基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体TaqMan检测方法的建立及其遗传演化分析

热休克蛋白70 (heat shock protein 70,Hsp70)是绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae, Movi)的重要膜蛋白,是机体内高度保守的生物分子,但在种间差异大,可作为分子生物学检测的候选靶区。为建立基于Hsp70基因的Movi通用型TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,并进一步了解其遗传变异情况,本研究基于GenBank中Movi的Hsp70基因特征,设计特异性的引物及探针,建立了基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体qPCR检测方法。应用建立的检测方法对88份山羊鼻拭子样品及43份疑似羊支原体性肺炎(Mycoplasmal pneumonia of sheep and goats, MPSG)病料进行检测。将检测结果为Movi阳性的肺组织样品进行分离鉴定,并对分离株Hsp70基因进行序列分析。结果显示,建立的qPCR检测方法其相关系数为1.00,扩增效率为96.0%,斜率为-3.411,Y轴截距为37.29。特异性强,与丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri, Mmc)、山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae, Mccp)、莱氏无胆甾原体(Acholeplasmalaidlawii, AL)、无乳支原体(Mycoplasma agalactiae, Maga)、伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis, CP)、羊口疮病毒(orf virus, ORFV)、牛支原体(Mycoplasma bovis, Mb)等牛羊常见病原均无交叉反应;敏感性高,最低检测限为5.72 copies·μL^(-1);重复性优,组内变异系数和组间变异系数均小于1.00%。6株Movi分离株Hsp70基因全长均为1 818 bp,与其它Movi参考株核苷酸和氨基酸同源性分别为96.0%~99.4%和98.0%~100.0%;进一步分析发现,山羊源Movi均比绵羊源多1个N-糖基化位点。遗传演化分析表明,其均处于ClusterⅠA亚分支(均为山羊源)。综上,本研究建立了特异性强、敏感性高、重复性优的基于Hsp70基因的Movi的qPCR检测方法。序列分析发现,不同来源Movi的Hsp70基因核苷酸同源性高;遗传演化分析证实,Movi福建株与山羊源分离株遗传关系较近。本研究不仅为Movi临床诊断提供了技术支持,更为进一步了解Movi遗传演化规律提供参考。

老年糖尿病合并肺部感染患者病原菌分布及血清HSP70、HMGB1水平与病情严重程度和预后的关系

目的探讨老年糖尿病合并肺部感染患者病原菌分布情况,分析血清热休克蛋白70(HSP70)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平与病情严重程度和预后的关系。方法选择2021年1月—2023年11月西安交通大学第一附属医院呼吸内科与危重症医学科收治的2型糖尿病(T2DM)合并肺部感染患者253例为研究对象,根据出院时预后情况分为预后良好组(n=191)和预后不良组(n=62)。鉴定患者痰液中病原菌并检测血清HSP70和HMGB1水平;采用多因素Logistic回归分析老年T2DM合并肺部感染预后的影响因素;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清HSP70和HMGB1水平对老年T2DM合并肺部感染预后的预测价值。结果预后不良组患者年龄、空腹血糖(FPG)、高血压、慢性阻塞性肺疾病(COPD)及病情重度占比显著高于预后良好组(t/χ^(2)/P=6.251/<0.001、14.949/<0.001、4.666/0.031、5.827/0.016、16.530/<0.001)。253例患者痰标本中共检出病原菌株298株,其中革兰阴性菌占比65.10%(194/298)、革兰阳性菌占比28.86%(86/298)、真菌占比6.04%(18/298)。预后不良组血清HSP70和HMGB1水平明显高于预后良好组(t=11.672、13.069,P均<0.001)。血清HSP70和HMGB1水平比较,重度>中度>轻度患者(F=54.146、231.257,P均<0.001);多因素Logistic回归显示,年龄大、HSP70高、HMGB1高、FPG高、COPD及严重程度重均为老年T2DM合并肺部感染预后的危险因素[OR(95%CI)=1.322(1.015~1.722)、1.993(1.336~2.973)、1.754(1.302~2.363)、1.876(1.401~2.512)、3.016(1.798~5.060)、3.956(2.208~7.718)];血清HSP70、HMGB1及二者联合预测老年T2DM合并肺部感染预后的曲线下面积(AUC)分别为0.785、0.772、0.897,二者联合优于各自单独预测效能(Z=3.452、3.297,P均<0.001)。结论血清HSP70、HMGB1水平与老年T2DM合并肺部感染严重程度和预后密切相关,二者联合对其预后具有较高预测价值。

