8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1基因多态性与食管癌关系

目的研究8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(hOGG1)基因Ser326Cys多态与淮安食管癌易感性的关系.方法采用配对病例-对照的流行病学方法,运用人工修饰双等位基因特异性引物扩增(diASA-AMP)技术分析了106对正常对照和食管癌患者hOGG1基因第326位Ser/Ser、Ser/Cys和Cys/Cys基因型分布,并比较不同基因型与食管癌发病风险的关系.结果对照人群的Ser/Ser、Ser/Cys和Cys/Cys基因型频率分别为19.8%,47.2%和33.0%,与现有的中国人群资料结果相近,等位基因型的测序结果与diASA-AMP结果相符.食管癌病例组、对照组的hOGG1 3种基因型分布的差异无统计学意义(χ2=1.439,P=0.696).携带至少一个hOGG1 326Cys突变基因(Ser/Cys和Cys/Cys)与食管癌危险性无明显相关(OR=1.385;95%CI=0.678～2.823),亦未见hOGG1 Ser 326Cys基因多态与吸烟之间的交互作用.结论 hOGG1 Ser326Cys基因多态与淮安地区食管癌易感性无相关性,在食管癌发病风险上该位点多态与吸烟无明显交互作用;diASA-AMP是特异性较高的单核苷酸多态(SNP)快速检测方法,在人群肿瘤易感基因快速筛检方面有较好的应用前景.

人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1与年龄相关性白内障关系的临床研究

目的探讨与年龄相关性白内障(ARC)患者晶状体上皮细胞(LECs)中参与DNA损伤后碱基清除修复途径的氧化损伤修复基因—人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(HOGG1)水平与ARC的关系。方法收集三种ARC(皮质性、核性、后囊下性)LECs样本,以透明晶状体LECs为对照组,用免疫组化、RT-PCR方法测定HOGG1在LECs的表达情况。结果对照组LECs中可见HOGG1的表达,三种ARC患者LECs中可见HOGG1表达较对照组增高(F=107.62,P<0.01),但三种ARC之间没有统计学差异。对照组与ARC组HOGG1均位于细胞质和细胞核。说明ARC LECs的细胞核和细胞质中HOGG1的表达量上调。结论 HOGG1表达上调参与ARC的发生发展。

8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1、载脂蛋白酶E基因多态性与阿尔茨海默病相关性研究

目的探讨河南汉族人群8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(OGG1)、载脂蛋白酶E(ApoE)基因多态性与阿尔茨海默病的相关性。方法采用聚合酶链反应(PCR)及基因测序检测126例正常对照组和58例阿尔茨海默病患者OGG1基因第326位Ser/Ser、Ser/Cys、Cys/Cys基因型多态分布及ApoEε2、ε3、ε4基因型多态分布。结果与对照组比较,AD组OGG1基因的3种基因型分布总体差异有统计学意义(χ2=6.337,P=0.042),G等位基因频率高于健康对照组(χ2=6.447,P=0.011);AD组ApoE等位基因ε4频率显著升高,呈正关联(χ2=11.722,OR=2.872,95%CI=1.542～5.351,P=0.001)。ApoEε4等位基因不影响OGG1基因型或等位基因的分布频率(P>0.05)。经年龄分层后,AD组OGG1基因分布无差异性(P>0.05),ApoE基因在大于70岁组分布有差异性(χ2=14.163,P=0.001)。结论河南汉族人群中,OGG1 G等位基因可能是AD发病的独立于ApoE之外的危险因素,与年龄无相关性;ApoEε4等位基因是散发性AD的主要危险因素,并与年龄有相关性,ε3等位基因是AD的保护因素。

