电针和7-硝基吲唑对癫痫的效应及其与脑内一氧化氮的关系

为进一步探索NO在癫痫诱导和发作以及针刺抗痫中的作用，本文采用特异性nNOS阻断剂7-硝基吲唑（7－NI）观察NO合成减少时青霉素致痫的诱导和发作的变化，并使用NO敏感电极实时连续记录青霉素致痫及穴位针刺和注射7-NI时大鼠海马内NO的变化。结果表明，癫痫使发作脑电总功率剧烈升高。穴位针刺后发作明显减弱，各时间点脑电总功率与青霉素注射时有显著差别。7-NI使诱发时间缩短，阈值降低，但发作程度减轻，在各时间点脑电总功率均低于对照组。癫痫发作时海马内NO浓度明显升高，注射7-NI和穴位针刺均使NO浓度减低。结果提示，神经源性NOS可增强癫痫的发作，但延长其诱导期。穴位针刺可能通过降低nNOS水平，减少NO的生成而抑制癫痫发作。

nNOS选择性拮抗剂7-硝基吲唑促进成年小鼠脑缺血后神经元再生

目的研究nNOS选择性拮抗剂7-硝基吲唑对脑缺血后神经元再生的影响。方法大脑中动脉阻塞法制备局灶性脑缺血/再灌注模型。腹腔注射7-硝基吲唑(30 mg.kg-1)。B rdU、NeuN标记法测定海马齿状回的细胞扩增及新生细胞的分化,跳台实验法测定动物的学习记忆能力。结果在脑缺血后d 8缺血侧海马齿状回的B rdU阳性细胞数比对照侧多大约3倍,7-硝基吲唑进一步促进了脑缺血所诱发的海马齿状回神经细胞扩增,并促进新生细胞的存活,改善脑缺血小鼠的学习记忆功能。结论nNOS对脑缺血诱发的海马齿状回神经元再生有重要作用。

7-硝基吲唑对缺氧缺血新生大鼠海马CA_1区神经元凋亡的影响

目的 探讨选择性一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂 7 硝基吲唑 (7 NI)对缺氧缺血新生大鼠海马CA1区神经元凋亡的影响。方法 7日龄Wistar大鼠 72只 ,随机分成 3组 ,(1)假手术组 :12只 ,仅作颈正中切口 ,不作颈总动脉结扎 ;(2 )观察组 (7 NI组 ) :30只 ,缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)模型制作后即刻腹腔内注射 7 NI 2 5mg/kg ;(3)对照组 (生理盐水组 ) :30只 ,HIBD后即刻腹腔注射等体积的生理盐水。假手术组于手术后即刻 ,观察组、对照组于处置后 4 8小时断头取脑 ,分别进行HE和TUNEL染色 ,光镜下检测脑细胞凋亡数。结果 HE染色对照组大鼠海马CA1区可见典型的凋亡细胞 ,表现为细胞固缩 ,胞浆深染 ,核浓缩、碎片 ,核浆分布不清 ,有凋亡小体形成 ;7 NI组上述凋亡细胞明显减少 ;TUNEL染色对照组阳性细胞数与 7 NI组比较差异有极显著性 (P <0 .0 1)。结论 7

7-硝基吲唑对椎基底动脉脑缺血豚鼠ABR及耳蜗核nNOS活性的影响

目的 :探讨脑干耳蜗核缺血后听力损失情况 ,以及神经元型一氧化氮合酶 (neuronalnitricoxidesynthase)及其选择性抑制剂 7 硝基吲唑 (7 nitroindazole,7 NI)在缺血中的作用。方法 :随机将 50只耳廓反射灵敏的健康花色豚鼠分为 4组 :①正常对照组 ,②假手术组 ,③缺血组 ,④用药组。通过结扎一侧颈总动脉 ,阻断基底动脉 ,建立豚鼠椎基底动脉脑缺血的动物模型。用药组动物在缺血前 5min腹腔注射 7 NI,观察每组动物ABR及单位面积耳蜗核内nNOS阳性神经元的变化。结果 :与对照组比较 ,缺血 1 5min ,30min,60min和 1 2 0minABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期均显著延长 ,阈值提高 (P <0 .0 5)。用药组ABR各测试参量在相应缺血时间段内较单纯缺血组明显缩短或降低 (P <0 .0 5)。与对照组比较 ,nNOS阳性神经元数量在缺血后 1 5min即明显升高 ,缺血 30min达到高峰 ,60～ 1 2 0min基本恢复正常 ,而用药组各时间段nNOS阳性神经元数量与对照组比较 ,差异无统计学意义。结论 :nNOS主要参与耳蜗核缺血早期的病理性损伤 ,是造成循环障碍性听力下降的重要因素之一。 7 NI可选择性地抑制nNOS的活性 。

