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云南3个不同地区水稻矮缩病毒S8片段的序列分析 被引量:5
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作者 彭潞波 魏春红 +6 位作者 方琦 李婷婷 董家红 苏晓霞 丁铭 张仲凯 李毅 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S1期21-24,共4页
用RT-PCR方法从云南昆明、玉溪和陆良3个地区的水稻样品中扩增到水稻矮缩病毒S8全长片段,核苷酸测定及序列分析表明,水稻矮缩病毒云南昆明、玉溪及陆良分离物S8片段全长均为1356 bp,含一个1266 bp的ORF,编码421个氨基酸.核苷酸和氨基酸... 用RT-PCR方法从云南昆明、玉溪和陆良3个地区的水稻样品中扩增到水稻矮缩病毒S8全长片段,核苷酸测定及序列分析表明,水稻矮缩病毒云南昆明、玉溪及陆良分离物S8片段全长均为1356 bp,含一个1266 bp的ORF,编码421个氨基酸.核苷酸和氨基酸同源性分析表明,4个中国分离物S8片段之间的核苷酸同源性为97.9%,其编码的氨基酸同源性为98.6%;4个中国分离物与日本分离物的S8片段核苷酸同源性和氨基酸相似性分别为94.7%和98.1%.昆明、陆良、玉溪和福建分离物应属同一株系,而日本分离物应属另一株系. 展开更多
关键词 水稻矮缩病毒 S8片段 同源性分析
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Sequence Analysis of Segment 8 of Five Chinese Isolates of Rice Gall Dwarf Virus and Expression of a Main Outer Capsid Protein in Escherichia coli 被引量:2
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作者 Ming-rong DENG Xiao-lei RUAN Fu-xiu LIU Qin ZHAO Hua-ping LI 《中国病毒学》 CSCD 2007年第4期294-300,共7页
The rice gall dwarf disease, caused by the Rice gall dwarf virus (RGDV) is a serious disease occurring in rice in many regions of Guangdong province. As a basis to control the disease we have studied the genomic diver... The rice gall dwarf disease, caused by the Rice gall dwarf virus (RGDV) is a serious disease occurring in rice in many regions of Guangdong province. As a basis to control the disease we have studied the genomic diversity of a variety of isolates from different locations. Genome segment 8(S8), encoding a main outer capsid protein (Pns8) of RGDV five isolates (BL, CH, DQ, GZ, XY) from Guangdong province was cloned and sequenced. The results revealed that all the S8 segments of the five isolates consisted of 1 578 nucleotides and had a single open reading frame (ORF) extending for 1 301 nucleotides from nucleotide 21 which encoded a polypeptide of 426 amino acids with an estimated molecular weight of 47.4 kDa. The S8 full-length sequence and the ORF sequence shared 97.3%-98.8% and 97.3%-99.1% nucleotide sequence identities within the five Chinese isolates, and shared 94.8%-95.6% and 95.0%-96.0% identities with those of the Thailand isolate respectively. The deduced amino acid sequence of Pns8 in GZ isolate was identical to that in the Thailand isolate, while the amino acid sequence variability of Pns8 within five Chinese isolates ranged from 0.5% to 2.1%. These results indicate that the S8 segment of RGDV is highly conserved in different isolates from different locations. The S8 cDNA from the XY isolate was cloned into the plasmid vector pET-28b(+) and a fused expression protein with an apparent molecular mass of 51kDa was specifically detected in an analysis of Escherichia coli Rossetta(DE3)Ⅱcells. To our knowledge, this is the first report on analysis of the RGDV segment 8 sequence and genetic comparison of different RGDV isolates and their protein expression. 展开更多
关键词 序列分析 8片段 水稻矮化病毒 大肠杆菌 原核表达 核衣壳蛋白
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番茄E8基因启动子的克隆及其在拟南芥中的表达 被引量:1
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作者 张艳云 林卫 +2 位作者 李唯 马静芳 王旺田 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期113-116,124,共5页
利用PCR技术从番茄基因组DNA中克隆长约1.1kb的E8基因启动子与517bp的E8基因片段,将其二者连接构建植物表达载体,导入农杆菌,通过花序侵染法转化拟南芥,得到转基因拟南芥。用RT-PCR分析转基因拟南芥中E8基因启动子驱动E8基因小片段的结... 利用PCR技术从番茄基因组DNA中克隆长约1.1kb的E8基因启动子与517bp的E8基因片段,将其二者连接构建植物表达载体,导入农杆菌,通过花序侵染法转化拟南芥,得到转基因拟南芥。用RT-PCR分析转基因拟南芥中E8基因启动子驱动E8基因小片段的结果表明,E8基因小片段mRNA仅在转基因拟南芥长角果中转录,根、茎、叶、花中不转录,提示E8基因的1.1kb启动子在异源植物拟南芥中仍具有驱动外源基因果实特异性表达的特性。 展开更多
关键词 E8启动子 拟南芥 E8基因小片段 基因表达
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小亚璃眼蜱4D8基因在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析 被引量:1
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作者 赵金国 刘爱红 +1 位作者 殷宏 罗建勋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期375-379,共5页
为进行抗小亚璃眼蜱疫苗的研究,采用PCR方法从重组质粒pGEM-T-pHyaa4D8中克隆了pHyaa4D8分子的基因片段,构建了真核融合表达载体pPIC9K-pHyaa4D8,在毕赤酵母中进行表达,并对重组酵母菌的发酵条件进行了优化。结果表明,表达出约19ku的目... 为进行抗小亚璃眼蜱疫苗的研究,采用PCR方法从重组质粒pGEM-T-pHyaa4D8中克隆了pHyaa4D8分子的基因片段,构建了真核融合表达载体pPIC9K-pHyaa4D8,在毕赤酵母中进行表达,并对重组酵母菌的发酵条件进行了优化。结果表明,表达出约19ku的目的蛋白,诱导表达的最佳时间是72h。Western-blot分析结果显示,表达产物能被半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺抗原免疫兔血清识别,在19ku左右出现目的条带,说明表达的目的蛋白具有反应活性。 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 4D8基因片段 真核表达 毕赤酵母
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