白藜芦醇通过下调PRMT5表达抑制肝胆管癌SMMC-7721细胞的增殖、侵袭和细胞周期

目的:探究白藜芦醇(Res)通过调控PRMT5表达对肝胆管癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭、细胞周期的影响及其机制。方法:常规培养正常肝细胞LO2和SMMC-7721细胞,用0、20、40、80μmol/L的Res进行处理,用qPCR法、MTT法、Transwell实验、流式细胞术和WB法分别检测Res处理后PRMT5 mRNA在LO2和SMMC-7721细胞中的表达,Res对SMMC-7721细胞增殖能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡,以及PRMT5、cyclin D1和cyclin E1蛋白表达的影响。结果:PRMT5在SMMC-7721细胞中呈高表达(P<0.01);20、40、80μmol/L Res均能明显抑制PRMT5 mRNA和蛋白在SMMC-7721细胞中的表达(均P<0.01),抑制SMMC-7721细胞的增殖能力(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05),阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期并促进其凋亡(P<0.01),明显抑制SMMC-7721细胞中周期蛋白cyclin D1、cyclin E1蛋白的表达(P<0.01)。结论:PRMT5在SMMC7721细胞中呈高表达,Res可有效抑制SMMC-7721细胞的增殖和侵袭能力并诱导其凋亡,其机制可能与抑制PRMT5表达相关。

圣草次苷抑制肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖和迁移:基于激活ROS/MAPKs信号轴

目的探讨圣草次苷通过ROS/MAPKs信号轴调控肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的作用机制。方法分别用0、25、50、100、150、200、250、300μg/mL圣草次苷处理肝癌SMMC-7721细胞系24 h后,CCK-8法检测细胞活性;不同浓度的圣草次苷(100、200、300μg/mL)处理细胞后,运用划痕实验分别在24、48、72 h检测划痕愈合率,Transwell实验检测细胞迁移率,克隆形成实验检测细胞增殖能力,DAPI染色观察细胞核形态变化,Western blot检测侵袭蛋白E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、MMP-9、凋亡因子PARP和Pro-caspase 3以及MAPKs通路p-JNK、p-P38、p-ERK信号分子;用(分别为2、5、10μmol/L)ERK抑制剂U0126、JNK抑制剂SB203580和P38抑制剂SP600125预先处理细胞2 h,再用200μg/mL圣草次苷处理细胞24 h,Western blot检测凋亡蛋白PARP的切割情况;分别用N-乙酰-半胱氨酸(NAC)(30μmol/L)或圣草次苷(100、200、300μg/mL)单独或共处理细胞后,通过DCFH-DA荧光探针法分别在15、30、60 min检测内源性活性氧(ROS)水平。结果圣草次苷在50μg/mL范围内,对细胞活力基本无影响(P>0.05);圣草次苷能够显著抑制SMMC-7721细胞的划痕愈合(P<0.01),细胞迁移(P<0.01)和克隆形成(P<0.01),在300μg/mL浓度时作用最显著;圣草次苷明显减少侵袭蛋白N-cadherin、MMP-2、MMP-9的蛋白表达量(P<0.01),上调E-cadherin的蛋白表达量(P<0.05);圣草次苷诱导SMMC-7721细胞发生显著的凋亡形态学变化,Pro-caspase 3表达降低,PARP切割增多(P<0.01);圣草次苷在300μg/mL刺激30 min时ROS表达水平较高,NAC(30μmol/L)处理后,细胞内ROS表达水平下降明显;圣草次苷能够显著诱导MAPKs信号途径JNK、P38和ERK的磷酸化(P<0.01),U0126和SB203580能够增强圣草次苷诱导的PAPR切割,而SP600125逆转圣草次苷诱导的PARP切割。结论圣草次苷通过促进细胞内ROS的合成,诱导MAPKs信号通路的活化,调控肝癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移和凋亡。

miR-3682-3p通过调控PI3K/AKT信号通路影响SMMC-7721人肝癌细胞的增殖、侵袭和凋亡

目的分析miR-3682-3p与PI3K/AKT信号通路在肝细胞癌发展中的关系,以期为肝细胞癌的治疗提供新的思路。方法通过qRT-PCR分析MIHA人正常肝细胞和SMMC-7721人肝癌细胞中miR-3682-3p与PI3K/AKT的表达水平。通过转染不同质粒将SMMC-7721人肝癌细胞分为miR-3682-3p mimic组、miR-3682-3p mimic NC组、miR-3682-3p inhibitor组和miR-3682-3p inhibitor NC组,采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-3682-3p与PI3K的相互作用关系。采用蛋白免疫印迹、qRT-PCR、流式细胞术、细胞划痕和Transwell实验分析不同实验组细胞的增殖、侵袭和凋亡情况。结果miR-3682-3p能够靶向调控PI3K/AKT信号通路,miR-3682-3p表达能够激活PI3K/AKT信号通路,肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强,凋亡减少。而抑制miR-3682-3p表达后,PI3K/AKT通路受到抑制,肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力减弱,凋亡增加。结论PI3K是miR-3682-3p的直接靶点,miR-3682-3p通过激活PI3K/AKT通路促进SMMC-7721人肝癌细胞的体外转移活性。