超重/肥胖合并2型糖尿病患者血清ANGPTL4、HSP70、IL-34水平与胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨超重/肥胖合并2型糖尿病(T2DM)患者血清血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、热休克蛋白(HSP)70、白细胞介素-34(IL-34)水平与胰岛素抵抗的相关性。方法 选取2020年5月—2022年5月保定市第一中心医院T2DM患者182例(T2DM组)。参考相关诊断标准,将T2DM患者分为超重/肥胖T2DM组(90例)和体重正常T2DM组(92例)。另选取同期健康体检者90名作为正常对照组,其中超重/肥胖者40名(超重/肥胖对照组)、体重正常者50名(体重正常对照组)。检测所有研究对象血清ANGPTL4、HSP70、IL-34、胰岛素和血糖水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。T2DM患者治疗3个月后,再次检测其血清ANGPTL4、HSP70、IL-34水平和HOMA-IR。采用Pearson相关分析评估血清ANGPTL4、HSP70、IL-34与HOMA-IR的相关性。结果 与正常对照组和体重正常T2DM组比较,超重/肥胖T2DM组血清ANGPTL4和HSP70显著降低(P<0.05),血清IL-34和HOMA-IR显著升高(P<0.05)。与正常对照组比较,体重正常T2DM组血清ANGPTL4和HSP70显著降低(P<0.05),血清IL-34和HOMA-IR显著升高(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清ANGPTL4、HSP70与HOMA-IR呈负相关(r值分别为-0.733、-0.758,P<0.001),IL-34和HOMA-IR呈正相关(r=0.705,P<0.001)。治疗后,超重/肥胖T2DM组和体重正常T2DM组血清ANGPTL4和HSP70均明显升高,血清IL-34和HOMA-IR明显降低;且相对于超重/肥胖T2DM组,体重正常T2DM组血清ANGPTL4和HSP70升高更显著(P<0.05),血清IL-34和HOMA-IR降低更显著(P<0.05)。结论 超重/肥胖合并T2DM患者ANGPTL4、HSP70和IL-34与胰岛素抵抗显著相关,或可作为超重/肥胖合并T2DM的疗效监测指标。

血清HSP60、HSP70水平与原发性免疫性血小板减少症患儿Th17/Treg细胞和预后的关系

目的分析血清热休克蛋白60(HSP60)、热休克蛋白70(HSP70)与原发性免疫性血小板减少症(ITP)患儿辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)和预后的关系。方法选取2020年6月—2022年6月保山市人民医院儿科诊治的ITP患儿128例作为病例组,另选同期体检健康儿童60例作为健康对照组。检测并比较2组血清HSP60、HSP70与Th17/Treg细胞水平。Pearson法分析血清HSP60、HSP70与Th17/Treg细胞的相关性。ITP患儿出院后随访1年,根据不同预后情况分为预后良好亚组(107例)和预后不良亚组(21例)。收集ITP患儿的临床资料,采用单因素、多因素Logistic回归模型分析ITP患儿预后的影响因素,并构建风险预测列线图模型。建立受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HSP60、HSP70与Th17/Treg细胞对ITP患儿预后的预测价值。结果病例组血清HSP60、HSP70水平及Th17/Treg细胞显著高于健康对照组(t/Z/P=20.445/<0.001、17.467/<0.001、5.823/<0.001)。Pearson相关分析显示,血清HSP60、HSP70与Th17/Treg细胞呈正相关(r/P=0.417/<0.001、0.348/<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,HSP60高、HSP70高、Th17/Treg高为ITP患儿预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=1.177(1.041~1.331),1.181(1.038~1.343),9.895(2.171~68.177)],初诊时PLT计数偏高则为保护因素[OR(95%CI)=0.848(0.726~0.990)]。ROC曲线分析结果显示,初诊时PLT、HSP60、HSP70、Th17/Treg水平及列线图模型的曲线AUC分别为0.793、0.730、0.787、0.840、0.975;Bootstrap法(B=1000)对列线图模型进行内部验证显示,Bias-corrected预测曲线与Ideal线基本重合,该模型预测能力较好。决策曲线显示,该模型的阈值概率范围为0.01~0.98,其净收益率>0,高于两条无效线。结论IPT患儿血清HSP60、HSP70、Th17/Treg水平均明显升高,血清HSP60、HSP70与Th17/Treg呈显著正相关。初诊时PLT、HSP60、HSP70、Th17/Treg水平是ITP患儿预后不良的影响因素,且基于HSP60、HSP70等独立危险因素构建的列线图模型对ITP患儿预后不良具有较好的预测价值。