7-硝基吲唑在脑缺血再灌流中的保护作用机制

综述了具有高度选择性的神经元型一氧化氮合酶抑制剂 (nNOSI) 7 硝基吲唑的特性和其在脑缺血再灌流中的保护作用机制 。

7-硝基吲唑对大鼠创伤性脑损伤早期脑水肿的影响

采用落体法大鼠创伤性脑损伤(TBI)动物模型,观察特异性神经元型一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂7-硝基吲唑(7-NI)对TBI早期脑水肿和病理变化的影响。结果发现7-NI能显著减少脑组织含水量和脑组织中Na+含量(P均<0.05)、增加K+含量(P<0.05),并能改善脑创伤后的病理变化。7-NI的作用可被L-精氨酸逆转。提示nNOS来源的一氧化氮(NO)对TBI早期有毒性作用,nNOS抑制剂可治疗继发性脑损伤。

7-硝基吲唑在烟雾吸入性肺损伤中的作用

目的 探讨神经型一氧化氮合酶（nNOS）抑制剂7-硝基吲唑（7-NI）在烟雾吸入性肺损伤中的作用。方法 40只SD雄性大鼠被随机分为正常对照组（n=8）、烟雾吸入性肺损伤模型组（n=16）和7-NI治疗组（n=16），建立烟雾吸入性肺损伤模型。7-NI治疗组在致伤后立即腹腔注射7-NI 20mg／kg（溶于2ml花生油中）；正常对照组及模型组腹腔注射2ml花生油。分别于伤后2、6、12和24h时间点监测动脉血气分析；并分批处死大鼠，取肺组织测肺含水量，制备肺组织匀浆检测超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、各型一氧化氮合酶（NOS）活性及肿瘤坏死因子-α（TNF—α）和一氧化氮（NO）含量。光镜下观察肺组织病理学变化。结果 与模型组比较，7～NI治疗组各时间点动脉血氧分压均显著升高（P均〈0．05），肺组织含水量显著降低（P〈0．05），肺组织中SOD及CAT活性均明显升高（P均〈0．05），nNOS活性及NO含量均明显降低（P均〈0．05）。治疗组2h和6h肺组织中TNF—α含量均较模型组降低（P均〈0．05）。光镜下7-NI治疗组较模型组损伤程度减轻，炎性细胞浸润减少，肺间质内未见点状出血。结论 7-NI对烟雾吸人性肺损伤有较好的保护作用，可提高动脉血氧分压，减轻肺水肿程度，增加组织抗氧化能力，并减轻组织炎性细胞浸润。

7-硝基吲唑对大鼠脑缺血再灌流保护作用的研究

目的 :探讨神经元型一氧化氮合酶抑制剂 (nNOSI) 7-硝基吲唑 (7-nitroindazole ,7-NI)对脑缺血再灌流保护作用的机理。方法 :选用体重 180～ 2 2 0 g的雌性Wistar大鼠 ,随机分组 ,左颈外动脉管腔内置渔线经颈内动脉送至大脑中动脉内 ,使之闭塞。 1h后拔出栓子 ,再灌流 0 5h到 2h。于再灌流前治疗组给予 7-NI(5 0mg kg) ,对照组和假手术组给予花生油 5ml kg ,根据再灌流不同时相 (0 5h ,1h ,2h)再分 3个亚组。缺血再灌流期间定时测定脑匀浆NOS活性和MDA含量 ,用嗜银Ⅲ染色法作光镜病理检查。结果 :再灌流后不同时相 ,7-NI组NOS活性、MDA含量均明显低于单纯缺血再灌流对照组 (P <0 0 5 ) ;光镜检查发现 7-NI组顶页皮质早期变性的神经元数在各时相也均低于相应的对照组 (P <0 0 5 )。结论 :于大鼠大脑中动脉闭塞 1h给予 7-NI(5 0mg kg)后再灌流 0 5h到 2h ,7-NI有如下影响 :抑制NOS活性 ;降低MDA含量 ;减轻光镜下病理的异常变化。证明