当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射增敏作用

目的:探讨当归、红芪提取物对直线加速器(X射线)辐射后人肝癌细胞SMMC-7721的增敏作用。方法:96孔板培养人肝癌细胞SMMC-7721,设9个组,对照组(N)即正常对照组,纯辐射组(F)给以源皮距100cm 4Gy的X射线,另设3个纯药物组(DH),设高(H:8mg/mL)、中(M:6mg/mL)、低(L:4mg/mL)三个药物浓度梯度,3个辐射加药组(F+DH)和1个空白组(只有培养液无细胞)。每组设6个复孔。采用MTT法计算当归、红芪提取物对人肝癌SMMC-7721细胞辐射前后增殖活性的影响。流式细胞术检测不同组细胞的周期情况,透射电镜及倒置显微镜分别观察各组细胞结构变化,用蛋白印记法检测不同组细胞中p21蛋白表达情况。结果:MTT法证明当归、红芪提取物具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖作用,对于辐射后的肝癌细胞具有很好的周期抑制作用。不同剂量当归、红芪提取物作用于细胞24h后,抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖呈剂量依赖关系,药物浓度越高,抑制作用越显著。SMMC-7721细胞经辐射后,细胞的抑制率为37.58%,辐射后加不同浓度当归、红芪提取物(4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL),联合作用对细胞的抑制率升高,分别为45.27%、51.86%、59.34%,且呈药物浓度依赖关系,差异具有统计学意义(P<0.01)。辐射组肝癌细胞较正常组细胞G0/G1期细胞数明显增多,由44.70%升至71.60%(P<0.01),S期细胞减少,高浓度药物也可以使G0/G1期细胞比例有所升高(P<0.01)。辐射加药组细胞G0/G1期阻滞最为明显,并呈药物浓度梯度关系。高浓度药物组、辐射组细胞p21蛋白表达较正常组升高,辐射组+高浓度药物组细胞p21蛋白表达较辐射组明显升高。结论:当归、红芪提取物对于人肝癌SMMC-7721细胞具有很好的抑制作用,对经X线辐射后的细胞具有很好的增敏作用。

RNA干扰胰岛素生长因子-1受体基因对人肝癌SMMC7721增殖及凋亡蛋白的影响

目的观察RNA干扰胰岛素生长因子-1(IGF-1)受体基因后对人肝癌细胞株SMMC7721增殖和相关凋亡因子表达的影响。方法构建两个靶向IGF-1R基因的RNA干扰真核表达质粒(IGF-1R-siRNA-1和IGF-1R-siRNA-2)分别转染至SMMC7721细胞,并设立正常对照组、空白对照组、IGF-1R-siRNA-1转染组、IGF-1R-siRNA-2转染组。采用聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot检测IGF-1R基因表达变化,检测细胞增殖、侵袭、凋亡、凋亡蛋白、骨形态发生蛋白(BMPs)及相关信号通路蛋白的表达水平。结果RT-PCR结果显示,IGF-1R-siRNA-1和IGF-1R-siRNA-2表达载体转染SMMC-7721细胞后,IGF-1R基因的mRNA水平显著下调,IGF-1R-siRNA-1转染组IGF-1R基因的表达低于正常对照组,IGF-1R-siRNA-2转染组IGF-1R基因表达下调77.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,IGF-1R-siRNA-1转染组和IGF-1R-siRNA-2转染组IGF-1R蛋白在不同水平显著下调,IGF-1R蛋白表达抑制率分别为73.0%和81.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。IGF-1R-siRNA-1转染组和IGF-1R-siRNA-2转染组细胞增殖率明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ImageJ软件分析划痕面积结果显示,与正常对照组和空白对照组相比,IGF-1R-siRNA-1转染组、IGF-1R-siRNA-2转染组修复率下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验发现,与正常对照组和空白对照组相比,IGF-1R-siRNA-1转染组、IGF-1R-siRNA-2转染组为SMMC-7721细胞侵袭能力明显下降,侵袭细胞数量明显减少,差异有统计意义(P<0.05)。流式细胞检测显示,IGF-1R-siRNA-1转染组和IGF-1R-siRNA-2转染组晚期凋亡率明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,IGF-1R-siRNA-1组、IGF-1R-siRNA-2组Bcl-2表达均明显受抑制,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达量明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PI3K、AKT/p-AKT、BMP-2、BMP-7蛋白表达量明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论由IGF-1R基因沉默对肝癌SMMC7721细胞增殖与侵袭有抑制作用,对细胞凋亡有促进作用,能介导BMP2、BMP-7基因不同水平下调,IGF-1/PI3K/AKT信号通路蛋白可能参与其中。

