8-溴-环磷酸腺苷和TGF-α在PCOS患者颗粒细胞中的作用

目的探讨8-溴-环磷酸腺苷(8-Bromo-cyclic adenosine monophosphate 8-Br-cAMP)和转化生长因子-浕(TGF-浕)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者离体卵巢黄素化颗粒细胞雌二醇(E2)生成的影响。方法收集体外授精-胚胎移植(IVF-ET)时PCOS组和正常组的黄素化颗粒细胞进行体外原代培养,在其培养的不同时间(0、48、120h)以睾酮(10-7mol/L)作为底物,分别添加8-Br-cAMP(2mmol/L)和/或TGF-浕(10ng/ml)于无血清培养液(TCM199)中,共培养3h后收集培养上清、细胞。用放射免疫法(RIA)测定颗粒细胞分泌E2量;用考马斯亮蓝G250/BSA测颗粒细胞蛋白含量,以校正E2含量。结果TGF-浕在0h显著刺激PCOS组颗粒细胞分泌E2的量(P<0.05),而48h、120h均显著抑制PCOS组颗粒细胞分泌E2的量(P<0.05);8-Br-cAMP在0h、48h、120h均显著增强PCOS组颗粒细胞雌激素的产生;8-Br-cAMP显著增强TGF-浕的作用(P<0.05)。结论①8-Br-cAMP加速PCOS患者卵巢颗粒细胞内雄激素向雌激素的转化;②TGF-浕抑制PCOS患者卵巢颗粒细胞内雄激素向雌激素的转化;③TGF-浕的作用是在8-Br-cAMP之后。

8-溴-环磷酸腺苷和雄激素在PCOS患者颗粒细胞中的作用

目的:探讨8-溴-环磷酸腺苷(8-Bromo-cycnc adenosine monophosphate,8-Br-cAMP)和雄激素对多囊卵巢综合征(PCOS)患者离体卵巢黄素化颗粒细胞雌二醇(E2)生成的影响。方法:收集体外授精-胚胎移植(IVF-ET)时PCOS组和正常组的黄素化颗粒细胞进行体外原代培养,在其培养的不同时间(0 h、48 h、120 h)分别添加8-Br-cAMP(2 mmol/L)和/或睾酮(10-7mol/L)于无血清培养液(TCM199)中,共培养3 h后收集培养上清及细胞。用放射免疫法(RIA)测定颗粒细胞分泌E2量;用考马斯亮蓝G 250/BSA测定颗粒细胞蛋白含量,以校正E2含量。结果:睾酮在0 h、48 h、120 h显著刺激PCOS组颗粒细胞分泌E2的量(P<0.05);8-Br-cAMP在0 h、48 h、120 h均不影响PCOS组颗粒细胞分泌E2的量(P>0.05);8-Br-cAMP和睾酮联合作用在0 h、48 h、120 h显著刺激PCOS组颗粒细胞分泌E2的量(P<0.05)。结论:①睾酮促进PCOS患者卵巢颗粒细胞内芳香化酶的作用;②8-Br-cAMP加速PCOS患者卵巢颗粒细胞内雄激素向雌激素的转化;③8-Br-cAMP和睾酮协同调节颗粒细胞芳香化酶活性作用。

8-溴-环磷酸腺苷和异戊烯焦磷酸不改变神经细胞系tau蛋白的表达

目的 分析 8 溴 环磷酸腺苷 (8 Br cAMP)和异戊烯焦磷酸 (IPP)在信号传导水平上对不同神经细胞系tau蛋白表达的影响。 方法 不同的神经细胞先用 8 Br cAMP和IPP处理 3 0min ,然后细胞内的tau蛋白被富集 ,tau蛋白的表达用蛋白印迹方法来检测。 结果 SH SY 5Y细胞仅表达分子量最小的tau蛋白 ;PC12细胞主要表达高分子量tau蛋白 ,但也表达少量异构体型tau蛋白 ;NG10 8 15细胞主要表达tau蛋白 ,含量较少 ,呈现 3种异构体 ,但也表达少量高分子量tau蛋白。在本实验条件下 ,未发现 8 Br cAMP和IPP改变这些细胞tau蛋白的表达。 结论 8 Br