8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1、环氧合酶2基因多态性与阿尔茨海默病的关系

阿尔茨海默病是一种慢性进行性神经退行性疾病,为老年痴呆最普遍的一种。目前研究认为遗传因素、环境因素和免疫因素等均参与了AD的病理生理过程。家族性AD多呈常染色体显性遗传,与淀粉样前体蛋白(APP)、早老素1(PS1)、早老素2(PS2)基因突变有关。晚发性AD(LOAD)以及散发性AD(SAD)最主要的遗传危险因子是ApoEε4等位基因,但它只与50%的AD有相关,存在其他遗传危险因子。本文就8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1基因、环氧合酶2基因多态性与AD的关系的研究现状及进展做一简要综述。

砷暴露致人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1基因甲基化及DNA氧化损伤

目的了解人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(hOGG1)基因DNA甲基化水平和机体氧化应激及DNA氧化损伤情况与砷中毒的关系。方法以贵州省兴仁县燃煤型砷中毒病区207名砷暴露者为砷暴露组(包括病区非患者46名、砷中毒轻度46名、中度60名、重度组55名),在非砷暴露村选择64名健康村民作为对照组。采集观察对象的外周血,应用甲基化特异性PCR(MSP)法检测其hOGG1基因甲基化水平,化学法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、丙二醛(MDA)含量,尿8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)含量;依据甲基化状态将上述观察对象分为hOGG1基因甲基化组(34名)和hOGG1基因非甲基化组(237名),分析其hOGG1基因DNA甲基化及氧化应激与砷中毒的关系。结果病区非患者、轻、中、重度砷中毒组砷暴露者外周血中hOGG1基因甲基化阳性率分别为4.35,13.04,15.00和29.09%,其显著高于对照组人群外周血中hOGG1基因甲基化阳性率1.56%,且hOGG1基因甲基化阳性率随着砷中毒程度的加重而增加;hOGG1基因甲基化组的血清SOD〔(85±25)kU·L-1〕、GSH-Px〔(70±26)kU·L-1〕活力、尿8-OHdG含量〔(22.5±6.8)μg·L-1〕明显低于非甲基化组〔118±41,171±56和(28±6.5)μg·L-1〕,hOGG1基因甲基化组与非甲基化组血清MDA含量无显著性差异。结论砷暴露可导致人机体hOGG1基因高甲基化和氧化与抗氧化系统失衡,从而引起DNA氧化损伤,是促进砷中毒发生发展的原因之一。

8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1与年龄相关性白内障关系的临床研究

人8‐羟基鸟嘌呤糖苷酶1（HOGG1）是一种修复DNA氧化损伤的重要基因，它可特异地识别并切除D N A氧化损伤的重要产物8‐羟基鸟嘌呤（8‐oxoG），恢复基因组中正常的G∶C配对，从而对损伤DNA进行修复维持机体内环境的稳定［1］。而HOGG1基因的第7外显子的第1245位碱基的C／G多态性即Ser326Cys突变会使其修复能力下降或缺失，相对增加了对DNA 的氧化损伤和致突变性，HOGG1的突变与肿瘤及机体细胞的老化等的发生关系密切［2］。而目前对于 HOGG1基因与年龄相关性白内障关系的研究较少，故本研究在临床上运用分子生物学技术探讨 HOGG1与年龄相关性白内障（A RC ）发生之间的关系，为A RC的预防和治疗提供新的理论依据。

8-羟基鸟嘌呤糖苷酶基因型、生活习惯与食管癌和胃癌

[目的]研究8 羟基鸟嘌呤糖苷酶基因 (hOGG1)型、生活习惯及其相互作用与食管癌、胃癌易感性的关系。[方法]在上消化道癌高发区淮安市进行了一个病例—对照研究(食管癌93例,胃癌107例 ,人群对照200例),调查研究对象的生活习惯 ,以PCR SSCP方法分析hOGG1基因型。[结果]对照组与食管癌组、胃癌组之间的hOGG1基因型频度分布差异无显著意义。在携带hOGG1Ser326Cys或Cys326Cys基因型者中 ,吸烟显著增加食管癌、胃癌发生的危险性。饮茶习惯能降低食管癌、胃癌发生的危险性 ,这种作用在hOGG1Ser326Ser基因型携带者中更明显。[结论]在不同hOGG1基因型携带者中 ,生活习惯与食管癌、胃癌发生的关系有所不同。这些结果表明 ,食管癌、胃癌的发生与生活习惯、hOGG1基因型以及它们的相互作用有关。