藤黄酸促进bax和p53表达诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡(英文)

目的:观察藤黄酸(gambogicacids,GA)对肝癌细胞凋亡的诱导作用并探讨其分子作用机制。方法与结果: 采用MTT比色法检测藤黄酸对人肝癌和人正常肝细胞增殖作用的影响,结果表明,藤黄酸对人肝细胞性肝癌SMMC 7721 细胞株和QGY 7701细胞株有明显增殖抑制作用,并呈剂量依赖性,而对正常人肝组织L 02细胞株作用相对较弱;光镜及电镜形态学观察结果显示,给予GA后,肝癌细胞发生明显的细胞凋亡形态学变化,如细胞体积变小,细胞核固缩,出现凋亡小体等;采用RT PCR和Westernblotting方法检测baxmRNA以及bax和p53蛋白表达变化,结果表明GA可诱导baxmR NA及bax和p53蛋白表达上调;琼脂糖凝胶电泳显示,给予GA后,SMMC-7721裸小鼠移植瘤组织呈现典型的DNAladder 电泳梯状条带。结论:藤黄酸可显著抑制人肝癌细胞的增殖,其分子作用机制可能通过促进bax和p53表达上调,从而诱导人肝细胞性肝癌细胞凋亡。

红藤脂酸钠对人肝癌细胞系SMMC-7721体外抑瘤作用的实验研究

目的研究中药制剂红藤脂酸钠在体外对人肝癌细胞系SMMC-7721的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法MTT法测定SMMC-7721细胞生长的抑制百分率,并运用AnnexinV法和TUNEL法检测凋亡发生率。结果MTT法测得对照组与红藤脂酸钠处理组吸光值(A值)分别为:对照组(0.385±0.03),红藤脂酸钠处理组中的250μg/ml组(0.31±0.019)、500μg/ml组(0.199±0.022)、1mg/ml组(0.15±0.033)和2mg/ml组(0.048±0.026);各组间比较有显著性差异(P<0.01)。AnnexinV法测定红藤脂酸钠(1mg/ml作用1h)处理后细胞凋亡90%,对照组细胞凋亡17.36%。TUNEL法测定红藤脂酸钠(1mg/ml作用1h)处理后细胞凋亡(60.3±6.0)%,与对照组细胞凋亡(6.6±3.5)%相比,差异有显著性(P<0.01)。结论红藤脂酸钠在体外对7721细胞生长有明显的抑制作用,其作用机制可能主要是诱导肿瘤细胞发生凋亡。

不同扶正药物及其配伍对SMMC-7721人肝癌细胞P53、N-ras基因的调控作用(摘要)

目的:探讨不同扶正药物及其配伍对SMMC-7721人肝癌细胞P53、N-ras基因的调控作用。方法:选取临床上治疗肝癌常用的益气,温阳、补肾、养阴类扶正药物,并根据阴阳治则理论将其分别配伍为益气养阴、温阳养阴及补肾(阳)养阴等复合方药,煎为汤剂,采取大鼠灌胃给药后分离药物血清的方法制备药物血清,作用于体外培养的SMMC-7721人肝癌细胞,以正常大鼠血清和维甲酸作对照。流式细胞仪分析P53、

胂酸基乙酸与10-羟基喜树碱对肝癌细胞SMMC-7721生长的协同抑制作用

目的:了解胂酸基乙酸(ASAC)与10 -羟基喜树碱(10 -HCPT)对肝癌细胞SMMC - 772 1细胞生长的协同抑制效果。方法:两药组合和单药以不同浓度分别作用于生长良好的SMMC - 772 1细胞,分别在第2 4h、4 8h和72h终止作用,以MTT实验测定每组药物对SMMC - 772 1细胞的抑制率大小。结果:协同作用组比单药组的抑制效果好。在第4 8h和72h协同组有显著性差异(P <0 .0 5 )。结论:ASAC与10 -HCPT这两种促癌细胞凋亡的药物对SMMC - 772 1细胞生长具有周期协同抑制作用。

