酮成分含量分析

中药材中活性成分的含量是中药品质优劣的关键指标。本文建立了香薷中总黄酮和3种主要黄酮的分析方法,探索不同部位黄酮含量的差异,为香薷黄酮类成分的开发利用奠定基础。结果表明优化后的分光光度法对香薷总黄酮测定具有专一性、稳定性。高效液相色谱测定木犀草素、芹菜素和黄芩素-7-甲醚的方法在测定范围内表现出良好的线性关系(r>0.999);方法的回收率在98.77%～102.13%之间,RSD均小于5%;不同部位总黄酮的含量由高到低依次为:苞>尖>茎>根,且江西产香薷总黄酮的含量高于浙江产的香薷。这提示在工业生产上提取香薷黄酮类物质时尽量选择道地药材,同时可考虑弃去根部及茎的下端,以便提高浸提效率,增加经济效益。本试验建立的香薷中总黄酮和游离黄酮的测定方法准确、稳定,明确了香薷中总黄酮主要富集在花苞及附近,为进一步提高香薷资源的开发利用提供了理论依据和科学指导。

石蝉草中的三个新黄酮苷

为了研究石蝉草的化学成分,用色谱法进行分离纯化,从石蝉草的正丁醇萃取部位分离得到3个化合物,根据光谱数据和理化性质进行结构鉴定,分别鉴定为阿拉波亭-4′,7-二甲醚-8-O-β-D-葡糖苷(I)、异高黄芩素-4′-甲醚-8-O-α-L-阿拉伯糖基(1→4)-β-D-葡糖苷(II)、异高黄芩素-4′,7-二甲醚-8-O-α-L-阿拉伯糖基(1→4)-β-D-葡糖苷(III)。化合物I,II,III均为新化合物。

沙漠嘎HPLC特征图谱研究

目的:建立沙漠嘎的HPLC特征图谱,为沙漠嘎的质量评价提供方法。方法:色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),以乙腈-0. 1%甲酸(30∶70)为流动相进行等度洗脱,流速:1. 0 m L·min-1,检测波长:288 nm,柱温:25℃,采用中药色谱指纹图谱评价系统进行相似度分析。结果:建立了沙漠嘎的HPLC特征图谱,确定了8个特征峰的相对保留时间,其中5个特征峰分别被指认为李属素、甲基3-(4'-羟苯基)香豆酸、圣草酚-7-甲醚、茵陈蒿香豆酸A、异樱花亭。结论:该方法简单、可靠,可为沙漠嘎药材的质量评价和资源开发提供科学参考。

木豆叶化学成分研究

从抗菌消炎草药术豆叶中分得11种结晶,鉴定为牡荆甙(vitexin)(Ⅰ),水杨酸(salicylicacid)(Ⅱ),三十一烷(hentriacontane)(Ⅲ),2-羧基-3-羟基-4-异戊烯基-5-甲氧基-茋(2-carboxyl-3-hydroxy-4-isoprenyl-5-methoxy-stilbene)(Ⅳ),虫膝蜡醇(laccerol)(Ⅴ),3-羟基-4-异戊烯基-5-甲氧基-茋(longistyline A)(Ⅵ),异美五针松双氢黄酮(pinostrobin)(Ⅶ),β-谷甾醇(β-sitosterol)(Ⅷ),2-异戊烯基-3-甲氧基-5-羟丛-茋(longistyline C)(Ⅸ),柚皮素-4′,7-二甲醚(naringenine-4′,7-dimethyl ether)(Ⅹ),和β-香树脂醇(β-amyrin)(Ⅺ)。

不同产地差不嘎蒿的质量对比研究

目的:考察不同产地差不嘎蒿药材的各项质量指标,为其质量标准建立及优质产地的筛选提供一定的实验依据。方法:采用HPLC法,流动相:乙腈-0.2%甲酸水(35∶65)流量:0.8ml/min;检测波长:288nm;柱温:30℃,测定指标性成分异樱花素、圣草酚-7-甲醚的含量;按照2010年版《中国药典》(一部)附录方法测定其醇溶性浸出物、水分、杂质、灰分含量及其酸败度,综合评定药材质量。结果:不同产地的药材之间有一定的差异,其中异樱花素、圣草酚-7-甲醚含量差异较为明显,水分随保藏年份的增加而减少,其他项的差异保持在一定范围内。结论:不同产地的差不嘎蒿药材的质量有所不同,内蒙古自治区赤峰市可作为优质种源。

白花鬼针草化学成分研究

目的:研究白花鬼针草醇提物的化学成分。方法:以硅胶色谱、Sephadex LH-20色谱及C18反相硅色谱分离纯化白花鬼针草醇提物的化学成分,以1H-NMR、13C-NMR以及质谱鉴定化学结构。结果:从白花鬼针草醇提物中分离、纯化、鉴定了6个化合物,分别为:槲皮素-3,3′-二甲醚-7-O-β-D-吡喃酮葡萄糖苷(1)、奥卡宁4′-O-β-D-(2″,4″,6″-三乙酰基)-吡喃酮葡萄糖苷(2)、4-O-(6″-O-对-香豆酰基-β-D-吡喃酮葡萄糖)-对-香豆酸(3)、4-O-(2″-O-乙酰基-6″-O-对-香豆酰基-β-D-吡喃酮葡萄糖)-对-香豆酸(4)、邻苯二甲酸异丙酯(5)、原儿茶酸(6)。结论:6个化合物均首次从白花鬼针草中分离得到,其中,槲皮素-3,3′-二甲醚-7-O-β-D-吡喃酮葡萄糖苷(1)、4-O-(6″-O-对-香豆酰基-β-D-吡喃酮葡萄糖)-对-香豆酸(3)、4-O-(2″-O-乙酰基-6″-O-对-香豆酰基-β-D-吡喃酮葡萄糖)-对-香豆酸(4)、邻苯二甲酸异丙酯(5)4个化合物属于首次从鬼针草数药用植物植物中分离鉴定。