8-Br-cAMP和血小板衍生生长因子对多囊卵巢综合征患者颗粒细胞E_2生成的影响

目的探讨8-溴-环磷酸腺苷(8-Br-cAMP)和血小板衍生生长因子(PDGF)对多囊卵巢综合征(P-COS)患者离体卵巢黄素化颗粒细胞雌二醇(E2)生成的影响。方法收集体外授精-胚胎移植(IVF-ET)时PCOS患者(n=6)和正常对照(n=8)的黄素化颗粒细胞进行体外原代培养,在其培养的不同时间(0h、48h、120h)以睾酮(10-7mol/L)作为底物,分别添加8-Br-cAMP(2mmol/L)和(或)PDGF(10μg/L)于无血清培养液(TCM199)中,共培养3h后收集培养上清、细胞。用放射免疫法测定颗粒细胞分泌E2量;用考马斯亮蓝G250/BSA测颗粒细胞蛋白含量,以校正E2含量。结果与对照组比较,8-Br-cAMP和PDGF在0h、48h和120h均显著刺激PCOS组颗粒细胞分泌E2(P<0.05);8-Br-cAMP和PDGF联合作用在48h、120h显著刺激PCOS组颗粒细胞分泌E2(P<0.05)。结论8-Br-cAMP和PDGF均可加速PCOS患者卵巢颗粒细胞内雄激素向雌激素的转化;8-Br-cAMP和PDGF对颗粒细胞芳香化酶活性的调节作用是一致的。

8-溴环腺苷酸对人膀胱癌BIU-87细胞生长相关基因表达的影响

目的 探讨 8 溴 环腺苷酸 (8 Br cAMP)对人膀胱癌BIU 87细胞生长相关基因表达的影响。方法 体外培育的人膀胱癌BIU 87细胞受终浓度为 1× 10 -5mol/L的 8 Br cAMP处理后 ,用RNA斑点印迹技术研究与细胞生长相关的几种基因表达的变化。结果 实验组较对照组c erbB 2基因表达减弱 (478.5 0± 2 2 1.6 4对 14 0 4.0 0± 342 .2 5 ,P <0 .0 0 5 )、H ras基因表达减弱(5 5 9.0 0± 2 6 7.72对 2 36 3 .2 5± 32 4.0 0 ,P <0 .0 1)、突变型 p5 3基因表达减弱 (14 4 4.83± 35 3 .70对36 5 .0± 5 2 .13 ,P <0 .0 2 ) ;而野生型 p5 3基因表达增强 (85 3 .33± 73 .31对 1318.2 5± 35 3 .70 ,P <0 .0 0 1)。结论 8 Br cAMP可通过影响有关信号传递和细胞周期进程基因的表达而抑制细胞生长。

抑制脊髓NMDAR⁃cADPR⁃RyRs信号通路减弱瑞芬太尼诱发的大鼠术后痛觉过敏

目的探讨NMDAR-cADPR-RyRs信号通路在瑞芬太尼诱发的大鼠痛觉过敏中的作用。方法建立瑞芬太尼诱发(术后)痛觉过敏(RIH)大鼠模型。将大鼠按随机数字表法分为6组(n=8):对照组、手术组、痛觉过敏(RIH)组、0.9%氯化钠溶液组、氯胺酮组和环状二磷酸腺苷核糖(cADPR)拮抗剂组。在术前和术后第1、2、3天检测机械缩足阈值(PWMT)和热缩足潜伏期(PWTL)阈值。Western blot检测脊髓背角神经元中p-NR2B、p-CaMKII和RyR1和RyR3的蛋白水平;酶循环法测量cADPR浓度。结果与手术组相比,RIH组在输注瑞芬太尼后第1和第2天PWMT和PWTL显著降低,同时脊髓背角p-NR2B、p-CaMKII、RyR1、RyR3和cADPR水平显著上调(P<0.05)。鞘内注射氯胺酮或8-Br-cADPR后,与RIH组相比RIH+Ketamin组和RIH+cADPR组的机械痛觉和热痛觉过敏缓解,p-NR2B、p-CaMKII、RyR1、RyR3和cADPR的表达水平下降(P<0.05)。结论抑制NMDAR-cADPR-RyRs信号通路可缓解瑞芬太尼诱发的大鼠术后痛觉过敏。