肾组织血小板反应蛋白1型结构7A域及神经表皮生长因子样蛋白-1 检测在M型磷脂酶A2受体阴性膜性肾病中的临床意义

目的探讨肾组织血小板反应蛋白1型结构7A域(THSD7A)及神经表皮生长因子样蛋白-1(NELL1)检测在M型磷脂酶A2受体(PLA2R)阴性膜性肾病中的诊断及治疗指导意义。方法选取浙江中医药大学附属杭州市中医院2014至2021年肾穿刺活检确诊为PLA2R阴性膜性肾病共116例,通过免疫组织化学方法检测肾组织THSD7A及NELL1的阳性表达情况,比较各组间临床病理特征及治疗与预后。结果116例PLA2R阴性膜性肾病中THSD7A阳性23例,NELL1阳性9例,其中两者双阳性1例。THSD7A阳性较阴性者IgG4阳性率更高(P=0.010);膜性肾病Ⅰ期占比更少,Ⅱ期占比更多(P=0.002);基底膜增厚更明显(P=0.034)。NELL1阳性较阴性者C1q及IgG2的阳性率更低(P=0.029,P=0.001);炎细胞浸润更多(P=0.033);多部位沉积物更少(P=0.001);基底膜增厚更不明显(P<0.001);不典型膜性肾病比例更低(P=0.010)。继发因素分析显示THSD7A阳性者有1例确诊为乙状结肠癌,NELL1阳性者均未发现恶性肿瘤。生存分析提示THSD7A阳性组肾病复合缓解率(完全缓解或部分缓解)显著低于阴性组(P=0.016),而NELL1阳性组肾病复合缓解率显著优于阴性组(P=0.015),两指标单一阳性组间比较显示NELL1单一阳性组肾病复合缓解率显著优于THSD7A单一阳性组(P<0.001)。结论THSD7A及NELL1阳性膜性肾病更倾向于原发性膜性肾病,且无恶性肿瘤提示价值,但对膜性肾病患者的预后具有一定的预测价值。

JNX70-2型7m焦炉边火道温度控制方法探究与完善

为了解决JNX70-2型7m焦炉边火道温度偏低问题,分析了边火道温度现状,通过采取增加辅助加热系统边火道控制方法,彻底解决了边火道温度偏低问题,并总结出了在不同周转时间下边火道平均温度控制值。

TuM2-PK、TK1、CEA、CA19-9和CA72-4在结肠癌患者诊断中的意义

目的分析肿瘤性M2丙酮酸激酶(Tu M2-PK)、细胞质胸腺激酶(TK) 1、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA) 19-9和CA72-4在结肠癌患者诊断中的意义。方法随机选择60名老年体检者为健康组;同一时期45例老年良性结肠疾病患者为良性疾病组; 50例老年结肠癌患者为观察组。采集3组清晨5 ml空腹静脉血置于食管中,检测所有参试者Tu M2-PK、TK1、CEA、CA19-9和CA72-4含量,并对不同病理分期和临床分期患者检测其肿瘤标志因子,统计特异性、敏感性及准确度。结果观察组Tu M2-PK、TK1、CEA、CA19-9和CA72-4明显高于健康组及良性病变组,良性病变组明显高于健康组(P<0. 05)。结肠癌患者临床分期C～D期肿瘤标志物水平明显高于A～B期,结肠癌高、中分化患者明显高于低分化患者(P<0. 05)。联合诊断的敏感性、特异性及准确度明显高于单一检测(P<0. 05)。结论 Tu M2-PK、TK1、CEA、CA19-9和CA72-4联合检测对结肠癌的确诊具有辅助作用,提高结肠癌患者诊断的准确性、敏感性及准确度。