7-硝基吲唑对大鼠局灶脑缺血急性期部分微观病理的初探

目的:研究7-硝基吲唑(7-NI)对大鼠局灶脑缺血急性期微观病理改变。方法:线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,观察对照组和治疗组某些指标的变化。结果7-硝基吲唑可减少缺血脑组织变性及坏死神经细胞。结论 从微观病理角度证实7-硝基吲唑对大鼠局灶脑缺血有保护作用。

7-硝基吲唑对兔异丙酚麻醉深度调节的研究

目的:研究7-硝基吲唑(7-nitro indazolei,,7-NI)对兔异丙酚麻醉深度的调节作用。方法:20只日本大耳兔,雌雄不限,随机分为2组(n=10):对照组经腹腔注射2 ml花生油;7-硝基吲唑组经腹腔注射50 mg·kg-17-硝基吲唑。20 min后经颈外静脉连接Graseby 3 500注射泵进行靶控输注(TCI),以咀嚼反射消失作为浅麻醉标志,测定达浅麻醉状态所需异丙酚TCI血药浓度、双频指数(BIS)值及心率变异指数(HRVI)值。对照组达浅麻醉状态后再次经腹腔注射50 mg·kg-17-硝基吲唑,观察BIS值、HR-VI值变化。结果:50 mg·kg-17-硝基吲唑显著降低兔达浅麻醉状态时所需TCI浓度。对照组达浅麻醉状态后再次注射50 mg·kg-17-硝基吲唑麻醉深度表现加深趋势,但无显著的统计学意义(P>0.05)。结论:7-硝基吲唑通过选择性抑制中枢nNOS活性增强异丙酚麻醉效能,提示中枢NO／cGMP信号转导途径在异丙酚全麻作用机制中发挥作用。异丙酚可能通过抑制中枢nNOS活性影响NO／cGMP信号转导系统。

7-硝基吲唑对深低温停循环大鼠的脑保护作用

目的:探讨神经元型一氧化氮合酶(nNOS)在深低温停循环(deep hypothermic circulatory arrest,DHCA)大鼠中的脑损伤作用。方法:154只健康SD大鼠随机分为4组:假手术组、DHCA组、7-硝基吲唑(7-NI)组和花生油组,后3组再分为DHCA术后2,6,12和24 h 4个亚组。假手术组与24 h亚组各16只大鼠,其余亚组各10只大鼠,冰块包埋体温降至21℃时阻断双侧颈总动脉建立DHCA模型。观察特异性nNOS抑制剂7-NI对脑水肿,脑组织光镜、电镜结构和脑组织丙二醛含量的影响。结果:与DHCA组相比,7-NI能减轻脑水肿(P<0.05),改善脑细胞形态,并能降低丙二醛含量(P<0.05)。结论:nNOS在DHCA脑损伤中起细胞毒性作用,7-NI有希望延长DHCA安全时限。

7-硝基吲唑对大鼠局部脑缺血急性期保护作用的研究

目的 研究 7-硝基吲唑在鼠脑局灶缺血中的保护作用。方法 线拴法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型 ,观察应用 7-硝基吲唑前后鼠多项指标变化规律。结果 7-硝基吲唑的适宜剂量为 5 0 m g/kg,可显著抑制 n NOS活性 ,减少脑含水量及梗死体积 ,但对神经功能缺损改善无显效。结论

7-硝基吲唑对大鼠大脑皮质离子型谷氨酸受体和GABA_A受体的影响

目的 探讨一氧化氮 (NO)对大鼠脑皮质离子型谷氨酸受体 (NMDA、AMPA、KA受体 )和 GABA受体的影响。 方法 将 Wistar大鼠腹腔注射神经细胞结构型一氧化氮合酶抑制剂 7-硝基吲唑 ,以氚标配体分别标记 NMDA、AMPA、KA和 GABAA 受体 ,用图像分析仪对大鼠额区、顶区、后肢区、梨状区、压部后区和味觉区皮质内标记受体进行定量分析。 结果 实验组大鼠额区、后肢区和梨状区内 NMDA、AMPA、KA受体和 GABAA 受体含量均显著增加 ;顶区皮质内 NMDA、KA受体和 GABAA 受体增加显著 ;味觉区皮质内 KA受体增加显著。 结论 NO可能参与大鼠脑皮质离子型谷氨酸受体和