油桐HSP70基因家族的全基因组鉴定与表达分析

为探究油桐HSP70基因的功能和进化关系,本研究对HSP70基因家族成员进行了生物信息学鉴定和分析,包括理化性质、进化关系、基因结构、保守基序及染色体定位。同时分析了HSP70基因家族成员在不同组织中的表达差异。结果表明,油桐HSP70基因家族包含24个家族成员,24个HSP70蛋白的理论等电点为4.57~8.70,且大部分属于稳定的、亲水性蛋白质,系统进化树分析结果表明HSP70家族成员分为5个聚类,油桐与毛果杨亲缘关系较近。24个VfHSP70蛋白氨基酸序列都包含HSP70保守结构域。22条HSP70基因分布在10条染色体上。分析不同时空的VfHSP70基因的表达量发现,VfHSP70-5在开花前30 d、开花前25 d、开花前10 d的花蕾中表达量均较高。VfHSP70-4在油桐根、茎、叶和种子中均有较高表达量。以上结果表明,VfHSP70基因可能在调控油桐生长发育中具有重要作用。

草莓FaWRKY70基因克隆与表达模式分析

【目的】WRKY是植物特异性转录因子家族之一,参与植物多种生命活动,但在草莓中鲜见WRKY70相关报道。深入解析WRKY70同源基因在草莓响应胁迫过程中的作用,加快分子育种技术应用,培育新草莓种质资源。【方法】用同源克隆法从‘红颜’草莓果实中克隆得到FaWRKY70基因,用生物信息学分析其保守结构域、理化性质、蛋白质结构及进化关系等,并结合qRT-PCR数据进行表达模式分析。【结果】FaWRKY70基因全长1020 bp,编码339个氨基酸;同源基因比对发现,FaWRKY70与苹果、牡丹等同科物种氨基酸序列相似度较高,且同源基因多与植物对生物、非生物胁迫响应相关,暗示FaWRKY70可能参与草莓抵御胁迫的过程;FaWRKY70在草莓不同器官中均有表达,且差异显著,在花中表达量最高,在果实中最低;水杨酸处理后,FaWRKY70基因快速响应,表达量在3 h后达到最高,随后逐渐降低;茉莉酸甲酯处理后FaWRKY70基因受诱导响应程度小,整体呈下调趋势。【结论】FaWRKY70能通过不同响应方式参与草莓生命活动及激素信号转导过程。

和平解放70年来西藏体育科学研究概况与历程回顾

综合运用专家访谈、文献资料、历史研究等方法对和平解放70年来西藏体育科学研究的发展概况与历程回顾进行了深入分析,旨在全面梳理和平解放以来西藏体育科学研究的发展概况与历程回顾,有助于人们正确认识西藏体育科学研究取得的辉煌成就和发展历程,并为今后从事西藏体育科学研究指明方向和提供参考意见。研究认为体育科学研究是西藏体育事业的重要组成部分,和平解放70年以来西藏体育科学研究取得了辉煌成就,在发文总量、图书出版以及项目获批等方面都取得了巨大成就。西藏体育科学研究经历了起步(1951-1977年)、缓慢(1978-1984年)、提升(1985-2000年)、蓬勃(2001-2011年)和繁荣(2012-至今)5个阶段。通过全面概括西藏体育科学研究发展概况,分析西藏体育科学研究历程,可以管窥今后西藏体育科学研究的发展趋势如下:(1)以满足广大西藏人民群众对美好体育生活的需求为出发点和落脚点,着重强化西藏体育优势领域的再研究和再探讨;(2)紧跟国家方针政策和国家发展需求,加强对国家宏观政策和国家社会发展理念中的西藏体育研究;(3)关注体育领域的热点问题,积极回应和阐释西藏体育发展中的关键问题、难点问题和重点问题;(4)重视西藏体育史研究,加强西藏体育回顾与展望研究。

