8-氯腺苷酸诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡的实验研究

本研究探究8-氯腺苷酸对多发性骨髓瘤细胞的可能作用。以多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞为体外模型,在观察8-氯腺苷酸对细胞生长、活力及形态学影响的基础上,应用流式细胞术检测细胞DNA含量分布和细胞表面Annexin-V的含量,以DNA凝胶电泳技术评判细胞凋亡与否,并应用Western blot检测药物处理前后细胞内细胞周期调控蛋白cylinE和CDK2的变化。结果表明:低浓度8-氯腺苷酸(1-30μmol/L)能够明显地抑制RPMI8226细胞的生长,显著降低其细胞活力,且呈时间和浓度依赖性。进一步细胞形态学观察、流式细胞术及DNA凝胶电泳分析显示,这些浓度的8-氯腺苷酸诱导RPMI8226细胞凋亡。Western blot检测表明,8-氯腺苷酸可通过影响细胞周期调控蛋白cylin E和CDK2的表达而干扰细胞增殖。结论:8-氯腺苷酸能够有效地抑制多发性骨髓瘤细胞生长并诱导其凋亡。

8-氯腺苷酸诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡及三氧化二砷的催化作用

目的探究8-氯腺苷酸（8．CI—cAMP）对多发性骨髓瘤（MM）细胞的作用和三氧化二砷（Asz0，）对其影响。方法以MM细胞株RPMI8226和U266细胞为体外模型，应用形态学和流式细胞术检测细胞DNA含量分布和细胞凋亡。以罗丹明染色检测线粒体跨膜电位，并以金氏公式评价8-Cl-cAMP和As：0，之间的协同效应。结果1～30mol／L8-C1-cAMP能够明显抑制RPMI8226和U266细胞的生长，并显著降低其细胞活力，呈时间和浓度依赖性。细胞形态学和流式细胞术分析显示，8-Cl-cAMP诱导骨髓瘤细胞凋亡并伴有线粒体跨膜电位的崩塌。As2O3能促进RPMI8226细胞凋亡，但与8-Cl-cAMP无协同作用。结论8-Cl-cAMP能够在体外有效地抑制MM细胞生长并诱导其凋亡，线粒体可能是8-Cl-cAMP诱导凋亡的靶点之一，As2O3催化了这个凋亡过程。

8-氯-环腺苷酸对人膀胱癌细胞中野生型p53、突变型p53 mRNA表达的影响

目的探讨cAMP类似物8-氯-环腺苷酸（8-Cl-cAMP）对人原代培养的膀胱癌细胞中野生型p53（wtp53）、突变型p53（mtp53）mRNA表达的影响。方法原代培养膀胱癌细胞,运用免疫组化及原位杂交方法检测膀胱癌细胞中wtp53、mtp53 mRNA的表达。结果8-Cl-cAMP处理后的膀胱癌细胞中mtp53 mRNA表达水平明显低于未处理组,而经8-Cl-cAMP处理后的膀胱癌细胞中wtp53 mRNA表达水平则明显高于未处理组,两组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论8-Cl-cAMP可抑制膀胱癌细胞中mtp53 mRNA,上调wtp53mRNA表达水平,进而抑制肿瘤细胞的分裂和增殖。