717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠心肌NO、MDA、SH水平的影响

目的观察717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠心肌一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、巯基(SH)水平的改善作用。方法8周龄SPF级SD大鼠50只,雌雄各半,随机分为正常对照组、模型组、717解毒合剂低剂量组(0.6 mL/100 g)、717解毒合剂中剂量组(1.2 mL/100 g)、717解毒合剂高剂量组(2.4 mL/100 g)。除正常对照组外,其余大鼠均予2.5μg/g腹蛇毒液于左后肢皮下注射造模,并于造模成功2 h后开始给药,连续3 d。末次给药12 h后取大鼠心脏制备10%心肌组织匀浆,离心后提取上清并检测心肌MDA水平、心肌NO水平、心肌总巯基(TSH)水平、心肌非蛋白结合巯基(NPSH)水平和心肌蛋白结合巯基(PSH)水平。结果与正常对照组相比,模型组大鼠心肌MDA水平和NO水平表现出显著升高的状态(P<0.05),心肌TSH、NPSH、PSH水平则呈现降低的状态(P<0.05);中药治疗组大鼠心肌MDA水平和NO水平显著下调(P<0.05),心肌TSH、NPSH、PSH水平明显上调(P<0.05),并呈现剂量依赖性趋势,给药剂量越高,心肌损伤的改善程度越优。结论717解毒合剂对蝮蛇毒诱导的大鼠心肌损害具有一定的改善和保护作用,可以改善心肌MDA、NO、TSH、NPSH、PSH水平,值得进一步研究。

中药“717解毒合剂”治疗蝮蛇咬伤病人的临床效果研究

目的 探究自拟中药方717解毒合剂治疗蝮蛇咬伤病人的临床效果。方法 选取2018年9月至2021年6月中国人民解放军联勤保障部队第九一〇医院收治的68例被蝮蛇咬伤的病人,根据随机数字表法分为观察组和对照组。其中对照组采用常规西药治疗(抗蝮蛇毒血清6 000 U加入0.9%氯化钠注射液250 mL静脉滴注),观察组在常规西药治疗的基础上加服自拟中药方717解毒合剂,每组34例。比较两组病人的临床疗效。结果 观察组病人治愈人数23例(占比67.65%),总有效率为91.18%;对照组治愈人数16例(占比47.06%),总有效率为82.35%;观察组治愈人数显著多于对照组(P<0.05);经治疗后,观察组病人急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分明显优于对照组(P<0.05)。治疗前,两组病人血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶及肌酸激酶同工酶(CK-MB)的含量相比较差异无统计学意义(P>0.05);经治疗后,随着治疗天数的增加,各指标出现明显好转,并且观察组改善效果显著优于对照组(P<0.05)。治疗前,两组病人肾损伤相关因子血清肌酐、血浆中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(pNGAL)、尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(uNGAL)含量相比较差异无统计学意义(P>0.05);经治疗后,随着治疗天数的增加,各指标出现明显好转,并且观察组改善效果显著优于对照组(P<0.05)。结论717解毒合剂联合西医治疗蝮蛇咬伤后病人的临床治疗效果相比于单独采用西医治疗更显著,能够快速降低病人血清内的毒素,减少毒素对于心肌细胞的损伤以及肾损伤,值得临床推广。