血清TuM2-PK、CEA、CA19-9和CA72-4对结肠癌的筛查价值

目的探讨血清肿瘤M2型丙酮酸激酶(TuM2-PK)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原CA19-9和CA72-4对结肠癌的筛查价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测80例结肠癌、75例结肠良性疾病和90例健康人血清TuM2-PK,电化学发光法检测血清CEA、CA19-9和CA72-4并进行统计分析。结果结肠癌组血清TuM2-PK、CEA、CA19-9和CA72-4水平明显高于良性疾病组和健康对照组(P<0.05)。受试者工作特征曲线下面积(AUC)显示,TuM2-PK对结肠癌的诊断效能最高(0.83,95%CI:0.76~0.89),其血清水平为25.9U/mL时,灵敏度和特异性分别为73.8%和86.1%。联合检测两项标志物,最优的组合为CEA+TuM2-PK,其灵敏度、特异性和准确度分别为78.8%、84.8%和82.9%。联合检测3种标志物,最优的组合为CEA+CA19-9+TuM2-PK,其灵敏度、特异性和准确度分别为90.0%、84.8%和86.5%。联合检测血清CEA+CA19-9+TuM2-PK+CA72-4的灵敏度、特异性和准确度分别为87.5%、83.0%和84.5%。结论联合检测血清肿瘤标志物CEA、CA19-9和TuM2-PK更有助于结肠癌的筛查。

血清BMP-7与^(99m)Tc-DTPA肾动态显像在糖尿病肾病中的相关性研究

目的:探讨血清骨形态发生蛋白-7(BMP-7)与^(99m)Tc-二乙基三胺五乙酸(^(99m)Tc-DTPA)肾动态显像肾小球滤过率(GFR)测定在糖尿病肾病中的相关性。方法:选择本院2015年7月至2017年7月内分泌科收治的糖尿病患者64例,根据尿白蛋白排泄率分为尿蛋白正常组(18例)、微量蛋白尿组(31例)和临床蛋白尿组(15例),另选取同期健康体检者30例作为对照组,测定血清BMP-7水平,肾动态显像测定GFR,对比分析各组检测结果。结果:随着糖尿病肾损害的加重,血清BMP-7水平逐渐降低;与对照组相比,尿蛋白正常组糖尿病患者的GFR显著升高,而微量蛋白尿组和临床蛋白尿组患者的GFR却显著降低;相关分析提示糖尿病肾病患者血清BMP-7和GFR呈显著正相关。结论:血清BMP-7与^(99m)Tc-DTPA肾动态显像GFR测定联合应用在糖尿病肾病的早期诊断或筛查中具有重要临床意义。

MiR-9-5p调控瞬时受体电位M7对心肌缺血/再灌注大鼠的保护作用

目的探讨miR-9-5p调控瞬时受体电位M7(TRPM7)对心肌缺血/再灌注(MIR)大鼠的作用。方法将32只SD大鼠分为假手术组、模型组、miR-9-5p过表达组及空载体对照组,通过左冠状动脉结扎法建立MIR模型,假手术组不结扎,miR-9-5p过表达组和空载体对照组于模型建立前24 h分别尾静脉注入miR-9-5p agomir和agomir NC。通过HE染色观察各组大鼠心肌损伤情况;Real-time PCR检测各组大鼠心肌组织中miR-9-5p表达水平;酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、乳酸脱氢酶(LDH)水平以及心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;双荧光素酶实验验证miR-9-5p与TRPM7的关系;免疫印迹法检测各组大鼠TRPM7、Bcl-2、Bax、磷酸化核因子κB 65(p-NF-κB p65)、toll样受体4(TLR4)蛋白表达。结果MiR-9-5p在大鼠心肌组织中低表达(P<0.05);miR-9-5p过表达能够降低CK-MB、cTnI、LDH表达水平,改善大鼠心肌损伤程度;与模型组相比,miR-9-5p过表达组心肌细胞凋亡率、Bax蛋白表达及MDA、IL-6、TNF-α及IL-1β含量均下降,而Bcl-2蛋白表达和SOD含量上升(P<0.05);双荧光素酶实验结果显示,TRPM7为miR-9-5p的靶基因,且miR-9-5p过表达组TRPM7、p-NF-κB p65、TLR4蛋白表达均较模型组降低(P<0.05)。结论MiR-9-5p通过调控TRPM7抑制心肌缺血再灌注导致的心肌细胞凋亡、氧化应激及炎症反应,并抑制TLR4/NF-κB通路。