磁场对X70管线钢电化学腐蚀行为的影响

为研究磁场对X70管线钢电化学腐蚀行为的影响以及磁场对在库尔勒土壤模拟溶液中浸泡后X70钢腐蚀行为的影响,利用电化学试验、浸泡试验和金相分析等手段,考察了不同磁场强度、不同磁场方向和有无产物膜时管线钢的电化学腐蚀行为。结果表明:随着磁场强度的增加,X70钢的腐蚀速率先增大后减小;改变磁场方向对X70钢的电化学腐蚀行为无明显影响。X70钢分别浸泡3、5 d后,2种情况下管线钢的腐蚀趋势是相同的,都是随着外加磁场的增加,腐蚀速率增大。X70钢表面有产物膜时的吸附电阻比无产物膜时的大,有产物膜时的腐蚀电流密度也较小,腐蚀程度较轻;而不同浸泡时间对腐蚀电流密度的影响不大。

雷公藤内酯醇通过调控miR-142-3p/HSP70通路抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探究雷公藤内酯醇(TP)通过miR-142-3p/HSP70信号通路对人乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的影响。方法:常规培养MCF-7细胞,将其分为6组:对照组、TP组、miR-142-3p inhibitor组、TP+inhibitor组、miR-142-3p mimic组和TP+mimic组,用转染试剂将相应的核酸或质粒转染MCF-7细胞。qPCR法、EdU细胞增殖实验、Transwell小室实验、细胞划痕实验、WB法分别检测转染后各组MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70 mRNA的表达,MCF-7细胞的增殖、侵袭、迁移能力和HSP70蛋白表达水平。结果:TP或miR-142-3p过表达能显著促进MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70的表达,敲减miR-142-3p则可明显抑制MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70的表达,TP可逆转由敲减miR-142-3p对MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70表达的影响;TP、过表达miR-142-3p均可明显抑制MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05),敲减miR-142-3p则均可促进MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05),TP可逆转由敲减miR-142-3p对MCF-7细胞恶性生物学行为的影响(均P<0.05)。结论:TP可通过调控miR-142-3p/HSP70信号通路,进而抑制MCF-7细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

非饱和粉质黏土中毛细作用对X70钢电化学腐蚀行为的影响

【目的】探究毛细作用对X70钢在土壤中腐蚀的规律。【方法】基于非饱和土与电化学阻抗谱理论,结合极化曲线技术(PC)、电化学阻抗技术(EIS)、扫描电子显微镜(SEM)等测试方法,在室内条件下通过一维土柱仪的模拟试验研究了粉质黏土中毛细作用对X70钢的电化学腐蚀行为。【结果】试验结果表明,毛细作用对X70钢的电化学腐蚀行为具有一定的影响,即在土柱12 cm、27 cm高度位置处的钢片腐蚀速率随埋置时间先增大后减小,在土柱42 cm、57 cm高度位置处的钢片腐蚀速率随埋置时间先减小后增大;毛细水在粉质黏土中的上升速率满足先快后慢的规律。【结论】X70钢片表面的腐蚀类型以点蚀为主,且腐蚀产物表面伴有较深较宽的裂缝,随着土样高度的增加,腐蚀程度降低,整体上腐蚀坑的大小和数目均呈现出减小趋势;毛细水上升过程中,当X70钢片处于固-液-气三相界面(TPB)时,其腐蚀速率最快,腐蚀程度最严重。

20世纪70年代上海第七印绸厂马王堆系列印花绸设计的考述与反思

此研究以20世纪70年代上海第七印绸厂设计、生产的马王堆系列印花绸为案例,通过对大量历史文献的检索和分析,客观、系统地阐述了此系列印花绸设计的历史背景、设计过程,对现代丝绸印花设计发展的影响和贡献,同时也探讨了其对今天如何运用传统文化资源进行创新设计的诸多启示与反思。

高速拉拔ER70S-6焊丝钢生产工艺优化

通过总结分析ER70S-6焊丝钢存在的质量问题,提出了有针对性的优化改进措施,重点对ER70S-6焊丝钢的化学成分范围、气体氮含量、尺寸精度、显微组织等关键指标严格控制,攻关后C、Si、Mn、N含量内控达标率提高,尺寸偏差C级精度得到改善,而且消除了混晶异常组织。用户拉拔使用结果表明,优化后的焊丝钢质量得到进一步的提高,可满足用户拉拔速度28 m/s以上高速拉拔的要求。

