荧光猝灭法研究8-烷基黄连碱衍生物对溶菌酶的作用机制

通过测定不同温度(12、24、36℃)下8-烷基黄连碱衍生物(Cop-C8-n,n=4、6、8)对溶菌酶的荧光猝灭常数,并计算热力学参数,研究8-烷基黄连碱衍生物对溶菌酶的作用机制。结果表明:8-烷基黄连碱衍生物对溶菌酶的内源性荧光可产生极强的猝灭作用,猝灭作用过程既有静态猝灭又有动态猝灭;热力学参数证明,黄连碱衍生物与溶菌酶的结合作用力主要为疏水作用力,随着烷基链的增长,溶菌酶的紫外吸收逐渐下降;在荧光分析中,24℃下溶菌酶与Cop-C8-8的结合位点为2,结合常数为2.063×107,都显著高于Cop-C8-6和Cop-C8-4。

8-烷基小檗碱衍生物对胆固醇代谢及低密度脂蛋白受体表达的影响

探索了8-烷基小檗碱衍生物的浓度和碳链长度对低密度脂蛋白受体(LDLR)表达和各项降脂指标的影响。通过western blot分析不同浓度8-烷基小檗碱衍生物对HepG2细胞和动物肝脏中LDLR的变化,同时检测动物体内各项生理指标总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)。结果表明在HepG2细胞中,随着碳链的延长,LDLR表达量增加,在所有化合物中,8-十六烷基小檗碱显示了最强的上调LDLR能力;另外,动物实验中8-烷基小檗碱衍生物治疗后血清中的指标TC、TG、LDL-C、HDL-C和肝脏LDLR也均有显著的改变。尤其是与高血脂组比较,8-十六烷基小檗碱分别降低TC、TG、LDL-C为31.9%、14.4%、21.5%,提升了HDL-C 22.8%,更重要的是8-十六烷基小檗碱能使HepG2细胞和肝脏中LDLR表达量分别增加3.3倍和2.89倍(p<0.01)。随着碳链的延长,8-烷基小檗碱衍生物比小檗碱具有更好降脂能力,尤其是8-十六烷基小檗碱通过上调LDLR表达可作为潜在的降脂药物开发。

8-羟基喹啉衍生物的合成

喹啉衍生物是一类具有广泛生物活性的含氮杂环化合物,其作为主体的化合物是化学、医学、材料等领域深入研究的内容之一。本文利用8-羟基喹啉与2-氨基苯并噻唑为原料,合成一种新型的8-羟基喹啉衍生物,并对其进行了结构表征。

黄连生物碱及衍生物对多重耐药铜绿假单胞菌体外抗菌活性的研究

目的分析多重耐药铜绿假单胞菌耐药情况,探究黄连生物碱及8-辛基小檗碱单用及分别与头孢吡肟、左氧氟沙星联用对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抗菌效应。方法收集首都医科大学附属北京友谊医院分离的34株非重复铜绿假单胞菌。菌株由VITEK MS质谱仪鉴定,琼脂稀释法进行体外药敏试验,微量肉汤稀释法检测不同浓度黄连生物碱、8-辛基小檗碱分别与头孢吡肟、左氧氟沙星体外联合抑菌作用,时间-杀菌曲线法测定联合抗菌活性。结果①34株铜绿假单胞菌对阿米卡星(76.5%)、妥布霉素(67.6%)、庆大霉素(50.0%)敏感率较高,对美罗培南(17.7%)、亚胺培南(11.8%)敏感率较低,8-辛基小檗碱、黄连生物碱在512μg/ml浓度时不能抑制多重耐药铜绿假单胞菌的生长。头孢他啶、头孢吡肟、左氧氟沙星、环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦均不敏感。②黄连生物碱、8-辛基小檗碱分别与头孢吡肟、左氧氟沙星联用均可使后两者最低抑菌浓度(MIC)降低。③黄连生物碱、8-辛基小檗碱联合头孢吡肟、左氧氟沙星在体外抑制多重耐药铜绿假单胞菌生长作用较单药显著且体外协同效应随药物浓度的升高而增强。结论氨基糖苷类抗生素对铜绿假单胞菌的抗菌效果较好,8-辛基小檗碱、黄连生物碱与头孢吡肟、左氧氟沙星联用均可增强后者的抑菌效应,降低后者MIC。

8-烷基小檗碱的合成

对比研究了乙醚、二氧六环和四氢呋喃(THF)三种溶剂对8位长链烷基取代小檗碱衍生物中间体合成产率的影响.以四氢呋喃(THF)为反应溶剂,8-癸基和8-月桂基盐酸小檗碱的产率是以乙醚为溶剂的4倍以上.