丹皮酚增强顺铂对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及其机制研究

目的：探讨丹皮酚增强顺铂对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及其可能机制。方法用不同浓度的丹皮酚、顺铂和两药联用处理人肝癌细胞SMMC-7721，采用MTF比色法测定药物在体外对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用，应用两药相互作用指数（coefficient of drug interaction，CDI）进行联合用药分析，吖啶橙荧光染色观察细胞的形态学改变，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：丹皮酚与顺铂单独应用对人肝癌细胞SMMC-7721有增殖抑制作用，且呈剂量效应关系。

蟾蜍灵对肝癌细胞SMMC 7721的细胞毒作用及生长相关基因表达的影响

为探讨蟾蜍灵的抗癌作用机理 ,以肝癌SMMC772 1细胞为靶细胞 ,应用噻唑蓝还原法检测细胞毒作用 ,双荧光染色法和DNA电泳技术检测细胞凋亡与坏死 ;免疫组织化学方法检测细胞生长相关基因p2 1waf1/cip1和增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白表达 .结果表明 ,0 .0 1μmol·L- 1及以上浓度蟾蜍灵对SMMC772 1细胞具有显著细胞毒作用 ,形态学和DNA片段化检测证实蟾蜍灵诱导的细胞死亡以凋亡为主 ;p2 1waf1/cip1在蟾蜍灵诱导下表达上调 ,同时PCNA的表达下降 ,两者呈负相关 (P <0 .0 1) .提示蟾蜍灵通过上调p2 1waf1/cip1表达 ,下调PCNA表达 。

β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡

目的研究β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡作用。方法 MTT法观察β-谷甾醇、豆甾醇对细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、细胞内活性氧ROS、钙离子Ca2+含量、线粒体膜电位ΔΨm变化。结果β-谷甾醇、豆甾醇均明显抑制SMMC-7721细胞增殖,使细胞形态发生典型凋亡变化,凋亡率和细胞内Ca2+、ROS的含量均显著增加,线粒体膜电位降低。β-谷甾醇使细胞周期阻滞在G2/M期,而豆甾醇则同时阻滞在S期和G2/M期。结论β-谷甾醇、豆甾醇具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导细胞凋亡的作用。

刺梨三萜对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响

目的:观察刺梨三萜(Rosa roxburghii Tratt triterpene,RRTT)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,研究其可能的作用机制。方法:采用形态学观察和MTT法分析RRTT对SMMC-7721细胞增殖的影响;通过NBT还原实验和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)含量的测定分析RRTT对SMMC-7721分化的影响;采用AO/EB染色法和FCM检测RRTT对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响;RT-PCR检测Bad mRNA的表达。结果:RRTT对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。与阴性对照组比,随RRTT剂量的增加,NBT阳性细胞比率增加,AFP含量逐渐降低。RRTT对SMMC-7721细胞凋亡和增殖周期均无明显影响。RRTT作用后,Bad mRNA的表达下调。结论:RRTT具有体外抗SMMC-7721作用,其机制可能通过下调Bad mRNA的表达而诱导细胞分化,而与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡无关。

九节龙皂苷I对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用

目的:研究九节龙皂苷I对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用。方法:C57BL/6小鼠足跖接种稀释3倍的Lewis肺癌细胞悬液20μl制备肺转移模型,灌胃给药14d后,截下荷瘤足,计算原位抑癌率,继续给药至25d,计算肺转移集落数和转移抑制率;BALB/c/nu裸鼠背部皮下接种肝癌SMMC-7721细胞5×106个/ml复制人肝癌实体瘤模型,连续给药16d,动态测量肿瘤体积、体重,画肿瘤生长曲线,实验结束后,剥离瘤块,计算抑瘤率。结果:九节龙皂苷I25mg/kg^100mg/kg对小鼠Lewis肺癌原位癌抑制率和肺转移均分别在40.5%~54.0%和45.4%~69.1%之间,对裸鼠肝癌SMMC-7721实体瘤的抑制率在45.6%~56.3%之间。结论:九节龙皂苷I对Lewis肺癌转移瘤和裸鼠肝癌SMMC-7721均有抑制作用。

乳香挥发油抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用

目的探讨乳香挥发油体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察乳香挥发油对SMMC-7721的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察SMMC-7721的形态学变化;使用琼脂糖凝胶电泳法检测乳香挥发油对细胞DNA降解的影响;利用流式细胞术分析乳香挥发油诱导SMMC-7721凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响;应用间接免疫荧光法观察凋亡调控基因bax和bcl-2蛋白的表达变化。结果乳香挥发油浓度为0.7、0.07、0.007、0.0007、0.00007mg.mL-1作用24h时,能抑制SMMC-7721的生长,并呈浓度依赖性。在浓度为0.07mg.mL-1时,作用48h或72h,电泳结果显示了DNA梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡峰,且细胞被阻滞于G1期。间接免疫荧光法的结果表明,促凋亡蛋白bax的表达增强,抗凋亡蛋白bcl-2的表达无明显变化。结论乳香挥发油能抑制肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并可能通过上调线粒体内bax/bcl-2的表达比例诱导SMMC-7721细胞的凋亡,而且其诱导的凋亡具有细胞周期依赖性。