20世纪50—70年代诗歌中的干部书写

在20世纪50—70年代的诗歌中,干部成为一个常态化的书写对象。虽然其一般具有同质化的特征,但也根据题材、语境、视角的差异而分化出不同的意义形态。同时,部分带有逾越性的形象既丰富了干部的可能面向,也追问着干部形象在建构过程中存在的问题。在诗歌中,作为知识分子与工农兵关系的中介,干部形象呈现出聚合性、附加性与修辞性,这是其政治诗学路径的症结所在。

老年重症急性胰腺炎继发胰腺感染的病原菌分布及其与血清PCT、PA、FIB、HSP70和HMGB1的相关性

目的探讨老年重症急性胰腺炎继发胰腺感染患者的病原菌分布及其与血清降钙素原(PCT)、前白蛋白(PA)、纤维蛋白原(FIB)、热休克蛋白70(HSP70)、高迁徙率族蛋白1(HMGB1)水平的相关性。方法选择2019年1月至2022年12月东莞东华医院收治的62例老年重症急性胰腺炎患者作为研究对象,根据是否继发胰腺感染分为感染组20例和未感染组42例,另选择同期健康体检的80例健康者作为对照组。记录感染组患者病原菌分布情况,比较三组受试者及感染组不同病原菌感染类型患者的血清PCT、PA、FIB、HSP70和HMGB1水平,并采用Pearson相关性分析法分析血清PCT、PA、FIB、HSP70及HMGB1水平和胰腺感染的相关性。结果感染组患者病原菌感染类型主要为细菌感染,占90.00%,其中细菌感染类型中革兰阴性菌占55.00%,革兰阳性菌占35.00%;感染组患者血清PCT、HSP70、HMGB1水平分别为(2.49±0.53)μg/L、(9.12±1.86)ng/mL、(18.33±2.61)ng/mL,明显高于未感染组的(1.56±0.41)μg/L、(5.73±1.45)ng/mL、(13.62±2.47)ng/mL和对照组的(0.23±0.06)μg/L、(0.97±0.13)ng/mL、(0.73±0.15)ng/mL,PA、FIB分别为(0.17±0.02)g/L、(2.06±0.21)g/L,明显低于未感染组的(0.23±0.04)g/L、(2.75±0.30)g/L和对照组的(0.30±0.03)g/L、(3.23±0.36)g/L,且未感染组患者的血清PCT、HSP70、HMGB1水平均高于对照组,PA、FIB均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);感染组细菌感染患者的血清PCT、HSP70、HMGB1水平分别为(2.74±0.31)μg/L、(11.06±1.43)ng/mL、(20.68±2.05)ng/mL,明显高于真菌感染患者的(2.13±0.25)μg/L、(7.93±1.05)ng/mL、(16.27±1.76)ng/mL,PA、FIB水平分别为(0.11±0.02)g/L、(1.91±0.24)g/L,明显低于真菌感染患者的(0.17±0.04)g/L、(2.58±0.34)g/L,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析结果显示,血清PCT、HSP70、HMGB1与胰腺感染呈正相关(r=0.581、0.613、0.567,P<0.05),与PA、FIB呈负相关(r=-0.463、-0.531,P<0.05)。结论老年重症急性胰腺炎继发胰腺感染患者的病原菌类型主要为细菌感染,患者血清PCT、HSP70、HMGB1水平明显升高,PA、FIB明显降低,且与胰腺感染的发生有明显相关性,临床上应予以密切关注。

