H_2S通过cAMP介导PI_3-K/Akt/P^(70S6K)通路抑制缺氧/复氧后神经元的凋亡

目的:研究H2S对缺氧/复氧后神经元存活信号转导通路PI3-K/Akt/P70S6K的影响。方法:取96孔和6孔培养板上培养7d的海马神经元,正常培养组(C组)神经元按正常培养方法培养。NaHS组在进行缺氧/复氧时加入NaHS使其终浓度为150μmol/L。Tri组、Rap组和Tri+Rap组在加入150μmol/LNaHS的同时分别加入triciribin10μmol/L、rapamycin10nmol/L或triciribin10μmol/L+rapamycin10nmol/L。96孔培养板的神经元进行细胞存活力的检测。6孔培养板的神经元进行神经元纯度鉴定、神经元凋亡、cAMP和PI3-K、Akt和P70S6K蛋白表达的检测。结果:NaHS显著增加了cAMP的浓度和PI3K、Akt、P70S6K蛋白的表达,同时增加了神经元存活率、降低了神经元凋亡率(P<0.01vsC组和A/R组)。Triciribin抑制了Akt和P70S6K表达同时降低了神经元存活率、升高了神经元凋亡率(P<0.05,P<0.01vsNaHS组)。Rapamycin抑制了P70S6K表达同时降低了神经元存活率、升高了神经元凋亡率(P<0.05,P<0.01vsNaHS组)。结论:H2S通过cAMP激活了PI3-K/Akt/P70S6K信号通路,抑制缺氧/复氧后海马神经元的凋亡。

低温胁迫对黄姑鱼(Nibea albiflora)抗氧化酶、Na^＋/-K^＋-ATP酶及Hsp70 蛋白含量的影响

为探讨低温处理对黄姑鱼幼鱼生理机能的影响,以18℃为对照组,设置8℃、10℃和14℃3个低温胁迫组,测定不同温度急性胁迫对黄姑鱼幼鱼(Nibea albiflora)超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、Na^+/-K^+-ATP酶活力以及热休克蛋白70(Hsp70)蛋白含量的影响。研究结果表明,低温胁迫组(8℃、10℃和14℃)的SOD和CAT酶活力随着胁迫温度的降低及其胁迫时间的延长呈先升高后降低的趋势,在72 h时恢复到对照组水平。肌肉中的Na^+/-K^+-ATP酶活力则随处理时间的延长呈现先降低后升高的趋势,10℃和14℃组能够在72 h时恢复到对照组水平,而8℃组则在72 h仍显著低于对照组。低温胁迫下黄姑鱼肌肉的Hsp70含量随着处理时间的延长呈先升高后降低趋势,10℃和14℃组能够在72 h时恢复到对照组水平,而8℃组则在72 h仍显著高于对照组。由此说明,SOD、CAT、Na^+/-K^+-ATP以及Hsp70蛋白参与了黄姑鱼低温胁迫应答过程,可以作为其低温胁迫应答的标志物。

mTOR/P70S6K信号通路在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨m TOR/P70S6K信号通路在宫颈癌组织中的表达水平及其相关临床诊断、治疗意义。方法收集2012年1月—2014年1月手术切除或进行活检的正常宫颈组织65例,宫颈癌组织、癌旁组织各85例,提取组织中的mRNA,应用RT-PCR的方法来检测3种组织中m TOR和P70S6K mRNA的表达水平,并进行分析。结果宫颈癌组织中m TOR、P70S6K mRNA的表达明显高于癌旁组织及正常组织(P<0.05),m TOR、P70S6K mRNA水平在宫颈癌组织、癌旁组织及正常组织中均呈正相关(P<0.05)。结论 m TOR信号通路在宫颈癌组织中处于活化状态,其在宫颈癌的发生发展以及向其他部位转移中具有重要作用,是一个诊断和治疗的分子靶点。

PI3K/Akt/mTOR/p70^(S6K)信号通路在肝纤维化发生发展中的作用

PI3K/Akt/m TOR/p70S6K是细胞生命活动的重要信号通路,在促进细胞生长、增殖、侵袭、抗凋亡及促进血管生成中具有重要作用。简述了PI3K/Akt/m TOR/p70S6K信号通路作用于肝星状细胞(HSC)而对肝纤维化发生发展产生的作用,分析表明阻断该信号通路中任一靶点均能抑制HSC活化、增殖,促进HSC凋亡,抑制HSC分泌细胞外基质和延缓肝纤维化进程,阻断该通路有望成为肝纤维化的治疗策略。

HSP70高表达对K_(562)细胞化疗敏感性研究

目的 研究化学因素引起的热应激蛋白 70 (HSP70 )升高对K56 2 细胞化疗药物体外敏感性的影响。方法用氯化镉诱导K56 2 细胞使其HSP70高表达 ,在高表达细胞中分别加入甲氨蝶呤 (MTX)、丝裂霉素C(MitomycinC)、顺氯氨铂 (PDD)、平阳霉素 (Bleomycin)等 4种化疗药物 ,药物浓度以临床一次用量的 1/ 2 5 0为中剂量 ,中剂量的 1/ 10、10倍分别为低剂量和高剂量 ,作用 16h后用MTT比色法检测细胞活力 ;HSP70用RT -PCR检测。结果 氯化镉可诱导细胞HSP70高表达 ,其中作用 4h后表达最高 ;HSP70高表达可以降低细胞对化疗药物的敏感性 ,HSP70表达水平越高 ,细胞对化疗药物的敏感性越低。结论 非热诱导的HSP70高表达可以降低肿瘤细胞对化疗药物的敏感性 。