7-脱氢胆固醇对白细胞介素-4诱导RAW264.7巨噬细胞M1/M2型极化的影响

目的研究7-脱氢胆固醇(7-DHC)对白细胞介素-4(IL-4)诱导的RAW264.7巨噬细胞M1/M2型极化的影响。方法体外培养RAW264.7巨噬细胞,分为M0组(RAW264.7巨噬细胞)、M2组(巨噬细胞M2型)。M2组以IL-4诱导极化,在诱导极化的同时分别予以0、5、10、20μg/mL 7-DHC处理(即M2组、M2+5μg/mL 7-DHC组、M2+10μg/mL 7-DHC组、M2+20μg/mL 7-DHC组)。CCK-8法检测7-DHC对M2组巨噬细胞的增殖情况。荧光定量PCR分别检测巨噬细胞M1型标志分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞分化抗原86(CD86)及M2型标志分子甘露糖受体(MR)、Ⅰ型精氨酸酶(ArgⅠ)的mRNA表达情况。酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果7-DHC浓度分别为0、5、10、20μg/mL时,对巨噬细胞M2型均无增殖或抑制作用(P>0.05)。与M0组比较,M2组iNOS及CD86的mRNA表达明显降低,MR、ArgⅠ的mRNA及IL-10的表达明显增加(P<0.05);与M2组比较,7-DHC其他浓度干预组iNOS、CD86的mRNA及IL-6的表达明显增加,MR、ArgⅠ的mRNA及IL-10的表达明显降低(P<0.05),且5、10、20μg/mL 7-DHC处理组呈剂量依赖性。结论7-DHC能够调节IL-4诱导的RAW264.7巨噬细胞M2型极化,并促进巨噬细胞M2型向巨噬细胞M1型转化。

云驾岭矿-300m以浅9#煤开采水文地质条件评价

本文对云驾岭矿开采 9# 煤可能的充水含水层进行了评价,确定伏青灰岩、大青灰岩、本溪灰岩及岩浆岩为开采 9# 煤的充水水源;奥灰为开采 9# 煤威胁最大的突水水源。云驾岭矿 9# 煤 -100m以浅,区域突水系数不大于 0.06MPa/m,相对安全,可作为先期采区进行试采;-100~-300m 之间,区域突水系数值 0.06~0.10MPa/m,可采取区域治理后,有序开采。