HSP70基因对B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞生物学功能的影响

为了研究热休克蛋白70(HSP70)基因对C57BL/6J-角膜混浊(B6-Co)小鼠眼睑成纤维细胞生物学功能的影响,本试验将前期研究并验证的siRNA-HSP70转染C57BL/6J(B6)小鼠眼睑成纤维细胞敲低HSP70基因,体外构建HSP70基因过表达载体转染B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞过表达HSP70基因,通过实时荧光定量PCR和Western blot验证转染效率;CCK8法检测B6和B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的增殖水平;Annexin V-FITC法检测B6和B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的凋亡水平,Transwell试验检测B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的迁移能力。结果显示,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞转染HSP70基因过表达载体后,HSP70在mRNA和蛋白水平的表达均极显著提高(P<0.01);siRNA-HSP70组B6小鼠成纤维细胞增殖水平极显著低于siRNA-NC组(P<0.01),凋亡水平显著高于siRNA-NC组(P<0.05或P<0.01);pcDNA3.1-HSP70质粒转染组B6-Co小鼠成纤维细胞增殖水平和细胞迁移能力均极显著高于pcDNA3.1-NC组(P<0.01),凋亡水平极显著低于pcDNA3.1-NC组(P<0.01)。结果表明,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞转染过表达质粒后,HSP70基因表达显著提高,并显著促进细胞增殖和迁移,抑制细胞凋亡;B6小鼠眼睑成纤维细胞中敲低HSP70基因表达后,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;故HSP70表达水平显著影响成纤维细胞的生物学行为。

子宫内膜癌患者血清YKL-40、HSP70、iNOS的水平及意义

目的分析子宫内膜癌(EC)患者血清甲壳质酶蛋白40(YKL-40)、热休克蛋白70(HSP70)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的水平及意义。方法选取2021年4月至2023年4月华北理工大学附属医院收治的116例EC患者作为EC组,另选取同期在华北理工大学附属医院治疗的子宫内膜增生患者116例作为子宫内膜增生组,并将同期在华北理工大学附属医院进行体检的体检健康者116例作为对照组。比较各组血清YKL-40、HSP70、iNOS水平;比较不同临床特征EC患者血清YKL-40、HSP70、iNOS水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清YKL-40、HSP70、iNOS水平对EC的诊断价值。采用多因素Logistic回归分析EC发生的影响因素。结果EC组患者血清YKL-40、HSP70、iNOS水平均高于对照组和子宫内膜增生组(P<0.05);对照组与子宫内膜增生组间血清YKL-40、HSP70、iNOS水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。FIGO分期Ⅲ+Ⅳ期、淋巴结转移、深层浸润、低分化的EC患者血清YKL-40、HSP70、iNOS水平均高于FIGO分期Ⅰ+Ⅱ期、淋巴结未转移、浅层浸润、高分化的EC患者(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,YKL-40、HSP70、iNOS单独及3项联合检测诊断EC的AUC分别为0.810(95%CI:0.754~0.867)、0.810(95%CI:0.754~0.866)、0.826(95%CI:0.771~0.881)、0.913(95%CI:0.877~0.950),3项联合检测诊断EC的AUC大于YKL-40、HSP70、iNOS单项检测诊断EC的AUC(Z=2.971,P=0.003;Z=2.971,P=0.003;Z=2.571,P=0.010)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清YKL-40、HSP70、iNOS水平升高均是EC发生的危险因素(P<0.05)。结论在EC患者中,血清YKL-40、HSP70、iNOS水平均明显升高,且与EC患者临床病理特征密切相关,有望成为筛查EC患者的血清标志物。

正高程差下边坡爆破对X70钢管振速的影响

为了探究正高程差边坡爆炸施工对邻近埋地管道振速的影响,基于商用有限元软件ANSYS/LS-DYNA采用数值模拟方法研究了炸药量相同(30 kg),正高程差不同(2.1、2.6、3.1、3.6、4.1、4.6和5.1 m)时,边坡爆破振动对既有X70管道振速的影响,并与平面地形结果作对比分析。研究表明:相较于平面地形,在水平距离不变的条件下,管道Y方向上会出现振速放大现象,且随着高程增大,振速加快衰减。管道振速放大系数随着高程差的增大呈现先增大后减小的趋势。当高程差为3.1 m时,管道迎爆面测点的振速放大系数最大,为1.998;当高程差为3.6 m时,管道背爆面测点的放大系数最大,为1.622。爆炸地震波在不同的介质界面发生折射和反射所形成的叠加效应以及在坡脚发生绕射,是产生高程放大效应的主要原因。