717解毒合剂通过抑制NF-κB信号通路和STAT3活性减轻蝮蛇咬伤大鼠肝脏炎症反应

目的研究717解毒合剂对蝮蛇伤大鼠肝脏NF-κB信号通路与STAT3活性相关基因表达的影响,探讨717解毒合剂抗蝮蛇毒急性肝损伤作用。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、717解毒合剂(25、60和150 mg生药/kg)组和抗蝮蛇毒血清组。除正常对照组外,其余各组制备蝮蛇伤大鼠模型,造模成功后2 h,正常对照组和模型组以等量生理盐水灌胃,抗蝮蛇毒血清组尾静脉注射抗蝮蛇毒血清,中药组灌胃717解毒合剂,每天1次,第6天后收集血清、肝脏。镜下观察各组肝脏病理学变化,ELISA法检测各组血清中C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞介素-4(Interleukine-4,IL-4)、白细胞介素-6(Interleukine-6,IL6)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)及β-干扰素(Interferon-β,INF-β)等炎性因子浓度水平,Western blot法检测肝核因子κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)抑制蛋白α(Inhibitor kappa B alpha,IκBα)、信号转导和转录激活因子3(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、磷酸化信号传导与转录活化因子3(p-STAT3)的蛋白表达水平,RT-RCR检测IκBαmRNA的表达水平,免疫组化检测肝核因子κBP50(NF-кBP50)、核因子κBP65(NF-кBP65)蛋白表达。结果与模型组比较,717解毒合剂能降低血清炎症因子水平(P<0.05或P<0.01),显著提高IκBαmRNA及其蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01),抑制NF-кBP50蛋白的高表达(P<0.01),降低STAT3、p-STAT3蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论717解毒合剂可能通过抑制NF-κB信号通路及STAT3磷酸化,减轻蝮蛇伤大鼠肝脏炎症反应,促进肝损伤修复,从而降低因蛇伤致多脏器综合征的发生率,对蛇伤治疗具有积极意义。

717解毒合剂对蝮蛇毒所致局部组织损伤的保护作用与机制研究

目的研究717解毒合剂对蝮蛇咬伤动物模型局部组织损伤的保护作用及其可能的机制.方法将59只健康SD大鼠按随机数字表法分为生理盐水(NS)对照组(n=12)、蝮蛇毒模型组(n=9)、抗蝮蛇毒血清组(n=11)和717解毒合剂25、60、150 mg/kg组(均n=9).采用皮下注射50 g/L蛇毒溶液建立蝮蛇毒模型,NS对照组予以等量NS.制模成功后2 h,抗蝮蛇毒血清组于尾静脉注射抗蝮蛇毒血清(每只0.6 mL),717解毒合剂组分别予以25、60、150 mg/kg 717解毒合剂生药灌胃(每日1次,连用6 d),NS对照组和蝮蛇毒模型组予以等量NS灌胃,6 d后取各组大鼠血清及大腿腓肠肌.另取15只健康KM小鼠随机分为NS对照组、蝮蛇毒模型组和717解毒合剂10 mg/kg组,每组5只,制模方法同SD大鼠,制模后717解毒合剂组以10 mg/kg 717解毒合剂生药灌胃(每日1次,连用3 d),3 d后处死.观察各组大鼠局部组织损伤情况以及小鼠腹部皮下出血情况,光镜下观察各组大鼠腓肠肌的病理学改变,采用放射免疫法(RIA)测定血清细胞外基质透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)及层黏连蛋白(LN)水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子-κB(NF-κB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测各组腓肠肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达情况.结果蝮蛇毒制模后大鼠创面均出现典型中毒现象,且随时间延长逐渐加重,72 h后717解毒合剂60 mg/kg组大鼠的局部肿胀程度明显轻于同期蝮蛇毒模型组.制模4 h后KM小鼠腹部皮下可见弥漫性出血,为典型局部中毒,72 h后717解毒合剂10 mg/kg组小鼠的恢复情况明显优于同期蝮蛇毒模型组.蝮蛇毒模型组大鼠血清HA、ColⅣ和LN水平均明显高于NS对照组,而抗蝮蛇毒血清组及717解毒合剂60 mg/kg和150 mg/kg组上述指标水平则较蝮蛇毒模型组明显改善,其中HA和ColⅣ水平以717解毒合剂150 mg/kg组改善最为明显〔HA(μg/L):112.83±19.89比162.52±16.29,ColⅣ(μg/L):120.04±21.44比158.77±36.64,均P<0.01〕,LN水平以60 mg/kg组改善最为明显(μg/L:69.09±15.22比96.66±15.72,P<0.01).蝮蛇毒模型组大鼠血清IL-2、TNF-α、NF-κB和TGF-β1水平均明显高于NS对照组,而抗蝮蛇毒血清组及717解毒合剂60 mg/kg和150 mg/kg组上述指标水平则较蝮蛇毒模型组明显改善,其中NF-κB水平以717解毒合剂60 mg/kg组改善最为明显(ng/L:14.46±4.42比20.81±2.59,P<0.01).苏木素-伊红(HE)染色结果显示,NS对照组大鼠腓肠肌结构正常;蝮蛇毒模型组大鼠腓肠肌严重弥漫性肌纤维损伤与炎性浸润,可见大量细胞坏死;抗蝮蛇毒血清组大鼠腓肠肌损伤减轻,但炎性浸润显著;717解毒合剂组大鼠炎性细胞浸润减轻,正常细胞数增多.蝮蛇毒模型组大鼠腓肠肌iNOS和COX-2蛋白表达均较NS对照组明显增强,717解毒合剂60 mg/kg和150 mg/kg组的iNOS表达较蝮蛇毒模型组明显减弱,抗蝮蛇毒血清组及717解毒合剂各剂量组COX-2表达均较蝮蛇毒模型组明显减弱,其中以717解毒合剂150 mg/kg组变化最明显(iNOS/β-tubulin:0.71±0.13比0.95±0.14,COX-2/β-tubulin:0.33±0.10比0.67±0.11,均P<0.01).结论717解毒合剂能显著改善小鼠腹部皮下出血症状,促进新生肉芽组织生长,加快创面愈合,减轻腓肠肌病理损害,同时能明显改善大鼠局部组织结构,降低血清中细胞外基质成分含量与炎性因子水平,抑制腓肠肌iNOS和COX-2蛋白表达.