circFOXM1作为新型胃癌标志物调控胃癌发生、发展的机制研究

目的分析新型胃癌标志物环状叉头框蛋白M1(circFOXM1)在胃癌发生、发展机制中的调控作用。方法选取2022年1月至2023年4月该院肿瘤科收治的60例胃癌患者作为研究对象,检测其胃癌组织及癌旁组织中circFOXM1的表达水平。根据circFOXM1的表达水平,将60例患者分为circFOXM1高表达组和circFOXM1低表达组。比较circFOXM1高表达组和circFOXM1低表达组的临床病理资料(淋巴结转移、肿瘤侵袭深度和临床分期)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹法检测GES-1、HGC-27、BGC-823、MKN-45、MKN-1细胞中circFOXM1信使RNA(mRNA)、微小RNA(miR)-182-5p mRNA与母亲信号蛋白同源物7(SMAD7)mRNA及SMAD7蛋白的表达水平。体外培养MKN-45细胞,将其随机分为对照组、circFOXM1敲低组[转染circFOXM1小干扰RNA(siRNA)质粒]、circFOXM1过表达组(转染circFOXM1过表达质粒)、共转染阴性对照组(转染空载质粒和miR-182-5p抑制剂阴性对照)、circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组(转染circFOXM1 siRNA质粒和miR-182-5p抑制剂),分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测各组MKN-45细胞circFOXM1 mRNA、miR-182-5p mRNA与SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白的表达水平;采用Transwell侵袭及细胞划痕试验检测各组MKN-45细胞侵袭迁移情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组MKN-45细胞增殖情况。取50只裸鼠随机分为对照小鼠组、circFOXM1敲低小鼠组、circFOXM1过表达小鼠组、共转染阴性对照小鼠组、circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,每组10只。将各组MKN-45细胞接种在对应裸鼠右腋附近背部皮下构建胃癌移植瘤模型,饲养4周后检测各组移植瘤裸鼠MKN-45细胞增殖率、肿瘤体积及肿瘤质量。将MKN-45细胞随机分为野生miR-182-5p+空载组、野生miR-182-5p+circFOXM1过表达组、突变miR-182-5p+空载组、突变miR-182-5p+circFOXM1过表达组、野生SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组、野生SMAD7+miR-182-5p mimic组、突变SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组、突变SMAD7+miR-182-5p mimic组,再按照不同方式对各组MKN-45细胞进行转染。采用荧光素酶报告试验检测各组MKN-45细胞circFOXM1对miR-182-5p、SMAD7的靶向调控。结果circFOXM1低表达组有17例患者,circFOXM1高表达组有43例患者。circFOXM1低表达组和circFOXM1高表达组患者淋巴结转移、肿瘤侵袭深度和临床分期情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。MKN-45、HGC-27、BGC-823、MKN-1细胞中circFOXM1 mRNA、SMAD7 mRNA、SMAD7蛋白表达水平均高于GES-1细胞,miR-182-5p mRNA表达水平均低于GES-1细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组circFOXM1 mRNA表达水平低于circFOXM1过表达组,高于circFOXM1敲低组和circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组miR-182-5p mRNA表达水平高于circFOXM1过表达组,低于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白表达水平低于circFOXM1过表达组,高于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低组miR-182-5p mRNA表达水平高于circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白表达水平均低于circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组MKN-45细胞侵袭数、迁移率均高于circFOXM1敲低组,均低于circFOXM1过表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组MKN-45细胞侵袭数、迁移率均高于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低小鼠组MKN-45细胞增殖率低于对照小鼠组及circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,肿瘤体积及肿瘤质量均小于对照小鼠组及circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1过表达小鼠组MKN-45细胞增殖率高于对照小鼠组、肿瘤体积及肿瘤质量均大于对照小鼠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。野生miR-182-5p+circFOXM1过表达组相对荧光素酶活性低于野生miR-182-5p+空载组(P<0.05)。野生SMAD7+miR-182-5p mimic组相对荧光素酶活性低于野生SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组(P<0.05)。结论敲低circFOXM1可经上调miR-182-5p而抑制表达SMAD7,从而抑制胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及其体内肿瘤生长,可作为胃癌的新型标志物。

M204和M209-7硫化胶在推进剂中的老化性能变化预测

进行了乙丙胶M 2 0 4和M 2 0 9 7在推进剂中的加速老化试验 ,经过对试验数据的处理 。

人参皂苷Rb1通过载脂蛋白M/线粒体凋亡途径对肝癌的影响及机制研究

目的:探究载脂蛋白M(ApoM)/线粒体凋亡在肝癌中的作用,以及人参皂苷Rb1(Rb1)通过ApoM/线粒体凋亡途径对肝癌影响的潜在机制。方法:生物信息学分析筛选ApoM在肝癌中的差异性表达及临床验证;分子对接技术确定Rb1与ApoM的靶向结合,体外培养人肝癌细胞(HepG2),并进行细胞活力检测(CCK-8)筛选Rb1最佳干预浓度,克隆实验用于检测HepG2细胞的增殖情况,划痕实验用于检测HepG2细胞的迁移能力,采用蛋白质印迹法(Western Blotting)检测ApoM及线粒体凋亡相关基因Bcl2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)蛋白表达,实时萤光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测ApoM及线粒体凋亡相关基因Bax、Bcl2、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达水平。结果:生存分析发现ApoM低表达肝癌预后更差,分子对接提示Rb1与ApoM之间具有较高亲和力,克隆及划痕实验提示Rb1有效抑制HepG2细胞增殖,Western Blotting及RT-qPCR验证Rb1可以干预线粒体凋亡相关基因蛋白和mRNA表达。结论:揭示了ApoM/线粒体凋亡在肝癌中发挥重要作用,人参皂苷Rb1可能通过ApoM/线粒体凋亡途径影响肝癌的可能潜在机制。