8-烷基小檗碱同系物体外降糖作用

为研究8-烷基小檗碱同系物在体外对糖代谢的影响,采用与人肝细胞表型相似的HepG2细胞,检测24 h后培养液中葡萄糖消耗量,用MTT法监测细胞增殖的情况.结果表明:8-烷基小檗碱同系物在中糖(11.1mmol/L)状态下可使HepG2细胞的葡萄糖消耗量有不同程度的增加,其中以8-十六烷基小檗碱最为显著.MTT结果显示8-烷基小檗碱同系物对HepG2细胞的增殖有显著的抑制作用.8-烷基小檗碱同系物随着其烷基碳链的延长,其降糖效果越来越明显.

8-烷基小檗碱同系物对蛋白荧光的淬灭作用与其抗菌活性的关系

目的:了解8-烷基小檗碱同系物(Ber-C8-n)对蛋白荧光的淬灭作用与其抗菌活性的关系,探讨Ber-C8-n抗菌活性变化的机制.方法:以牛血清白蛋白(BSA)为实验材料,等渗磷酸缓冲液(PBS)为溶剂,分别将每种Ber-C8-n用PBS溶液配制不同浓度的梯度溶液,测定BSA与不同浓度Ber-C8-n在PBS体系中反应后苯丙氨酸(Phe),色氨酸(Trp)和酪氨酸(Tyr)残基的荧光强度,观察Ber-C8-n对BSA残基荧光的淬灭情况.结果:Ber-C8-n对BSA中3种氨基酸残基的荧光均有不同程度的淬灭作用,并均有明显的剂量效应.比较后发现,Ber-C8-n对BSA中Phe,Trp和Tyr残基荧光的淬灭作用表现出相似规律,即Ber-C8-8同样表现了最强的荧光淬灭作用,其次为烷基链较长或较短的Ber-C8-n,基本上呈现以Ber-C8-8顶点的抛物线.3种残基之间比较,Ber-C8-8对Trp残基荧光的淬灭作用明显强于对Tyr和Phe残基的作用.结论:抗菌活性越强的Ber-C8-n对BSA荧光的淬灭作用也越强,Ber-C8-n抗菌活性的差异可能是不同Ber-C8-n与目标蛋白的富Trp残基区的结合能力差异导致的.

8-氧化黄连碱在金丝马尾连中的存在

金丝马尾连 Thalictrum glandulosissimum 的根,民间常代黄连使用,根的总生物碱具抗癌活性,化学成分曾有报道,我们从中共分离出11个生物碱。实验材料采自云南永胜。用 X4型显微熔点测定仪;Perkin-Elmer983G 型红外光谱化;

8-十六烷基小檗碱的安全性评价

目的探讨新合成化合物8-十六烷基小檗碱的安全性评价。方法将8-十六烷基小檗碱设高中低剂量组,分别以临床拟用剂量的250、100和25倍剂量给大鼠灌胃给药,连续喂养90天,观察该化合物对大鼠的长期毒性反应,分别测量大鼠体重,计算脏器系数,测定血液学和血液生化学指标,并作组织病理学检查。结果长期毒性试验研究表明8-十六烷基小檗碱高、中、低剂量组动物的外观行为,体重,脏器系数,血液生化指标,与空白对照组比较,均无明显差异;病理检查未见与药物毒性相关的明显病变。结论 8-十六烷基小檗碱对大鼠大剂量长期用药无明显毒性,推论临床拟用剂量应是安全的。

8-羟基喹啉两亲配体的合成、表征和单分子成膜性能

设计合成了以8-羟基喹啉为亲水头基的两亲配体2-十二烷氧基羰基-8-羟基喹啉(H2A12)和2-十六烷氧基羰基-8-羟基喹啉(H2A16)。通过元素分析、红外光谱、核磁共振谱和UV-Vis光谱表征鉴定了这两个化合物。H2A12和H2A16及其LB膜可用作电致发光器件的发光层。

8-羟基喹啉制备技术进展

综述了重要有机合成中间体8-羟基喹啉的制备技术如喹啉磺化碱融、氯代喹啉水解、氨基喹啉水解以及Skraup合成法的现状和进展。同时也叙述了8-羟基喹啉的一些重要的衍生物的合成和应用。

