运动对2,3,7,8-TCDD持续染毒大鼠肝脏LXRa蛋白、ACC1、FAS、SCD1 mRNA表达的影响

研究运动对2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-TCDD)持续染毒大鼠肝脏脂质合成代谢关键酶乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、脂肪酸合成酶(FAS)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)m RNA及转录因子肝X受体a(LXRa)蛋白表达的影响,探讨环境污染物引发代谢性疾病的发病机制,为运动锻炼防控环境健康风险提供理论支持。将24只8周龄雄性大鼠随机分为对照组(C组)、染毒组(T组)、运动染毒组(ET组)。T、ET组腹腔注射首剂量6.4μg·kg-1(以单位体重计)的2,3,7,8-TCDD,之后每隔1周给予上述剂量的21%持续染毒,连续7周。ET组尾部负重(5%体重)进行游泳运动,每周5 d,每次30 min。8周后处死动物,计算肝脏相对重量,检测肝脏甘油三酯(TG)含量,实时荧光定量PCR检测肝脏ACC1、FAS、SCD1 m RNA表达,免疫印迹法(Western Blot)检测肝脏LXRa蛋白表达。结果显示8周2,3,7,8-TCDD持续染毒可显著增加肝脏脂质合成代谢关键酶ACC1、FAS、SCD1 m RNA及转录因子LXRa蛋白表达,8周游泳运动可显著降低染毒大鼠ACC1、FAS、SCD1 m RNA及LXRa蛋白表达。上述结果表明2,3,7,8-TCDD可以引起大鼠肝脏LXRa蛋白表达增高,进而LXRa通过调控靶基因ACC1、FAS、SCD1 m RNA的表达,造成脂质代谢紊乱,肝脏甘油三酯沉积,而有氧运动降低了肝脏中脂质的沉积,提示运动干预可以改善二噁英类污染物造成的肝脏脂质代谢紊乱。

TCDD宫内暴露致雄性子代大鼠生殖毒性研究

目的:探讨2-3-7-8四氯二苯并二噁英(2-3-7-8 Tetrachlorodibenzo-p-Dioxin,TCDD)宫内暴露对雄性子代生殖毒性的影响及机制。方法:成功交配后,将母鼠随机分组。高剂量组(0.5μg/kg)、低剂量组(0.1μg/kg)和溶剂对照组,每组各6只,TCDD组及对照组于孕8~14 d(gestation day 8-14,GD8-14)采用灌胃方式分别给予TCDD及玉米油处理。孕鼠自然分娩,测量雄性仔鼠肛门至生殖器的距离(anal to genital distance,AGD);计算睾丸的脏器系数;利用精子质量分析仪对仔鼠精子的质量及数量进行分析测定;酶联免疫吸附法对雄性子代血清睾酮(testosterone,T)水平进行测定;测定凋亡相关蛋白Bax、Bcl2、Caspase-3的表达水平。结果:0.1μg/kg组、0.5μg/kg组仔鼠与对照组仔鼠相比,AGD[(1.49±0.04)cm、(1.32±0.01)cm和(1.21±0.02)cm]有所缩短(P=0.000),精子数目[(72.33±4.46)×10^6个/mL、(63.67±3.44)×10^6个/mL、(45.33±5.47)×10^6个/mL]与精子活率[(78.53±1.26)%、(64.40±3.14)%、(53.87±3.65)%]明显降低,精子畸形率[(2.17±0.75)%、(4.83±0.75)%、(8.00±1.10)%]升高(P=0.000),血清中T水平[(2.68±0.06)ng/mL、(2.38±0.08)ng/mL和(2.10±0.09)ng/mL]明显下降(P=0.000),差异均有统计学意义,0.5μg/kg TCDD组雄性仔鼠的睾丸质量(P=0.001)和睾丸脏器系数(P=0.004)降低的差异有统计学意义;睾丸组织细胞Bax蛋白相对表达量(0.836±0.004、1.185±0.004、1.414±0.001)随染毒剂量的递增而上升(P=0.000),Bcl-2(1.368±0.053、1.108±0.040、0.751±0.022)则相反(P=0.001),同时,0.5μg/kg TCDD染毒组Pro-Caspase-3蛋白表达明显降低,但CleavedCaspase-3蛋白表达明显增加(P=0.000)。结论:宫内暴露TCDD可使雄性仔鼠出现雌性化特征,影响雄性仔鼠生育能力,对雄性子代具有生殖毒性,其机制可能与仔鼠睾丸组织细胞增殖-凋亡失衡和细胞凋亡的线粒体通路被激活有关。

TCDD宫内暴露对雄性子代睾丸组织病理学形态和功能的影响

目的通过设置日常接触（0．2μg／kg·bw）和子代最高非致畸（0．8μg／kg·bw）这两个极限剂量，探讨胚胎性腺性别决定期宫内2，3，7，8-四氯二苯并二嗯英（TCDD）暴露对子代成年雄性大鼠睾丸形态、精子发生及血清睾酮、雌二醇水平的不同影响。方法孕sD大鼠随机分为TCDD染毒组（0．2和0．8μg／kg·bw）和对照组（玉米油＋二甲基亚砜），于GD8～14天每日定时灌胃染毒。测定90日龄成年雄性子代的体重增重、睾丸总重；睾丸组织切片苏木素一伊红（HE）染色后测量睾丸生精细胞层厚度，计算睾丸间质细胞密度，并使用Johnsen’s Score对睾丸的精子发生进行评价；化学发光法测定血清中睾酮及雌二醇的水平。结果（1）0．8μg／kg·bw组成年雄鼠睾丸总重明显低于对照组（P〈0．05），0．2μg／kg·bw剂量组睾丸总重和体重增加量与对照组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）；（2）两个TCDD组睾丸Johnsen’s Score得分均低于对照组（P〈0．05），0．8μg／kg．bw组生精细胞层厚度明显低于对照组（P〈0．05），睾丸问质细胞密度组间差异无统计学意义；（3）两个TCDD组成年雄鼠血清雌二醇水平明显下降（P〈0．05），睾酮水平组间差别无统计学意义。结论胚胎性腺性别决定期内，孕鼠日常接触剂量和高剂量TCDD暴露均可造成成年雄鼠睾丸组织病理学形态的改变，睾丸生精细胞层厚度变薄，精子发生受损，可能影响睾丸精子生成，造成雄性子代生殖能力降低。