ICAM-1和8-OHdG在肾癌组织中的表达及其与临床病理指标的关系

目的:观察ICAM-1和8-OHdG在肾癌组织中的表达情况,并分析两者的表达与肾癌患者临床病理参数之间的关系,探讨其在肾癌发生和进展中的作用。方法:采用免疫组化的方法检测46例肾癌组织和18例远离癌组织的正常肾组织中ICAM-1和8-OHdG的表达,通过阳性染色强度及阳性细胞百分比进行综合评分,观察不同组织者中两者的表达差异,同时分别统计分析ICAM-1和8-OHdG的表达与肾癌患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分期以及是否有淋巴结转移或远处转移等临床病理参数之间的关系。结果:ICAM-1在正常肾组织中的表达多为弱阳性或阴性表达,而在肾癌组织中ICAM-1阳性表达增加(占比82. 6%),且与肿瘤的分化程度、淋巴结转移和远处转移具有显著相关性(P<0. 05或P<0. 01)。绝大多数正常肾组织中8-OHdG呈阴性表达,而肾癌组织中8-OHdG阳性表达增加(占比63%),与肿瘤大小、淋巴结转移和远处转移以及无进展生存期(PFS)之间具有显著相关性(P<0. 05或P<0. 01)。结论:ICAM-1和8-OHdG在肾癌组织中高表达,二者在肾癌的发生和进展中可能发挥着重要的作用。

不同剂量氯沙坦对糖尿病肾病患者尿TGF-1及8-OHdG的影响

目的观察不同剂量氯沙坦对糖尿病肾病(DN)患者尿中转化生长因子-1(TGF-1)及8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)的影响。方法收集48例有明显蛋白尿的2型DN患者,给予氯沙坦50 mg/d治疗8周,之后改为100 mg/d治疗8周,比较治疗前后患者尿TGF-1、8-OHdG水平变化。采用Spearman分析患者尿TGF-1、8-OHdG浓度变化与24 h尿蛋白变化的相关性。结果患者治疗前、50 mg/d治疗后、100 mg/d治疗后,新鲜尿TGF-1、24 h尿8-OHdG的浓度明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。尿TGF-1浓度变化与尿蛋白变化具有相关性(P<0.01)。所有患者对氯沙坦100 mg/d耐受性良好。结论氯沙坦能显著降低2型DN患者尿TGF1、8-OHdG水平,100 mg/d比50 mg/d作用更强,而且副作用无明显增加。

尿TGF-β1、8-OHdG检测在早期糖尿病肾病中的应用价值

目的探讨尿转化生长因子-β1(TGF-β1)及8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)检测在早期糖尿病肾病(DN)中的应用价值。方法选取2019年1—11月该院收治的2型糖尿病患者120例作为研究对象,根据尿微量清蛋白与肌酐比值(ACR)将其分为3组,分别为正常蛋白尿组(ACR<30 mg/g)、微量蛋白尿组(30 mg/g≤ACR<300 mg/g)、大量蛋白尿组(ACR≥300 mg/g)。另选取同期30例健康体检者作为对照组。比较各组TGF-β1、8-OHdG、ACR、血肌酐水平及TGF-β1、8-OHdG单独与联合检测的阳性率。结果与对照组比较,微量蛋白尿组、大量蛋白尿组ACR水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。正常蛋白尿组、微量蛋白尿组、大量蛋白尿组TGF-β1、8-OHdG水平高于对照组,且随尿蛋白水平的增加TGF-β1、8-OHdG水平呈递增趋势,各组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组中TGF-β1、8-OHdG联合检测的阳性率均高于TGF-β1、8-OHdG单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论尿TGF-β1、8-OHdG检测能够较灵敏地反映DN患者早期肾损害,两者联合检测在DN早期筛查中具有一定价值,值得临床推广应用。