烷基-去-血根碱-N^5-甲基衍生物的合成及肿瘤细胞株生长抑制活性评价

采用汇聚合成方式,分别以6-溴-2,3-二羟基苯甲醛、5-硝基-2,3-萘二酚和二溴甲烷为起始原料,经二氧-去-二溴亲核取代反应、还原反应、席夫碱生成反应以及三丁基锡烷和AIBN诱导的自由基关环反应等反应合成2:3,7:8-双亚甲二氧基苯并[c]菲啶;以2:3,7:8-双亚甲二氧基苯并[c]菲啶为中间体,以NaBH4和不同的脂肪酸为烷基化试剂,合成5,6-二氢-2:3,7:8-双亚甲二氧基-N^5-烷基苯并[c]菲啶;以DDQ为氧化剂,在碱性条件下将2:3,7:8-双亚甲二氧基-5,6-二氢-N^5-烷基苯并[c]菲啶氧化芳构化,并经盐酸盐化反应,得到具有系列性特征的目标化合物2,3:7,8-双亚甲二氧基-N^5-烷基苯并[c]菲啶-5-阳离子季铵盐。与阳性对照药物以及天然血根碱对比,本文合成的系列烷基-去-血根碱-N^5-甲基型血根碱类似物在体外显示出明显获得改善的肿瘤细胞株生长抑制活性;在对5种肿瘤细胞株进行的药理实验中,与血根碱比较,目标化合物的活性提高5倍;表明了对血根碱-N^5-甲基进行长链烷基的替换修饰,可以通过增加脂溶性和空间位阻、提高5,6-位亚胺结构的稳定性而改善其肿瘤细胞株生长抑制活性。

8-烷基黄连碱同系物的合成及体外降糖作用

目的合成8-烷基黄连碱同系物并研究其在体外对细胞糖代谢的影响。方法采用与人肝细胞表型相似的HepG2细胞,检测24 h后培养液中葡萄糖消耗量,用MTT法观察细胞增殖情况。结果 8-烷基黄连碱同系物在葡萄糖浓度为10 mmol/L时可使HepG2细胞的葡萄糖消耗量有不同程度的增加,其中以8-己基黄连碱最为显著。8-烷基黄连碱同系物对HepG2细胞增殖有显著的抑制作用。结论首次合成8-烷基黄连碱同系物。8-烷基黄连碱同系物随着其烷基碳链的延长,细胞的葡萄糖消耗量先是增大,当8位烷基链碳原子数超过6时,葡萄糖消耗量逐渐减小。8-已基黄连碱是具有一定潜力的降血糖先导化合物。

8-烷基小檗碱对焦虑模型小鼠行为学及脑组织神经递质的影响

目的研究8-烷基小檗碱的抗焦虑作用,初步探讨其作用机制。方法通过明暗箱和高架十字迷宫实验,观察8-烷基小檗碱对焦虑模型小鼠行为学的影响;采用高效液相-荧光检测器,检测小鼠脑组织内神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的量。结果明暗箱实验结果表明,相对于对照组,8-己基小檗碱、8-辛基小檗碱、8-十二烷基小檗碱和8-十六烷基小檗碱给药后能显著延长小鼠在明箱内的停留时间(P<0.05),8-辛基小檗碱组的穿箱次数显著增多(P<0.05);高架十字迷宫实验结果显示,8-辛基小檗碱组小鼠进入开臂次数百分比和开臂滞留时间百分比明显高于对照组(P<0.05);小鼠脑内神经递质NE、DA和5-HT的量变化以8-辛基小檗碱组最为明显。结论 8-烷基小檗碱具有一定的抗焦虑作用,其作用机制可能与降低脑组织中NE、DA和5-HT的量有关。

8-十六烷基小檗碱与小檗碱的大鼠药代动力学和组织分布比较研究

高效液相色谱法测定小檗碱(BBR)和8-十六烷基小檗碱(8-BBR-C16)在大鼠血浆及组织中的浓度,比较二者的药代动力学规律和组织分布差异,为8-BBR-C16的机制研究及药物开发提供实验数据。大鼠灌胃80mg·kg-1药物后,在药动学实验结果中,与BBR相比,8-BBR-C16的Cmax、AUC0-t分别是BBR的2.8倍和12.9倍,tl/2由3.61 h延长到11.90 h。在组织分布实验结果中,与BBR相比,8-BBR-C16在各种组织的分布浓度均有显著提高,停滞时间明显延长。其在肺中的药物浓度最高,最高浓度达到3 731.82 ng·g-1。8-BBR-C16经衍生化后,在血浆中Cmax及生物利用度显著提高,体内循环时间延长,组织中的药物分布浓度显著提高,分布比例改变,具有较强的肺靶向性。