春尺蠖热激蛋白AcinHsp70基因的克隆、分子特性与表达分析

【目的】克隆春尺蠖热激蛋白Hsp70基因,分析其理化性质与表达情况,探究该基因在春尺蠖应对外界不利环境中的作用。【方法】基于前期所测转录组数据(春尺蠖幼虫不同低温胁迫),克隆获取Hsp70基因,命名为AcinHsp70(GenBank登录号:OP750249);利用生物信息分析软件对Hsp70基因的理化性质进行分析;采用qPCR技术检测AcinHsp70基因在不同温度(-10、-5、0、5和25℃)胁迫中回温与不回温及4℃不同时间处理下的表达谱。【结果】春尺蠖AcinHsp70基因完整CDS序列全长1899 bp,编码633个氨基酸,蛋白质预测分子量为69.91 kDa,预测等电点为5.51。在N端均不含信号肽且无跨膜区。磷酸位点检测分别发现丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸位点24、26和8个;未发现糖基化位点。该蛋白的平均亲水性为-0.507,预测不稳定系数为33.19,故该蛋白属于亲水稳定蛋白,亚细胞定位结果显示,其主要位于细胞质。序列一致性比对与系统进化树分析结果显示,春尺蠖与庆网蛱蝶(Melitaea cinxia)亲缘关系最近,序列一致性达92.91%。基因表达结果显示,不同温度(-10℃除外)胁迫下,AcinHsp70基因表达量均无明显差异,回温后表达量显著上调。AcinHsp70基因表达量总体呈先升后降趋势,在4℃处理1 h后表达量达到最大值。【结论】AcinHsp70基因与春尺蠖应对低温胁迫的响应密切相关,结果有助于揭示该基因在低温胁迫下的分子功能。

密度泛函理论研究富勒烯C_(70)对偏二甲肼与NO_(2)的抽氢反应机制

为了探讨富勒烯(C_(70))作为催化剂用于偏二甲肼(UDMH)推进剂分解的可行性,采用密度泛函理论(DFT)研究了UDMH分子与C_(70)团簇分子的相互作用,分析了UDMH在C_(70)表面的吸附行为及分解路径,计算获得了UDMH在C_(70)存在时发生抽氢反应的活化能和反应热。结果表明,UDMH分子在C_(70)表面表现为两种吸附构型,主要发生物理吸附且吸附能较小,C_(70)分子的加入并未改变UDMH分解的初始和次级反应位点,在与NO_(2)抽氢反应时表现为在NH _(2)基团上依次发生。与纯UDMH分解相比,A、B两种吸附构型中UDMH分解初始基元反应的反应活化能分别下降了19.4 kJ/mol、21.1 kJ/mol,反应热分别降低了24.2 kJ/mol和27 kJ/mol。因此,C_(70)对于UDMH分解的前两步反应具有催化能力,能够促进UDMH的分解。

Ku70作为RNA解旋酶调节miR-124的加工成熟及神经细胞的分化

目的Ku70蛋白主要通过其DNA结合特性参与双链DNA断裂(DSB)的非同源端连接(NHEJ)修复,有报道称其具有RNA结合功能,本文探索Ku70是否具有RNA解旋酶活性并影响miRNA加工成熟。方法利用RNA免疫共沉淀(RIP)测序结合生物信息学分析Ku蛋白结合的RNA;蛋白质印迹法(Western blot,WB)结合定量反转录PCR(qRTPCR)检测Ku蛋白与miRNAs的表达关系;生物膜干涉技术(BLI)实验分析Ku蛋白与RNA的结合能力;电泳迁移率变动分析(EMSA)实验确定Ku70及Ku80的RNA解旋酶活性;形态学检测结合WB分析Ku70调节miR-124引起的神经细胞功能变化;免疫荧光结合形态学分析寨卡病毒(ZIKV)感染后Ku70及miR-124的变化与神经元分化关联。结果研究发现,Ku70蛋白具有RNA解旋酶活性,并通过其RNA解旋酶活性影响miRNA加工成熟。Ku70缺失引起许多miRNAs上调,其中包括神经细胞特异的miR-124。在人神经前体细胞(h NPCs)和人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中敲低Ku70可促进miR-124的成熟,从而导致上述细胞向神经元分化。本文进一步发现,ZIKV感染影响了Ku70及miR-124的表达,导致细胞形态的分化。结论本研究揭示了Ku70的一种新功能,即Ku70有可能参与miRNA的成熟调控和神经细胞的分化,并且可能是ZIKV病毒致小头症的原因之一。