孕产妇尿中1-羟基芘水平与孕产妇及新生儿hOGG1和XRCC1基因多态性的研究

目的探讨乌鲁木齐市孕产妇多环芳烃(polyeyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)暴露与孕产妇及新生儿hOGG1和XRCC1基因多态性之间的关系。方法采集乌鲁木齐市某家医院115位孕产妇尿液、静脉血及新生儿脐带血,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)孕产妇与新生儿的hOGG1和XRCC1的基因位点多态性,采用酶水解-液相色谱-质谱联用仪检测孕产妇尿中PAHs内暴露标志物1-羟基芘(1-OH-P)。结果孕产妇尿中1-OH-P浓度为0.340(0.208~0.555)μg/mmol Cr。孕产妇hOGG1326Ser/Cys基因型不同,体内1-OH-P的浓度也不同(P<0.05)。携带不同的XRCC1399Arg/Gln基因型新生儿,其母亲体内1-OH-P的浓度存在统计学差异(P<0.05)。携带不同XRCC1399Arg/Gln基因型的孕产妇,其体内的1-OH-P的浓度差别无统计学意义(P>0.05)。携带不同的hOGG1326Ser/Cys基因型的新生儿,其母亲的体内1-OH-P的浓度无统计学差异(P>0.05)。结论与国内相关研究相比,乌鲁木齐市孕产妇体内的PAHs处于高暴露水平。携带h OGG1326Ser/Cys基因的孕产妇机体在PAHs高暴露环境中DNA损伤更加敏感。

修复基因MTH1与OGG1在H_2O_2诱导的DNA氧化性损伤中的作用研究

背景与目的:利用H2O2作用于Ⅱ型人肺泡上皮细胞A549,分析8-羟基脱氧鸟苷(8-oxo-dG)的形成,探讨修复基因hMTH1与hOGG1在DNA氧化性损伤中的作用。材料与方法:在A549细胞培养液中分别加入终浓度为0、50、100、200和300μmol/L的H2O2孵育不同时间(0、6、12、18和24h)后,利用高压液相色谱串联电化学检测技术、核酸内切酶切割法及RT-PCR技术分析细胞8-oxo-dG水平、8-oxo-dG修复酶活性及hOGG1和hMTH1基因表达水平。结果:与对照组比较,100、200、300μmol/LH2O2浓度时均能使A549细胞DNA的8-oxo-dG水平增高(P<0.05或P<0.01)。200μmol/LH2O2作用12h后8-oxo-dG水平上升到峰值并在24h降至基线水平,8-oxo-dG水平在6～18h处理组显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。而8-oxo-dG修复酶活性在200μmol/LH2O2暴露后12～24h均高于对照组(P<0.05或P<0.01),在18h达到峰值。hOGG1及hMTH1mRNA的表达水平也因H2O2暴露而升高(P<0.05或P<0.01),但峰值在时间上交替出现。结论:H2O2能诱导8-oxo-dG修复酶活性增高,hOGG1及hMTH1在DNA氧化损伤的修复活动中呈现时间上的交替关系。

DNA修复基因OGG1研究进展

细胞正常有氧代谢和外源性物理、化学及生物因素均可使机体产生活性氧自由基,大量研究证实:自由基可攻击DNA形成多种类型的氧化损伤。在众多的DNA氧化损伤中,8-羟基鸟嘌呤(8-oxoguanine,8-oxoG)形成频率最高、致突变性最强,可导致G:C→T:A颠换,该突变与肿瘤的发生发展、机体细胞的老化及某些退行性疾病均有密切关系。体内特异识别8-oxoG并将其切除修复的酶被称为8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(8-oxoguanine,DNA glycosydase),简称OGG1,在人叫做hOGG1。本文将对OGG1的结构与功能、表达与调节、氧化损伤与肿瘤的关系及其研究进展作一概述。