7-硝基吲唑对大鼠创伤性脑损伤早期脑水肿的影响

目的:探讨神经元型一氧化氮合酶(nNO S)在创伤性脑损伤(TB I)中的作用。方法:采用落体法大鼠TB I动物模型,观察特异性nNO S抑制剂7-硝基吲唑(7-N I)对TB I早期脑水肿和病理变化的影响。结果:与伤后6 h组相比,7-N I能显著减少脑组织含水量和脑组织中N a+的含量(P值均<0.05),而增加K+的含量(P<0.05),并能改善脑创伤后的病理变化。7-N I的作用可被L-精氨酸逆转,D-精氨酸无效。结论:nNO S来源的一氧化氮对TB I早期起毒性作用,nNO S抑制剂有可能成为治疗继发性脑损伤的新途径。

选择性神经元型一氧化氮合酶抑制剂7-硝基吲唑的药理学研究进展

7-硝基吲唑 ( 7 NI)是近年来发现的一种选择性神经元型一氧化氮合酶 ( n NOS)抑制剂 ,在体内它对另外两种 NOS亚型 ( e NOS和 i NOS)作用较弱。在分子水平上 ,7 NI作用于 NOS的血红素和四氢叶酸结合部位。 7 NI的药理学和实验治疗学研究表明 ,7 NI较其他非选择性 NOS抑制剂更具有优越性 ,对脑缺血、帕金森症和吗啡戒断症状等病变显示一定的治疗效果。选择性 n NOS抑制剂有望用于临床治疗某些与 NO神经毒性有关的病变。

背根神经节微量注射7-硝基吲唑抑制炎症性疼痛

目的:观察完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导炎症性疼痛的现象,并探究背根神经节(DRG)部位注射神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)抑制剂7-硝基吲唑(7-nitroindazole,7-NI)对于炎症性疼痛是否有镇痛作用并简要探讨其镇痛机制。方法:小鼠足底注射10μl CFA诱导炎症性疼痛动物模型,使用von Frey纤维丝采用up-and-down的方法测定小鼠的50%足底回缩阈值(50%paw withdrawal threshold,50%PWT)作为痛觉行为学的评价指标。在小鼠的背根神经节部位微量注射10μg 7-NI观察50%PWT的变化情况。用免疫印迹的方法观察炎症相关的降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)在CFA诱导模型后、造模后给予7-NI和nNOS基因敲除小鼠造模后的表达情况。结果:与DMSO组相比,7-NI组造模后2～12 h 50%PWT显著升高。观察到CGRP的表达量在CFA诱导后增加,而在给予7-NI和nNOS基因敲除组内CGRP的表达增加可以被逆转。结论:小鼠DRG部位注射7-NI对炎症性疼痛具有镇痛作用,且炎症性疼痛中CGRP表达量的增加可能是一氧化氮(nitric oxide,NO)在DRG内起疼痛敏感性作用的下游机制。

7-硝基吲唑对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨神经元型一氧氮合酶 (nNOS)在脑缺血中的作用。方法 采用栓线法制作大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型 ,观察特异性nNOS抑制剂 7-硝基吲唑 (7-NI)对脑梗死灶、脑水肿和超微结构的影响。结果 与脑缺血 再灌注组相比 ,7-NI能显著减小脑梗死灶和减轻脑水肿 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,减少脑组织中Na+ 的含量 ,但增加了K+ 的含量 (P <0 0 5 ,P <0 0 5 ) ,并改善缺血神经元的超微结构。结论 nNOS对急性局灶性脑缺血 再灌流损伤起毒性作用 。

7-硝基吲唑对创伤性颅脑损伤大鼠血清神经元特异性烯醇化酶和星形胶质源性蛋白的影响

目的探讨7-硝基吲唑(7-NI)对创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和星形胶质源性蛋白(S100β)水平的影响。方法健康成年SD大鼠160只随机均分为生理盐水处理组和7-NI处理组;每组又均分为假手术和TBI后6、12和24h四小组。建立大鼠可控性皮质损伤模型。检测指标:血清NSE和S100β蛋白浓度,脑组织一氧化氮(NO)含量和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)活性,脑组织含水量,血-脑脊液屏障(BBB)通透性,脑组织丙二醛(MDA)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)含量。HE染色评价脑损伤严重程度。结果随TBI后时间推移,两组大鼠TBI后血清NSE和S100β蛋白浓度、脑组织NO含量和nNOS活性、脑组织含水量、BBB通透性和MDA含量均较假手术组增高(P<0.05),脑组织T-SOD含量下降(P<0.05),脑损伤逐步加重。在TBI后6h和12h,7-NI处理组血清NSE和S100β蛋白浓度、脑组织NO含量、脑组织nNOS、活性脑组织含水量、BBB通透性和MDA含量均低于生理盐水处理组(P<0.05);在伤后6h和12h,7-NI处理组脑组织T-SOD含量高于生理盐水处理组(P<0.05);在TBI后12h内,7-NI处理组脑损伤程度低于生理盐水处理组(P<0.05)。结论 TBI后早期应用7-NI可以减轻脑组织水肿,降低BBB通透性,减少脑组织氧化应激。血清NSE和S100β蛋白浓度可以反映7-NI的治疗效果。

