淀粉样前体类蛋白2-C端不同片段对S100A9蛋白表达的影响

[目的]探讨淀粉样类前体蛋白2-C端不同片段(APLP2-CTFs)对S100A9蛋白表达的影响.[方法]将pEGFP-APLP2-C57,C50,C31转染BV2细胞,采用蛋白印迹方法和RT-PCR方法检测S100A9蛋白表达和mRNA水平.[结果]转染pEGFP-APLP2-C57,C50,C31的细胞中,S100A9蛋白表达和mRNA水平均增高,与空载体转染组比较差异具有统计学意义(P<0.05).[结论]转染APLP2-CTFs使S100A9蛋白表达和mRNA水平均增高.

胰岛素样生长因子1降低tau蛋白磷酸化作用机制的研究

目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)对6样淀粉蛋白(A6)导致大鼠PC1 2细胞tau蛋白磷酸化的保护作用及其机制。方法实验分为预处理1组、2组、3组、模型组、对照组、保护组和氯化锂组。MTT法观察不同浓度IGF-1对PC12细胞存活率的影响。Western blot法检测Aβ_(1-40)处理后PC12细胞tau蛋白磷酸化、总tau蛋白和糖原合成激酶3β(GSK-36)及GSK-3β Ser^9的表达情况。结果 tau蛋白Ser^(396)、Ser^(199/202)位点磷酸化水平在Aβ_(1-40)诱导3 h开始增高,1 2 h达高峰。与对照组比较,模型组GSK-3β明显升高,GSK-3β Ser^9明显降低(P<0.05);与模型组比较,氯化锂组及保护组tau蛋白Ser^(396)、Ser^(199/202)位点磷酸化水平和总tau蛋白明显降低(P<0.05);GSK 36明显降低,GSK-3β Ser^9明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论 Aβ_(1-40)主要通过激活GSK-3β使tau蛋白的磷酸化水平增高。IGF-1有抑制GSK-3β的活性,降低Aβ_(1-40)所诱导的PC12细胞tau蛋白过度磷酸化的作用。

二苯乙烯苷对Aβ25-35致NG108-15损伤的保护作用

目的观察二苯乙烯苷对Aβ25-35诱导损伤的NG108-15细胞生长、分化的影响。方法以Aβ25-35诱导NG108-15细胞建立痴呆细胞模型后加入二苯乙烯苷培养,观察NG108-15细胞的生长状态、存活率、突起率及突起平均长度。结果与细胞模型组相比,二苯乙烯苷组能在一定程度上抑制Aβ25-35对痴呆细胞的损伤作用,细胞生长状态良好,细胞存活率、突起率及突起平均长度与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论二苯乙烯苷对Aβ25-35诱导的NG108-15细胞损伤具有保护作用。

搭建基于ROCKS的计算机集群系统虚拟筛选13位淀粉样前体蛋白分泌酶1抑制剂

目的 搭建价格便宜的计算机集群用于大规模药物虚拟筛选β位淀粉样前体蛋白分泌酶1（BACE-1）抑制剂.方法 对32台普通个人计算机（PC）进行安装部署Rocks4.3集群操作系统,使用系统自带的默认资源管理软件Sun Grid Engine（SGE）,利用AutoDock 4.0在PC集群上进行大规模的虚拟筛选BACE-1抑制剂.结果 针对老年性痴呆发病的关键酶BACE-1成功地虚拟筛选了Sigma公司100000个小分子化合物数据库,发现了2个具有开发潜力的苗头化合物.其解离常数分别为303.36和1.79 nmol/L,半数抑制浓度为（91.0±3.5）和（73.0±4.8）μmol/L.结论 利用普通计算机集群系统可以象高性能计算机一样完成药物虚拟筛选工作.

阿托伐他汀对Aβ_(1-42)诱导的大鼠AD模型保护作用及其机制研究

目的观察阿托伐他汀(atorvastatin,Ato)对Aβ1-42诱导的AD大鼠学习记忆功能、炎症因子释放以及突触素(synaptophysin,SYP)和磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达的影响及机制。方法选用健康SD大鼠60只,随机分为4组:正常对照组、Aβ1-42组、Ato+Aβ1-42组、Ato组,每组15只,采用侧脑室注射给药。应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测AD大鼠海马组织上清液内白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)含量;Morris水迷宫实验观察AD大鼠的行为学变化;Western blot法检测AD大鼠海马突触素(synaptophysin,SYP)、pJNK蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,脑室注射Aβ1-42后大鼠出现明显的学习记忆障碍,即逃避潜伏期明显延长,原平台象限游泳时间占总游泳时间百分比明显降低(P<0.01);海马组织上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量明显增加(P<0.01);SYP蛋白表达量明显减少(P<0.01);pJNK蛋白表达水平明显增加(P<0.01)。Ato给药后可明显对抗Aβ1-42引起的大鼠学习记忆障碍,抑制Aβ1-42引起的IL-1β、IL-6、TNF-α含量(P<0.05,P<0.01)、SYP蛋白表达增加(P<0.01)及p-JNK蛋白表达水平明显减少(P<0.05)。结论 Ato能够明显改善Aβ1-42引起的AD大鼠学习记忆障碍、炎症细胞因子释放增加及SYP蛋白表达降低,这种保护作用可能与Ato抑制JNK信号转导通路的激活有关。

5-脂氧合酶与阿尔茨海默病

5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)是催化花生四烯酸(arachidonic acid,AA)生成5-羟基-6,8,11,14-二十碳四烯酸(5-hydroperoxy-6,8,11,14-eicosatetraenoic acid,5-HPETE)和各种白三烯(leukotrienes,LTs)类物质的关键酶。近年来研究显示,5-LOX参与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的病理生理过程。抑制5-LOX可以降低β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)的沉积、tau蛋白磷酸化、减轻神经炎症反应和调节突触功能,改善AD的认知功能障碍。该文就5-LOX与AD相关性研究进展进行综述。