豫北地区人群hOGG1基因型与食管癌易感性的相关研究

目的研究食管癌高发区豫北地区人群8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1（hOGG1）基因Ser326Cys多态性及其与食管癌易感性的关系,以便有效地开展该地区食管癌的检测和预防工作。方法运用PCR-限制片段多态（RFLP）技术,分析了228例正常对照和235例食管癌患者hOGG1基因第326位点Ser/Cys多态性。并比较不同基因型与食管癌发病风险的关系。结果食管癌组和对照组人群中的Cys等位基因频率分别占42.7%和38.6%,无显著性差异,而食管癌组的Cys/Cys基因型频率为23.0%,明显高于对照组的12.3%（2χ=11.67,P=0.003）;与携带Ser/Ser或Ser/Cys基因型者比较,携带Cys/Cys基因型个体患食管癌的风险增加,OR为2.13（95%CI 1.29~3.51）。结论食管癌的发生与hOGG1基因多态性密切相关,检测hOGG1基因型有助于食管癌的预警和预防。

DNA损伤修复酶OGG1/MTH1抑制剂对非洲猪瘟病毒复制的影响

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的一种动物疫病。2018年传入我国后迅速波及国内多个省份,给我国养猪业带来了巨大的冲击。由于对ASFV致病机制了解有限,导致ASF疫苗及抗病毒药物的研发遇到了极大挑战。本课题组前期研究发现,ASFV感染能引起宿主细胞内的氧化损伤应答,并且DNA氧化损伤修复酶在ASFV的感染中发挥重要作用,因此本研究采用RNA干扰、RT-q PCR、Western blotting、红细胞吸附(hemadsorption,HAD)、流式细胞技术等生物学方法,验证8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(8-oxoguanine DNA glycosylase 1,OGG1)/8-羟基鸟嘌呤核苷酸酶1(8-oxoguanine nucleoside triphos-phatase,MTH1)小分子抑制剂对ASFV复制的影响,以评估靶向DNA氧化损伤修复酶的抗ASFV感染效果。本研究为抗非洲猪瘟药物的研发提供了借鉴及参考。

hOGG1基因多态性与川北地区肺癌易感性关系的研究

目的探讨四川北部地区汉族人群8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(hOGG1)基因Ser326Cys位点多态性状况及其与该地区肺癌易感性的关系,并与其他地区人群进行比较。方法采用病例对照研究方法和聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerise chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测四川北部地区肺癌患者125例和非肿瘤患者125例(对照组)hOGG1基因第326位点Ser/Cys基因型分布,并比较不同基因型与肺癌发病危险的关系。结果病例组的Ser/Ser、Ser/Cys、Cys/Cys基因型频率分别为15.2%、27.2%、57.6%,而对照组分别为32.0%、42.4%、25.6%。χ2检验显示两组基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)。与携带Ser/Ser基因型相比,携带Ser/Cys基因型者患肺癌风险增加(OR=1.351,95%CI=0.674～2.707,P=0.397),而携带Cys/Cys基因型者肺癌风险增加3倍(OR=4.737,95%CI=2.384～9.413,P=0.000)。结论 hOGG1基因Ser326Cys多态性可能与四川北部肺癌易感性有关,携带Cys/Cys基因型肺癌风险明显增加。

HOGG1特异性锤头状核酶真核表达载体的构建及鉴定

目的 设计并合成人8 羟基鸟嘌呤 DNA糖苷酶(HOGG1)特异性的锤头状核酶(hammerheadribozyme)基因并构建其真核表达载体。鉴定含有核酶靶基因HOGG1cDNA保守序列的真核表达载体。方法 运用计算机软件人工设计并合成核酶基因(RZ) ,将核酶基因克隆到真核表达载体pcDNA 3 1中,重组子由BamHI和EcoRI酶切,琼脂糖凝胶电泳鉴定及DNA测序证实。含有HOGG1基因cDNA保守序列的真核表达载体经BamHI和EcoRI酶切电泳鉴定。结果 RZ人工合成后与pcDNA 3 1连接,酶切电泳及DNA测序证实合成的核酶基因序列正确并已被准确克隆入pcDNA 3 1的BamHI和EcoRI位点之间,命名为pcDNA 3 1 RZ。1 3kb的HOGG1基因cDNA保守序列准确克隆于pcDNA 3 1的BamHI和EcoRI酶切位点之间,命名为pcDNA 3 1 HOGG1。结论 成功合成HOGG1特异性的锤头状核酶基因并构建了该基因的真核表达载体,以及核酶靶基因的真核表达载体。