肿瘤型M2丙酮酸激酶与癌类抗原19-9联合检测在胰腺癌诊断中的应用

目的:探讨肿瘤型M2丙酮酸激酶(TumorM2-PK,TuM2-PK)、糖类抗原19-9(CA19-9)在胰腺癌中的表达特性。方法:采用ELISA法分别检测50例胰腺癌患者、35例胰腺炎患者及80名健康体检人血中TuM2-PK、CA19-9含量。结果:胰腺癌患者血中TuM2-PK、CA19-9值分别是(164.9±41.3)U/mL、(630.1±200.3)U/mL。在胰腺癌的诊断中单独检测时TuM2-PK、CA19-9敏感性分别为75%、74.5%,特异性分别为90%、85%,联合测定敏感性、特异性分别达到82.3%、100%。结论:联合检测TuM2-PK、CA19-9有助于提高对胰腺癌诊断的特异性和敏感性。

肺腺癌中叉头框M1与基质金属蛋白酶-2、-9的表达及意义

目的应用免疫组化方法检测肺腺癌中叉头框(FOX)M1和基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,分析其意义。方法 58例行肺腺癌根治手术患者的术后标本作为观察组,36例正常肺组织作为对照组。采用免疫组化SP法检测两组中FOXM1、MMP-2和MMP-9的表达。结果FOXM1、MMP-2和MMP-9在两组中的表达差别有统计学意义。观察组中FOXM1、MMP-2和MMP-9的阳性率与肿瘤的淋巴结转移和淋巴血管浸润密切相关,FOXM1的阳性率与肿瘤的大小密切相关,MMP-2和MMP-9的阳性率与肿瘤的大小无关,FOXM1、MMP-2和MMP-9的阳性率均与患者的性别和年龄无关。线性相关分析显示观察组中FOXM1和MMP-2、FOXM1和MMP-9的表达具有正相关性。结论肺腺癌中FOXM1、MMP-2和MMP-9高表达对促进肿瘤的形成和迁移有重要作用。

胃癌患者HLA-I、B7-1、β_2m的表达

目的 探讨HLA I、β2 m、B7 1分子在肿瘤发生、发展中的作用。方法 流式细胞技术检测胃肿瘤细胞和外周血淋巴细胞HLA I、β2 m、B7 1分子的表达 ;放射免疫技术 (RIA)检测血清中 β2 m的含量。结果 ①胃癌细胞表面HLA I分子表达明显降低。②胃癌细胞表面B7 1分子表达明显降低或缺如。③β2 m在肿瘤细胞上的表达明显增高 ;作相关分析发现 ,β2 m与HLA I的表达呈负相关关系 (r=- 0 4 70 ,P <0 0 5 )。④在外周血淋巴细胞上各指标的表达情况 ,HLA I表达丰富 ,胃癌患者与正常人之间无显著性差异 ;B7 1的表达微弱 ,胃癌患者的表达低于正常人 ;β2 m的表达丰富 ,胃癌患者的表达高于正常人 ;⑤血清中 β2 m的含量 ,胃癌患者高于正常人 ,血清中 β2 m的含量与外周血淋巴细胞β2 m表达有正相关关系 (r=0 5 4 6 ,P <0 0 5 )。结论 肿瘤细胞低表达HLA I和B7分子是肿瘤发生、发展的重要机制 ;β2 m在肿瘤的诊断、治疗和预后判断有一定价值。

发动机排气门用钢5Cr21Mn9Ni4N中的M_7C_3相与热裂纹原因探讨

分析和测定了５Ｃｒ２１Ｍｎ９Ｎｉ４Ｎ钢中Ｍ７Ｃ３相的形貌特征及化学组成，并对钢中钙含量与Ｍ７Ｃ３相及铸、锻件热裂纹的关系进行了探讨。当该钢中钙含量大于０．００６８％及铸锭冷却过缓时，就易在该钢中形成大而脆的Ｍ７Ｃ３的晶界薄膜，使铸、锻件常常出现热裂纹。