三种蟾毒单体对SMMC-7721和BEL-7402人肝癌细胞生长的抑制作用

目的:探讨蟾蜍中主要蟾毒内酯类成分蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基的抗肝癌作用及机制。方法:以SMMC-7721、BEL-7402人肝癌细胞为靶细胞,以丝裂霉素为阳性对照药物,应用四甲基偶氮唑盐比色法、锥虫蓝染色和DNA染色分析法观察这3种蟾毒单体对肝癌细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。结果:蟾毒灵和华蟾酥毒基对上述肝癌细胞具有明显生长抑制作用,华蟾酥毒基较蟾毒灵作用略弱,但两者达到相同生长抑制效果所需浓度均低于丝裂霉素,酯蟾毒配基只有在较高浓度下才显示对肝癌细胞的生长抑制作用;不同浓度蟾毒灵、华蟾酥毒基对人肝癌细胞细胞膜具有破坏作用;可使人肝癌细胞阻止于G2/M期,使处于S期的细胞比例降低,并有明显诱导肝癌细胞凋亡作用。结论:蟾毒灵、华蟾酥毒基对上述人肝癌细胞具有明显生长抑制作用,具有对肝癌细胞膜的直接破坏作用和诱导凋亡作用;酯蟾毒配基抗肿瘤作用较弱。

半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D.Don extract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg.L-1SBE处理48 h,并以2.5 mg.L-1顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,二步法免疫组化检测Bcl-2,Survivin和Caspase-3蛋白表达。结果与正常对照组相比,SBE各浓度组细胞抑制率显著升高(P(0.001),细胞凋亡率明显上升(P(0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(P<0.01或P<0.05),Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspase-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关。

Survivin反义核酸对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

Surv iv in是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的一个成员,具有强大的抗细胞凋亡功能,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Surv iv in mRNA序列设计了反义寡核甘酸,RT-PCR检测表明,该序列反义寡核苷酸可明显降低细胞中surv iv in基因的mRNA含量;W estern印迹显示Surv iv in蛋白水平也被降低。M TT比色实验法检测结果说明人Surv iv in反义寡核苷酸抑制SMM C-7721细胞增殖,抑制率为43%,远高于无义寡核苷酸组和空白对照组。反义寡核苷酸还显著增强SMM C-7721细胞对于抗肿瘤药高三尖杉酯碱的敏感性,TUNEL法检测结果显示,在较低高三尖杉酯碱浓度下,反义寡核苷酸转染细胞的凋亡率明显高于其它对照组。本研究结果提示,surv iv in表达的靶向抑制有望应用于肿瘤的辅助治疗之中。

水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721的影响

目的:研究水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法:采用MTT法研究水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及时效量效关系;并通过PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法观察水红花子黄酮类成分作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及细胞凋亡率。结果:水红花子黄酮类成分能调节SMMC-7721人肝癌细胞株G1/S转换,使肿瘤细胞发生S期阻滞,造成S期细胞堆积,阻断细胞的DNA合成和复制,阻滞肿瘤细胞进入G2/M期,从而抑制肿瘤细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且具有明显的时效及量效关系。结论:水红花子黄酮类成分对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的抑制作用,且抑制作用和时间剂量成线性关系,其作用机制为抑制肿瘤细胞的增殖和诱导该细胞的凋亡。

氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的研究

目的研究氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721生长活力;Hoechst33258核染色,观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率。结果氯化两面针碱作用于细胞后,在体外呈浓度、时间依赖性显著抑制SMMC-7721细胞的生长,作用24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为(19.5±1.8)、(3.8±0.2)、(2.8±0.1)mg/L;Hoechst33258染色后,可见核染色质凝集,凋亡细胞呈致密浓染,与对照组相比,氯化两面针碱处理后凋亡细胞比例增加;流式细胞仪检测到G2/M细胞比例增加,G0/G1、S期细胞比例下降。药物作用于SMMC-7721细胞后,随浓度增加细胞凋亡率增加。结论氯化两面针碱对SMMC-7721细胞有明显的生长抑制作用,可能与改变细胞周期并诱导细胞凋亡有关。