香薷HPLC指纹图谱及多指标成分定量分析

目的:建立香薷的HPLC指纹图谱及其咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、黄芩素-7-甲醚、香荆芥酚、麝香草酚7个成分的HPLC含量测定方法。方法:采用Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~17 min,12%B→20%B;17~30 min,20%B→30%B;30~40 min,30%B→45%B;40~55 min,45%B→54%B),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为280、330 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。结果:建立了香薷HPLC指纹图谱,共确定了14个共有峰,并指认其中5个共有峰,分别为咖啡酸(5号峰)、迷迭香酸(10号峰)、黄芩素-7-甲醚(12号峰)、香荆芥酚(13号峰)、麝香草酚(14号峰),17批香薷样品的相似度均>0.910;对17批药材中指认的7个成分进行含量测定,其质量浓度分别在1.04~52.0μg·mL^(-1)(r=0.9993,n=5)、6.0~300.0μg·mL^(-1)(r=0.9995,n=5)、0.12~5.88μg·mL^(-1)(r=0.9994,n=5)、0.12~5.84μg·mL^(-1)(r=0.9998,n=5)、2.42~120.8μg·mL^(-1)(r=0.9998,n=5)、2.24~112.0μg·mL^(-1)(r=0.9995,n=5)、10.2~510.0μg·mL^(-1)(r=0.9995,n=5)范围内线性关系良好,平均回收率为104.3%~97.2%,RSD为0.18%~2.2%;17批样品中咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、黄芩素-7-甲醚、香荆芥酚、麝香草酚含量范围分别为0.442~1.028、1.222~9.727、0.017~0.093、0.016~0.070、0.279~1.013、0.0659~1.673、5.007~9.293 mg·g^(-1)。结论:该方法操作简便、可靠,重复性好,能同时测定7个成分的含量,为有效控制香薷质量提供了更加全面的依据。

平卧菊三七的化学成分研究(Ⅰ)

目的研究平卧菊三七Gynura procumbens全草的化学成分。方法利用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、中压柱色谱及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,通过NMR、MS等鉴定化合物结构。结果从平卧菊三七全草的70%乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为槲皮素（1）、芹菜素（2）、木犀草素（3）、山柰酚（4）、黄芪苷（5）、山柰酚-5-O-（6″-O-乙酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）、7-甲醚黄芩素（7）、4-甲氧基肉桂酸（8）、苄基葡萄糖苷（9）、2-苯乙基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（10）、3,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（11）、3,5-二咖啡酰基奎宁酸乙酯（12）、3,4-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（13）、4,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（14）、原儿茶酸（15）和丁香酚苷（16）。结论化合物7、8、12、14和16为首次从菊三七属植物中分离得到,化合物3、6、9~11和13为首次从该植物中分离得到。

HPLC法测定沙漠嘎种子中两种二氢黄酮的含量

目的建立沙漠嘎种子中两种二氢黄酮异樱花素和圣草酚-7-甲醚的含量测定方法。方法采用ZORBAXEclipseXDB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);柱温:30℃;流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(40∶60);流速:1mL/min;检测波长:288nm。结果异樱花素和圣草酚-7-甲醚的平均回收率分别为100.1%、99.8%,RSD为0.82%、2.34%(n=6)。结论本法操作简便、准确,可作为沙漠嘎种子的质量控制方法之一。

小花鬼针草中1个新的橙酮苷类化合物

目的对小花鬼针草Bidens parviflora全草的化学成分进行系统研究。方法对小花鬼针草80%乙醇提取物的醋酸乙酯部位采用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从小花鬼针草80%乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为(Z)-6-O-(4″-O-乙酰基-6″-O-p-香豆酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-6,7,3′,4′-四羟基橙酮(1)、奥卡宁-4′-O-β-D-(6″-乙酰基)-葡萄糖苷(2)、7,3′,4′-三羟基-6-O-(4″,6″-二乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-橙酮(3)、6,7,3′,4′-四羟基橙酮(4)、异奥卡宁(5)、丁香酸-4-O-α-L-鼠李吡喃糖苷(6)、奥卡宁-4′-O-β-D-(6″-反式-对-香豆酰基)-吡喃葡萄糖苷(7)、奥卡宁-4′-O-β-D-(4″-乙酰基-6″-反式-对-香豆酰基)-吡喃葡萄糖苷(8)、槲皮素-3,4′-二甲醚-7-O-芸香糖苷(9)、cordifolioidyne B(10)。结论化合物1为1个新化合物,命名为鬼针草苷I,化合物6和10为首次从该属植物中分离得到,其他化合物为首次从该植物中分离得到。