717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠血清HAase干预作用的研究

目的观察717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠血清透明质酸酶的干预作用。方法蝮蛇毒经大鼠左下肢局部皮下注射造模后,中药组、血清组和中药加血清组3组干预治疗,从大鼠球后静脉取血,采用ELISA法检测各组大鼠在实验不同时段血清HAase的水平。结果模型组血清HAase的含量高于正常组(P<0.05)。治疗后与模型组比较,各治疗组血清HAase含量降低(P<0.05),且以中药加血清组疗效最好。结论 717解毒合剂可以降低蝮蛇大鼠血清HAase值。

717解毒合剂联合西药对蝮蛇咬伤患者血清LDH、CK、CK-MB的影响

目的观察717解毒合刺联合西药对蝮蛇咬伤患者血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)的影响。方法将2016年5月—2016年10月江西中医药大学附属医院中医外科收治的60例蝮蛇咬伤患者随机分为治疗组(30例)与对照组(30例),对照组患者予以常规西药治疗,治疗组患者在对照组治疗的基础上加服717解毒合剂,对比观察两组患者的临床疗效及治疗前后患者血清LDH、CK及CK-MB的含量变化。结果治疗组患者总有效率为93,33%,明显优于对照组的70.00%,两组对比,P<0.05,差异具有统计学意义;治疗7 d后,两组患者血清LDH、CK及CK-MB含量较治疗前均显著下降,且治疗组下降更为明显,两组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。结论 717解毒合剂与抗蝮蛇毒血清联合治疗蝮蛇咬伤,既能快速中和患者血清内的游离毒素,又能有效降低结合毒素对患者心肌细胞及骨骼肌细胞等的损害,从而显著降低患者血清LDH、CK及CK-MB的含量,提高蝮蛇咬伤患者的治愈率,值得临床推广应用。

717解毒合剂对蝮蛇咬伤患者血清PLA_2和HAase干预作用的研究

目的观察717解毒合剂对蝮蛇咬伤患者血清磷脂酶A2(PLA2)和透明质酸酶(HAase)的干预作用。方法将符合条件的90例蝮蛇咬伤患者随机分成血清组、中药组和中药加血清组进行相应治疗,予静脉取血,采用ELISA法检测各组患者在实验不同时段血清PLA2和HAase的水平。结果入院时,各治疗组血清PLA2、HAase的含量均高于正常组。治疗后,各给药组血清PLA2、HAase含量明显降低,其中以中药加血清组对PLA2、HAase含量的降低效果最好。结论 717解毒合剂可以有效降低蛇伤患者血清PLA2、HAase值。