7-硝基吲唑对氟致SH-SY5Y细胞凋亡及一氧化氮合成酶含量的影响

目的探讨神经元型一氧化氮合成酶(nNOS)抑制剂7-硝基吲唑(7-nitroindazole,7-NI)对氟致体外培养细胞生长、凋亡保护作用的机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,在培养液中加入不同浓度Na F(0、0.02、0.2、2.0、4.0 mmol/L),分别培养24、48、72 h,同时在各组细胞培养液中联合应用7-NI(10^(-4)、10^(-3)、10^(-2) mmol/L);于倒置显微镜下观察细胞生长,以CCK-8试剂盒方法检测细胞存活率,以比色法和硝酸还原酶法测定细胞培养液中NO含量及NOS活力,以流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果与对照组比较,氟浓度为0.2 mmol/L(低氟组)和2.0 mmol/L(高氟组)时,24、48、72 h后细胞存活率分别下降至(83.76±1.04)%,(70.27±1.20)%,(54.40±0.98)%和(52.17±1.07)%,(40.60±1.11)%,(29.50±1.40)%。10^(-4)mmol/L 7-NI可刺激细胞增殖,24 h细胞存活率为(105.96±3.44)%;10^(-3) mmol/L 7-NI处理细胞24 h后的细胞存活率为(100±2.30)%;10^(-2) mmol/L 7-NI可使细胞存活率下降,24 h细胞存活率为(88.64±4.75)%。10^(-4)、10^(-3)、10^(-2) mmol/L 7-NI处理细胞24 h后细胞培养液中NO含量、NOS活力均降低,分别为(1.156±0.356)、(0.958±0.074)、(0.672±0.188)μmol/L和(0.403±0.089)、(0.398±0.010)、(0.103±0.076)U/ml。高剂量(10^(-2) mmol/L)7-NI组的SH-SY5Y细胞凋亡指数升高至(8.7±2.3)%,高于对照组(P<0.05);低剂量(10^(-4)、10^(-3) mmol/L)7-NI组的凋亡指数分别为(0.6±0.4)%和(1.0±0.2)%,与对照组差异无统计学意义(P>0.05);低剂量7-NI组凋亡指数低于高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。染氟24、48、72 h后细胞培养液中NO含量及NOS活力升高,低氟组的NO含量、NOS活力分别为(3.074±0.160)、(5.604±1.374)、(10.173±1.307)μmol/L和(0.743±0.122)、(0.959±0.054)、(1.446±0.12)U/ml,高氟组分别为(8.974±0.919)、(14.729±1.241)、(20.976±0.712)μmol/L和(1.086±0.024)、(1.728±0.130)、(2.583±0.192)U/ml,高于对照组[(1.320±0.280)、(2.420±0.658)、(2.867±0.662)μmol/L,(0.452±0.012)、(0.517±0.072)、(0.607±0.013)U/ml],差异有统计学意义(P<0.05)。与氟单独处理组相比,NaF联合应用7-NI后,各组NO含量及NOS活力均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,氟可使SH-SY5Y细胞凋亡指数升高,差异有统计学意义(P<0.01),并随着氟染毒剂量及时间的增加,细胞凋亡指数随之增加;联合应用7-NI后,各组细胞凋亡指数下降,差异有统计学意义(P<0.01)。氟可使SH-SY5Y细胞数量减少,形态变为圆形、不规则形,细胞存活率降低;低剂量(10^(-4)、10^(-3) mmol/L)7-NI组在相同视野下细胞数增加,高剂量(10^(-2) mmol/L)7-NI组细胞数明显减少,大部分细胞呈圆形或不规则形。结论氟中毒所致细胞凋亡可能与NOS活力和NO含量升高有关,7-NI可降低细胞凋亡指数。