黄芩素-7-甲醚对高原缺氧诱导小鼠心肌组织损伤的保护作用研究

目的探讨黄芩素-7-甲醚对高原缺氧诱导小鼠心肌组织损伤的保护作用。方法将40只雄性BALB/C小鼠随机分为正常对照组(注射用水灌胃)、缺氧模型组(注射用水灌胃)、芦丁组(500mg/kg灌胃)和黄芩素-7-甲醚组(500mg/kg灌胃),每组10只。除正常对照组外,其余3组均置于模拟高原环境8000m条件下缺氧12h。然后所有小鼠均眼眶采血,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性;最后处死小鼠取心肌组织,检测过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量,测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,同时检测核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)及血红素加氧酶1(HO-1)的表达水平。结果与正常对照组比较,缺氧模型组血清CK和LDH活性升高,心肌组织H2O2和MDA含量升高,心肌组织SOD、CAT和GSH-Px活性降低,心肌组织Nrf2和HO-1表达升高(P<0.01)。与缺氧模型组比较,芦丁组和黄芩素-7-甲醚组血清CK和LDH活性降低,心肌组织H2O2和MDA含量降低,心肌组织SOD、CAT和GSH-Px活性升高,心肌组织Nrf2和HO-1蛋白表达进一步升高(P<0.01)。结论黄芩素-7-甲醚对模拟高原缺氧导致的心肌组织损伤具有一定的保护作用,机制可能与清除自由基、激活Nrf2/HO-1信号途径、提高抗氧化酶活性、降低机体氧化应激水平有关.

黄芩素-7-甲醚对高原缺氧小鼠脑组织保护作用研究

研究黄芩素-7-甲醚对高原缺氧小鼠脑组织的保护作用及机制。用50只小鼠进行常压耐缺氧实验,测定黄芩素-7-甲醚的有效剂量。然后将88只小鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、芦丁组和黄芩素-7-甲醚组,连续灌胃给药5天,最后一个给药60 min后,置于模拟海拔8000 m氧舱内停留12 h,检测脑组织中含水量、过氧化氢(H2O2)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、抗氧化酶以及Nrf2和HO-1蛋白的表达情况。结果发现:低压低氧能够诱导小鼠脑含水量、脑组织中H_2O_2、NO和MDA含量以及LDH活性显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性显著减低,Nrf2和HO-1蛋白表达增强。经黄芩素-7-甲醚预处理后能够显著降低高原缺氧小鼠脑组织中H_2O_2、MDA和NO含量以及LDH活性,提高抗氧化酶的活性,同时进一步增加Nrf2和HO-1蛋白的表达。以上结果表明:黄芩素-7-甲醚能够缓解高原缺氧导致脑组织氧化应激损伤,作用机制可能与清除自由基,激活Nrf2/ARE/HO-1信号途径,提高抗氧化酶活性有关。

黄芩素-7-甲醚对缺氧致PC12细胞损伤的保护作用

目的研究黄芩素-7-甲醚对缺氧PC12细胞的保护作用。方法将PC12细胞分为正常对照组、缺氧模型组、芦丁组和黄芩素-7-甲醚组,培养24 h后,MTT法检测黄芩素-7-甲醚对细胞活力的影响;酶标仪法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性以及细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)水平;2′,7′-二氯荧光素探针法检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;实时荧光定量PCR和Western blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA和蛋白的表达。结果与正常对照组相比,缺氧导致PC12细胞活力显著降低,LDH、MDA和ROS水平显著升高,抗氧化酶SOD和CAT的活力显著降低。黄芩素-7-甲醚预处理能够逆转这些变化。此外,缺氧能够诱导细胞内Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达增加,而黄芩素-7-甲醚能够进一步提高Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达。结论黄芩素-7-甲醚对缺氧致PC12细胞损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1通路,抑制氧化应激损伤有关。

不同地区香薷各部位总黄酮及游离黄酮的分析研究

目的测定不同地区香薷各部位总黄酮和游离黄酮的含有量,找出含黄酮量较高的药材产地和黄酮的主要储存部位。方法以紫外可见分光光度法(UV-Vis)测定香薷总黄酮,最适条件是0.05 mol/L三氯化铝,pH值为5.0的乙酸缓冲液,水浴温度50℃,水浴时间30 min,检测波长420 nm。采用反相高效液相色谱法测定3种主要游离黄酮,色谱柱为Welchrom TM C18(200 mm×4.6 mm,5μm),以0.4%磷酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长350 nm;柱温25℃。结果木犀草素、芹菜素和黄芩素-7-甲醚分别在0.88～176μg/mL、1.1～219.2μg/mL和1.55～149.4μg/mL范围内表现出良好的线性(r>0.999);方法的回收率在98.80%～102.01%之间,RSD均小于5%,精密度和稳定性良好。以江西和湖北产的香薷总黄酮含有量较高,其全草中总黄酮的质量分数分别为5 955.35μg/g和4 362.28μg/g,特别是江西和湖北产香薷花苞中总黄酮的质量分数分别高达13 335.99μg/g和12 936.46μg/g。结论不同地区香薷总黄酮含有量由高到低依次为江西、湖北、河南、浙江,不同部位总黄酮的含有量由高到低依次为苞、尖、茎、根。江西产香薷的总黄酮和3种主要游离黄酮的量均较高,且主要集中在茎以上部位。