K_(ATP)抑制剂对七氟醚诱导乳鼠心肌细胞HSP70表达的影响

目的 探讨 HSP70在七氟醚诱导乳鼠心肌细胞预适应中的作用及其内在联系。方法 第 2代培养心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧 /复氧组、七氟醚组、优降糖组、优降糖 +七氟醚组 ,每组均缺氧 2 h,复氧 4 8h。分别取复氧 0、1、12、2 4、36和 4 8h的细胞用免疫组化染色检测乳鼠心肌细胞 HSP70的表达。结果 在各个时点 ,七氟醚组的 HSP70表达最强 ,显著高于正常对照组、缺氧 /复氧组、优降糖组和优降糖 +七氟醚组 (P<0 .0 1) ,随着复氧时间的延长 ,七氟醚组 HSP70表达从 1h开始增加 ,2 4 h表达最强 ,具有显著统计学意义 (P<0 .0 5 )。且优降糖 +七氟醚组 HSP70表达与正常对照组、缺氧 /复氧组、优降糖组组间无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 HSP70和KATP通道均参与了七氟醚诱导乳鼠心肌细胞产生预适应过程 ,阻止 KATP通道则抑制

糖尿病周围神经病变与NF-κ B、TNF-α和HSP70的关系

糖尿病周围神经病变(DPN)是一种常见的糖尿病并发症,主要发病机制与高血糖引起的代谢紊乱、氧化应激、神经营养障碍及遗传因素等有关。氧化应激可以通过包括多元醇途径、己糖胺途径、蛋白激酶C途径的激活以及糖基化终末产物(AGES)的形成等代谢途径间接引起神经元和轴突的损伤,同时直接损伤了神经细胞。其中NF-κB、TNF-α和HSP70在糖尿病周围神经病变的氧化应激的过程中扮演了不同角色。

大展弦比机翼跨声速静气动弹性风洞试验

基于静气动弹性风洞试验研究了某翼身组合体的跨声速静气动弹性效应。试验结果表明:在设计巡航点,静气动弹性对大展弦比超临界机翼的气动特性影响明显,可使机翼的升力系数降低21%、升阻比增加8%、焦点前移约1%bA;在超过巡航马赫数后,静气动弹性效应使得机翼气动特性有恶化的趋势。跨声速时,马赫数和速压对机翼的静气动弹性效应具有较大影响,且影响规律呈复杂非线性,难以依据现有理论分析准确预计。

黄斑篮子鱼去毒相关基因的克隆与肝脏组成型表达分析

从基因水平探讨海洋鱼类对海洋藻毒素的去毒分子机理。采用RT-PCR法成功克隆了黄斑篮子鱼Siganus oramin肝脏I时相代谢酶细胞色素P450 1A(CYP1A)、II时相代谢酶alpha型谷胱甘肽S-转移酶(GSTA)和rho型谷胱甘肽S-转移酶(GSTR)、热休克蛋白70(HSP70)、alpha 1型钠钾ATP酶(ATP1A1)及β-肌动蛋白(beta-actin,ACT)基因cDNA核心序列,序列分别长879 bp、582 bp、588 bp、660 bp、749 bp和554 bp。序列同源性分析发现,属鲈形目的黄斑篮子鱼CYP1A、GSTA和GSTR与同属鲈形目的牙鲆Paralichthys olivaceus、欧洲鲽Pleuronectesplatessa、真鲷Pagrus major、鲤形目的斑马鱼Brachydanio rerio相应氨基酸序列同源性较高,CYP1A和GSTA与非洲爪蟾(两栖类)、鸡(鸟类)、小鼠、大鼠和人(哺乳类)相应氨基酸序列同源性低,这可能与鱼类Ⅰ、Ⅱ时相去毒酶基因承担水环境毒素去毒代谢的特殊功能有关;而HSP70、ATP1A和β-肌动蛋白在鱼类、两栖类、鸟类、哺乳类中均有较高的同源性,这可能与这些基因在机体中承担的最基本的生命功能相关。应用半定量RT-PCR的方法,以β-肌动蛋白作为外参照,在指数期增长范围内分别得到了CYP1A、GSTA、GSTR、HSP70和ATP1A1 mR-NA与β-肌动蛋白mRNA(%)的比值,确定黄斑篮子鱼肝脏去毒相关基因的组成型表达水平。其中,黄斑篮子鱼肝脏CYP1A、GSTA和GSTR基因组成型表达相对较高,HSP70和ATP1A1基因组成型表达相对较低,这可能与不同基因在黄斑篮子鱼海洋藻毒素去毒分子机理中承担的作用相关,为海洋藻毒素在海洋鱼类中的积聚及代谢去毒分子机制的研究提供了相关数据。