利用重复测量方差分析探讨717解毒合剂联合西医治疗蝮蛇咬伤患者局部症状的临床疗效

目的:观察717解毒合剂联合西医治疗蝮蛇咬伤患者局部症状的临床疗效。方法:将200例符合纳入标准的蝮蛇咬伤患者随机分为观察组(717解毒合剂联合西医治疗)和对照组(西医常规治疗)各100例,两组均予以西医常规治疗,在此基础上,观察组予以717解毒合剂联合治疗。在治疗前后对患者的局部症状(疼痛程度、瘀斑范围以及肿胀范围)评分,比较两组患者局部症状积分,并进行临床疗效评估。结果:治疗前,两组患者局部症状积分差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,观察组总有效率为91%,对照组总有效率为74%,观察组明显优于对照组(P<0.05);两组治疗后肿胀、瘀斑、疼痛积分均明显下降,并且观察组明显优于对照组(P<0.05)。结论:717解毒合剂联合西医治疗,对蝮蛇咬伤患者局部症状恢复具有更好的临床效果,疗效优于单纯西医常规治疗。

717解毒合剂通过NETs-CYR61/CCN1信号通路对蝮蛇咬伤大鼠局部组织损伤修复作用

目的探究717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠局部组织中性粒细胞胞外陷阱(neutrophil extracellular traps,NETs)水平,以及对富含半胱氨酸蛋白61(CYR61/CCN1)表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、蝮蛇咬伤组及抗蝮蛇毒血清组及717解毒合剂高、低剂量组。收集血清、大腿腓肠肌,采用苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin staining,HE)和马松(Masson)染色观察各组腓肠肌病理学变化,透射电镜观察腓肠肌超微结构,原位末端凋亡(TUNEL)法检测各组大鼠腓肠肌细胞凋亡情况,PicoGreen荧光检测各组血清游离DNA(cf-DNA)水平,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组血清与腓肠肌中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的表达水平,免疫组化检测腓肠肌中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)的改变,免疫荧光法检测各组大鼠腓肠肌瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)水平,Western blot与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测腓肠肌组织CYR61/CCN1蛋白及其mRNA表达情况。结果与正常组比较,模型组出现显著的炎性浸润与出血反应,且胶原纤维化程度均升高;超微结构显示模型组大鼠腓肠肌细胞结构损伤严重,肌节呈非对称性分布,肌原纤维丝断裂;并分布有大量凋亡细胞,血清cf-DNA、MPO含量显著上升(P<0.01),腓肠肌MPO及CitH3蛋白表达均有升高(P<0.05或P<0.01),腓肠肌CYR61/CCN1蛋白及其mRNA表达均有上调;717解毒合剂各给药组均能显著改善大鼠局部炎性反应及出血症状,降低胶原纤维化程度,有效抑制蝮蛇咬伤大鼠腓肠肌细胞凋亡率,减少血清cf-DNA、MPO含量(P<0.05或P<0.01),717解毒合剂高剂量组抑制了腓肠肌NE、MPO的表达,717解毒合剂各给药组均能降低腓肠肌CitH3的表达(P<0.05或P<0.01),抑制了CYR61/CCN1蛋白及其mRNA高表达。结论蝮蛇毒诱导局部组织中性粒细胞NETs形成,CYR61/CCN1地过表达,717解毒合剂改善了大鼠腓肠肌超微结构,抑制了细胞凋亡,并可能通过调控NETs-CYR61/CCN1信号通路改善蛇伤症状,NETs信号分子及CYR61/CCN1有望成为蝮蛇毒致局部组织损伤防治的新靶点。