甲型H1N1流感病毒致宿主细胞脱氧核糖核酸氧化损伤的研究

目的:通过检测DNA损伤标志物8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxo-dG)在甲型H1N1型流感病毒感染MDCK细胞中的表达,初步探讨甲型H1N1型流感病毒诱导细胞凋亡的脱氧核糖核酸(DNA)损伤机制。方法:MDCK细胞培养后,甲型H1N1流感病毒感染继续培养0h、1h、3h、6h、12h、24h、48h,细胞爬片免疫组织化学方法检测各时间点DNA损伤标志物8-oxo-dG的表达。结果:甲型H1N1流感病毒感染后各时间点实验组MDCK细胞8-oxo-dG的表达均显著高于相应的正常对照组(P<0.05),病毒感染各组间两两比较发现各组间差异显著。结论:甲型H1N1流感病毒感染能造成宿主细胞DNA氧化损伤。

hOGG1基因Ser326Cys位点多态性与糖尿病患者冠脉病变关系的研究

目的:了解糖尿病患者h OGG1基因Ser326Cys位点多态性与冠脉病变之间的关系。方法:入选行冠状动脉造影术的糖尿病患者共323例,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测每位患者的h OGG1基因Ser326Cys位点多态性。同时检测患者血糖、血脂、肾功能等生化指标。根据患者h OGG1基因Ser326Cys多态性分为3组:Cys/Cys基因型(85例)、Ser/Ser基因型(121例)和Ser/Cys基因型(117例)。由2名心血管医师对冠脉造影图像进行分析,按评判标准统计冠脉病变支数、病变复杂程度、Gensini评分和SYNTAX评分。分析h OGG1基因Ser326Cys多态性对h OGG1 mRNA表达和血8-OHd G水平的影响,以及对冠脉病变产生的影响。结果:(1)Cys/Cys基因型、Ser/Ser基因型和Ser/Cys基因型血8-OHd G水平差异显著(P<0.05)。组间两两比较,Cys/Cys基因型高于Ser/Ser基因型和Ser/Cys基因型,差异有统计学意义(P<0.05);而Ser/Ser基因型与Ser/Cys基因型比较,差异不显著(P>0.05)。(2)Cys/Cys基因型h OGG1 mRNA的表达低于Ser/Ser基因型和Ser/Cys基因型(P<0.05)。而Ser/Ser基因型与Ser/Cys基因型比较,h OGG1 mRNA表达差异不显著(P>0.05)。(3)Cys/Cys基因组出现3支病变的概率为37.6%,Ser/Cys基因型出现冠脉1支病变的概率为35.9%,但3组病变支数概率的差异均不显著(P>0.05)。(4)Cys/Cys基因型的Gensini和SYNTAX评分分别为48.7±15.3和39.5±17.2,冠脉复杂病变概率为73.0%,均高于Ser/Ser基因型和Ser/Cys基因型,差异显著(P<0.05)。而Ser/Ser基因型和Ser/Cys基因型之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:h OGG1基因Ser326Cys位点多态性与糖尿病患者冠脉病变有关,其中Cys/Cys基因型与病变严重程度有一定关系,其机制可能是Cys/Cys基因型的h OGG1表达水平下降,识别和切除DNA双链中的8-OHd G能力降低,修复DNA氧化损伤的能力下降,从而加速动脉粥样硬化的发生、发展。