中药香薷不同部位总黄酮及3种主要黄酮成分含量分析

中药材中活性成分的含量是中药品质优劣的关键指标。本文建立了香薷中总黄酮和3种主要黄酮的分析方法,探索不同部位黄酮含量的差异,为香薷黄酮类成分的开发利用奠定基础。结果表明优化后的分光光度法对香薷总黄酮测定具有专一性、稳定性。高效液相色谱测定木犀草素、芹菜素和黄芩素-7-甲醚的方法在测定范围内表现出良好的线性关系(r>0.999);方法的回收率在98.77%～102.13%之间,RSD均小于5%;不同部位总黄酮的含量由高到低依次为:苞>尖>茎>根,且江西产香薷总黄酮的含量高于浙江产的香薷。这提示在工业生产上提取香薷黄酮类物质时尽量选择道地药材,同时可考虑弃去根部及茎的下端,以便提高浸提效率,增加经济效益。本试验建立的香薷中总黄酮和游离黄酮的测定方法准确、稳定,明确了香薷中总黄酮主要富集在花苞及附近,为进一步提高香薷资源的开发利用提供了理论依据和科学指导。

平卧菊三七的化学成分研究(Ⅰ)

目的研究平卧菊三七Gynura procumbens全草的化学成分。方法利用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、中压柱色谱及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,通过NMR、MS等鉴定化合物结构。结果从平卧菊三七全草的70%乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为槲皮素（1）、芹菜素（2）、木犀草素（3）、山柰酚（4）、黄芪苷（5）、山柰酚-5-O-（6″-O-乙酰基）-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）、7-甲醚黄芩素（7）、4-甲氧基肉桂酸（8）、苄基葡萄糖苷（9）、2-苯乙基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（10）、3,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（11）、3,5-二咖啡酰基奎宁酸乙酯（12）、3,4-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（13）、4,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（14）、原儿茶酸（15）和丁香酚苷（16）。结论化合物7、8、12、14和16为首次从菊三七属植物中分离得到,化合物3、6、9~11和13为首次从该植物中分离得到。

香薷HPLC指纹图谱及多指标成分定量分析

目的:建立香薷的HPLC指纹图谱及其咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、黄芩素-7-甲醚、香荆芥酚、麝香草酚7个成分的HPLC含量测定方法。方法:采用Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~17 min,12%B→20%B;17~30 min,20%B→30%B;30~40 min,30%B→45%B;40~55 min,45%B→54%B),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为280、330 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。结果:建立了香薷HPLC指纹图谱,共确定了14个共有峰,并指认其中5个共有峰,分别为咖啡酸(5号峰)、迷迭香酸(10号峰)、黄芩素-7-甲醚(12号峰)、香荆芥酚(13号峰)、麝香草酚(14号峰),17批香薷样品的相似度均>0.910;对17批药材中指认的7个成分进行含量测定,其质量浓度分别在1.04~52.0μg·mL^(-1)(r=0.9993,n=5)、6.0~300.0μg·mL^(-1)(r=0.9995,n=5)、0.12~5.88μg·mL^(-1)(r=0.9994,n=5)、0.12~5.84μg·mL^(-1)(r=0.9998,n=5)、2.42~120.8μg·mL^(-1)(r=0.9998,n=5)、2.24~112.0μg·mL^(-1)(r=0.9995,n=5)、10.2~510.0μg·mL^(-1)(r=0.9995,n=5)范围内线性关系良好,平均回收率为104.3%~97.2%,RSD为0.18%~2.2%;17批样品中咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、黄芩素-7-甲醚、香荆芥酚、麝香草酚含量范围分别为0.442~1.028、1.222~9.727、0.017~0.093、0.016~0.070、0.279~1.013、0.0659~1.673、5.007~9.293 mg·g^(-1)。结论:该方法操作简便、可靠,重复性好,能同时测定7个成分的含量,为有效控制香薷质量提供了更加全面的依据。