蝮蛇咬伤后患者血清心肌酶谱的变化及717解毒合剂的干预作用研究

目的观察蝮蛇咬伤后患者心肌酶谱的变化及717解毒合剂的干预作用研究。方法将符合条件的60例蝮蛇咬伤患者随机分成治疗组和对照组进行治疗,对照组患者予以西药常规治疗,治疗组患者在对照组的基础上加服717解毒合剂,予静脉取血,检测各组患者在实验不同时段血清心肌酶谱(CK、CK-MB、LDH)的水平。结果入院时,60例患者血清心肌酶谱CK、CK-MB、LDH的含量均显著高于正常水平(P<0.05)。治疗后,两组患者血清心肌酶谱含量均有明显降低,治疗组下降明显优于对照组,有统计学意义(P<0.05)。结论 717解毒合剂可以有效降低蛇伤患者血清心肌酶谱值,大大提高了蝮蛇咬伤的治愈率。

717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠血清心肌酶谱的影响

目的观察717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠血清心肌酶谱的干预作用。方法实验研究采用24只大白鼠局部注射蝮蛇毒造模后,分为中药组、血清组和中药加血清组3组进行治疗,从大鼠球后静脉取血,采用ELISA法检测大鼠模型在实验不同时段血清心肌酶谱的水平,并对实验数据进行统计分析,得出结论。结果模型组血清CK、CK-MB、LDH、AST的含量高于正常组(P<0.05)。治疗后与模型组比较,各治疗组血清CK、CK-MB、LDH、AST含量降低(P<0.05),且以中药加血清组疗效最好,其次为中药组。结论 717解毒合剂可以降低蛇伤大鼠血清CK、CK-MB、LDH、AST值,其解毒排毒,纠正心肌损伤的效果明显,是治疗蝮蛇咬伤的有效药物。

717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠血清PLA_2的干预作用

目的:观察717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠血清磷脂酶A2的干预作用。方法:蝮蛇毒经大鼠左下肢局部皮下注射造模后,中药组、血清组和中药加血清组3组干预治疗,从大鼠球后静脉取血,采用ELISA法检测各组大鼠在实验不同时段血清PLA2的水平。结果:模型对照组PLA2含量明显高于正常对照组(P<0.05),治疗后各给药组PLA2含量明显降低,其中以中药加血清组对PLA2含量的降低效果最好,与血清组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:717解毒合剂可以有效降低蝮蛇咬伤大鼠血清PLA2值。

王万春运用中医药综合治疗毒蛇咬伤经验

毒蛇咬伤是严重影响劳动人民生命健康的常见灾害性疾病,在我国每年有超过1万人死于毒蛇咬伤。中医中药治疗毒蛇咬伤不仅有着悠久的历史,并且中医治疗毒蛇咬伤,在理论上有其独特之处。王万春教授根据患者相应临床表现,结合临床经验进行中医药干预综合治疗,取得了满意的疗效,显示了传统中医中药在治疗毒蛇咬伤方面的临床优势。

中西医结合治疗重症银环蛇咬伤验案举隅

银环蛇毒素以神经毒为主,西医治疗银环蛇咬伤主要是注射足量抗银环蛇血清和气管插管辅助呼吸,但在患者对血清过敏、血清缺药等情况下,结合经验方717解毒合剂1号方加减能够因时因地因病和多成分、多靶点、多层次进行调节和治疗。中西医结合治疗银环蛇咬伤,能够增加临床疗效,值得临床借鉴应用。

中西医结合治疗眼镜蛇咬伤致溃疡验案举隅

眼镜蛇是我国南方最常见的毒蛇之一,其毒性是以神经毒为主的混合毒,毒性成分复杂,被眼镜蛇咬伤后病势急,病情变化快,中毒症状多样。被眼镜蛇咬伤后局部伤处易发黑溃烂坏死,且临床运用抗眼镜蛇血清治疗蛇咬伤溃疡效果不佳。中医中药联合外科皮瓣修复,能有效提高临床疗效,减轻患者痛苦,缩短患者病程,可临床推广运用。