亲脂性修饰对小檗碱体内调脂活性的影响

目的:观察亲脂性修饰后小檗碱体内调脂活性的变化.方法:以8-烷基小檗碱同系物(Ber-n)为模型化合物,以实验性高脂血症大鼠为实验动物模型,实验分为正常对照组(NC组),高脂对照组(FC组)和小檗碱组(Ber-0组),8-丁基小檗碱组(Ber-4组),8-辛基小檗碱组(Ber-8组),8-月桂基小檗碱组(Ber-12组),8-十六烷基小檗碱组(Ber-16组)5个药物组.实验期间NC组给予普通饲料,FC组和5个药物组均给予高脂饲料.用7g/L羧甲基纤维素钠水溶液作为药物溶剂,5个药物组大鼠每日按125mg/kg分别给予灌胃相应药物,NC组和FC组给予同体积药物溶剂.于给药后10d和25d时测定各组实验大鼠血清总胆固醇(TC)、总三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;实验结束时记录计算各组大鼠肝脏指数,肾脏指数,脾脏指数和胸腺指数.结果:在给药10d后与FC组相比较,各药物组血清TC,TG,HDL-C均有一定程度的修复.HDL-CBer-16组(1.22±0.19)mmol/L与FC组(0.95±0.19)mmol/L相比较差异显著(P<0.05),但各Ber-n组间的差异不明显.当给药25d后,TC值FC组(11.38±3.41)mmol/L与Ber-8组(6.77±3.26)mmol/L相比较差异显著(P<0.05),与Ber-12组(5.24±2.45)mmol/L,Ber-16组(4.78±2.67)mmol/L相比较差异更为显著(P<0.01).TG值FC组(1.05±0.37)mmol/L与Ber-12组(0.64±0.25)mmol/L,Ber-16组(0.66±0.23)mmol/L相比较差异显著(P<0.05).HDL-C值FC组(1.11±0.21)mmol/L与Ber-8组(1.34±0.20)mmol/L差异显著(P<0.05);与Ber-12组(1.49±0.21)mmol/L,Ber-16组(1.48±0.28)mmol/L相比较差异更为显著(P<0.01).各药物组的肝脏指数与FC组相比较明显降低且均有显著差异(P<0.05).结论:随着烷基链长度的增加,Ber-n对血脂异常的修复能力也随之增强,亲脂性的提高有利于小檗碱衍生物体内调脂活性的发挥.

左金方的生物碱类成分及其对肿瘤细胞的细胞毒活性

目的研究左金方（由黄连和吴茱萸按质量比6：1组成）中的生物碱类成分并评价其对人消化道肿瘤细胞的细胞毒活性。方法采用硅胶、SephadexLH-20等柱色谱方法进行分离纯化，通过理化性质和谱学数据鉴定化合物结构；MTT法测定化合物对人胃癌细胞系NCI—N87细胞和人结肠腺癌细胞系Caco-2细胞增殖的抑制活性。结果从左金方70％乙醇提取物的正丁醇溶性部分分离得到了15个生物碱，分别鉴定为吴茱萸次碱（1）、吴茱萸碱（2）、瑞特西宁（3）、黄连碱（4）、吴茱萸果酰胺III（5）、8．三氯甲基-7，8-二氢巴马亭（6）、表小檗碱（7）、8-三氯甲基-7，8-二氢表小檗碱（8）、8-三氯甲基-7．8-二氢黄连碱（9）、巴马亭（10）、小檗碱（11）、1，2，3，4-四氢．1．羰基-β-咔啉（12）、降氧化北美黄连次碱（13）、氧化表小檗碱（14）、紫堇定（15）。化合物1、2、4和11对NCI-N87和Caco-2细胞增殖具有抑制活性，IC50值为12．61～91．18gmol／L。结论化合物8为新化合物；化合物1、2、4和11可能是左金方在消化道局部发挥抗肿瘤作用的主要有效成分。

磐安延胡索的化学成分研究

目的研究道地产区磐安延胡索Corydalis Rhizoma的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱方法进行分离纯化,通过化合物的理化性质和谱学数据鉴定其结构。结果从延胡索95%乙醇提取物中分离得到20个生物碱,分别鉴定为左旋四氢黄连碱(1)、四氢非洲防己胺(2)、延胡索乙素(3)、紫堇球碱(4)、异紫堇球碱(5)、8-三氯甲基-7,8-二氢黄连碱(6)、延胡索甲素(紫堇碱,7)、8-酮基黄连碱(8)、左旋紫堇根碱(9)、去氢延胡索甲素(10)、13-甲基巴马亭红碱(11)、氧化海罂粟碱(12)、原阿片碱(13)、降氧化北美黄连次碱(14)、四氢小檗碱(15)、二去氢海罂粟碱(16)、黄海罂粟灵碱(17)、黄连碱(18)、巴马亭(19)、小檗碱(20)。结论化合物6、9和16均为首次从延胡索中分离得到。首次应用2D NMR技术对化合物6和16的13C-NMR、1H-NMR信号进行了全归属。