系统性红斑狼疮患者血清基质金属蛋白酶-9浓度变化的Meta分析

目的对系统性红斑狼疮(SLE)患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的浓度变化进行系统评价。方法使用循证医学文献分析方法,从CBM、CNKI、维普科技期刊数据库及Pubmed文献数据库中检索有关SLE患者血清MMP-9浓度的文献,使用Rev Man5.0软件进行Meta分析。结果共有7篇文献入选,Meta分析结果显示SLE患者血清MMP-9浓度与健康对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清MMP-9浓度不足以用作SLE协助诊断及疗效判断的指标。

基于S7-200PLC的M7130磨床电气控制线路改造

阐述了怎样利用西门子S7-200PLC改造M7130平面磨床电气控制线路,给出了控制系统硬件配置和主要控制程序。经过改造,电气故障减少,生产效率明显提高。

瞬时受体电位M7通道与血小板源性生长因子和5-HT促进大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖相关性的研究

目的:探讨瞬时受体电位M7通道(transient receptor potential melastatin 7,TRPM7)在血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)和5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)诱导的肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)异常增殖中的作用。方法:利用贴块法和酶解法分离大鼠PASMCs。采用RT-PCR、Western blot和全细胞膜片钳技术观察TRPM7在PASMCs中的功能性表达。利用TRPM7阻断剂2-APB,采用MTT的方法检测TRPM7对PDGF和5-HT诱导的PASMCs异常增殖的作用。结果:RT-PCR、Western blot结果显示,TRPM7在大鼠PASMCs中有mRNA和蛋白表达。利用膜片钳技术检测到TRPM7电流,且PDGF可上调TRPM7内、外向电流。100μmol·L-12-APB可抑制PDGF和5-HT引起的大鼠PASMCs异常增殖。结论:TRPM7可能参与PDGF和5-HT诱导的大鼠PASMCs的增殖,有可能成为肺动脉高压临床治疗的新靶点。

H7N9病毒的M1基因序列分析及原核表达

目的 克隆H7N9禽流感病毒M1并在原核细胞中表达,为进一步研究其生物学特性、免疫学功能及血清学检测奠定基础。方法 用PCR方法从禽流感上海分离株A/Shanghai/4664T/2013（H7N9）c DNA扩增M1基因,并克隆到载体p MD18-T中。经测序证实后,用EcoRⅠ/NdeⅠ双酶切,亚克隆到原核表达载体p ET28a,并转化E.coli BL21（DE3）菌株。取工程菌,用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE鉴定及western blot检验。结果 （1）经PCR、测序和酶切鉴定,成功克隆了禽流感H7N9 M1基因;（2）经IPTG诱导的重组质粒p ET28a-M1表达出约为28 k Da的融合蛋白,与预期结果相符;（3）对H7N9型禽流感M1基因序列分析表明,与2013年暴发的H7N9型禽流感病毒M1基因核苷酸序列同源性在95.4%-100%,与2006-2011年间暴发的H7N9型流感病毒M1基因序列同源性在69.0%-89.6%,2013年感染人的H7N9型流感病毒与此前暴发的该型流感分离株属于不同的进化分支。结论 成功克隆了禽流感H7N9病毒的M1基因,并在E.coli中得以表达。

FOXM1和MMP-9在肝细胞肝癌组织中的表达及意义

目的研究叉头蛋白M1（FOXM1）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在肝细胞肝癌（HCC）及癌旁组织中的表达，探讨二者的相关性及其与肝癌转移的关系。方法选取免疫组织化学SABC法检测52例HCC组织标本（病变组）和34例癌旁标本（对照组）。结果相比对照组，FOXM1和MMP-9在HCC组织中有明显的过度表达。FOXM1和MMP-9在HCC组织中阳性表达率分别为67．31％和73．07％。两者表达的等级相关性采用Spearman秩相关分析，rs为0．316，P〈0．05。FOXM1和MMP-9在HCC组织中的表达呈正相关。结论FOXM1和MMP-9可能对HCC的发生及转移有促进作用，可能是潜在的治疗靶点。