hOGG1基因型和血清8-OHdG水平与急性心肌梗死关系的病例对照研究

目的探讨中国河南新乡地区人群8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(hOGG1)基因Ser326Cys单核苷酸多态性和血8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)水平与急性心肌梗死(AMI)的关系。方法用病例-对照研究设计,选取AMI病例(病例组)和与之年龄、性别匹配且冠状动脉造影示冠状动脉正常的对照(对照组)各300例,按1∶1配对,运用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测hOGG1基因Ser326Cys单核苷酸多态性,同时检测血8-OHdG水平及相关血脂、血糖等生化指标。结果两组hOGG1基因Ser326Cys等位基因的分布无差异(P=0.16);病例组Cys/Cys基因型频率明显高于对照组,Ser/Cys基因型频率明显低于对照组(P=0.001);与携带Ser/Ser+Ser/Cys基因型者比较,携带Cys/Cys基因型的个体患AMI的风险增加(OR=1.99,95%CI:1.20～2.69);病例组血8-OHdG水平明显高于对照组(P<0.05),携带Cys/Cys基因型的病例组患者血8-OHdG水平明显增高(P<0.05)。结论 hOGG1基因型和血清8-OHdG水平与AMI均存在相关性。携带Cys/Cys基因型的个体患AMI的风险增加,AMI患者的氧化应激水平增高,基因型为Cys/Cys的AMI患者氧化应激水平增高明显。

人类8-羟基鸟嘌呤糖苷酶基因Ser326Cys单核苷酸多态性与急性心肌梗死的关系

目的探讨河南新乡地区人类8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(hOGG1)基因Ser326Cys单核苷酸多态性与急性心肌梗死(AMI)的关系。方法用病例-对照研究设计,选取AMI患者(观察组)和与之年龄、性别匹配且行冠状动脉造影显示冠状动脉正常的对照组各216例,运用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术检测hOGG1基因Ser326Cys单核苷酸多态性,用全自动生物化学分析仪测定总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG)、血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)。结果观察组TC、LDL-C和FBG水平较对照组明显增高(P<0.05);观察组Cys/Cys基因型频率和Cys等位基因频率明显高于对照组(P<0.05),Ser/Cys基因型频率和Ser等位基因频率明显低于对照组(P<0.05)。与携带Ser/Ser或Ser/Cys基因型者比较,携带Cys/Cys基因型的个体患AMI的风险增加(OR=2.14,95%CI:1.64～3.77)。观察组携带Cys/Cys基因型的TC、LDL-C和FBG水平明显高于Ser/Ser+Ser/Cys基因型(P<0.05)。结论 hOGG1基因Ser326Cys单核苷酸多态性可能与AMI的发生相关。

人8羟-基鸟嘌呤DNA糖苷酶1基因低表达增加肺腺癌细胞对博来霉素的敏感性

目的研究DNA碱基切除修复基因人8羟-基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(hOGG1)低表达增加肺腺癌细胞对博来霉素(BLM)的敏感性的作用,为化疗增敏提供更多的实验依据。方法以肺腺癌A549细胞和通过稳定转染hOGG1核酶而获得的hOGG1低表达的A549-R细胞为研究对象,用MTT试验和集落形成抑制试验测定不同浓度BLM处理后两种细胞的存活率和形成集落的能力;体外微核试验及单细胞凝胶电泳检测两种细胞微核率及DNA损伤与修复的差异。结果BLM作用下A549-R细胞的IC50及集落形成率显著低于A549细胞;BLM可诱导两种细胞的微核率增高,而在相同浓度下A549-R细胞微核率较A549细胞更高;单细胞凝胶电泳结果显示,BLM作用下两种细胞均有不同程度DNA损伤,A549-R细胞的拖尾率和DNA迁移长度显著大于A549细胞;损伤后A549细胞修复发生较A549-R早,与A549细胞相比A549-R细胞更不易修复。结论hOGG1低表达使肺腺癌细胞DNA修复能力降低,从而使其对BLM的敏感性增强。

毛细管电泳法高效筛选8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶的核酸适配体

8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)是人体中重要的功能蛋白,在修复DNA氧化性损伤过程中起关键作用。氧化应激等引起的氧化损伤易导致炎症反应的发生,对OGG1的抑制可以一定程度上起到缓解作用;对癌细胞OGG1的抑制有望作为癌症治疗的新方法。目前的研究多集中于小分子对OGG1功能的影响和调控,而OGG1的适配体筛选尚未见报道。作为功能配体,适配体具有合成简单、高亲和力及高特异性等优点。该文筛选了OGG1的核酸适配体,结合毛细管电泳高效快速的优点建立了两种基于毛细管电泳-指数富集进化(CE-SELEX)技术的筛选方法:同步竞争法和多轮筛选法。同步竞争法利用单链结合蛋白(SSB)与核酸库中单链核酸的强结合能力,与目标蛋白OGG1组成竞争体系,并通过增加SSB浓度来增加竞争筛选压力,以去除与OGG1弱结合的核酸序列,一步筛选即可获得与OGG1强结合的核酸序列。多轮筛选法在相同孵育条件和电泳条件下,经3轮筛选获得OGG1的核酸适配体。比较两种筛选方法的筛选结果,筛选结果中频次最高的3条候选核酸适配体序列一致,其解离常数(KD)值在1.71~2.64μmol/L之间。分子对接分析结果表明候选适配体1(Apt 1)可能与OGG1中具有修复氧化性损伤功能的活性口袋结合。通过对两种筛选方法的对比,证明同步竞争法更加快速高效,对其他蛋白核酸适配体筛选方法的选择具有一定的指导意义。得到的适配体有望用于OGG1功能调控,以抑制其修复功能。

基于PET效应检测8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶的荧光传感器

8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)是一种突变的DNA修复酶,可切除生物体内受损DNA的标志物8-氧鸟嘌呤(8-oxoG),而8-oxoG与多种癌症的病因学有关。基于光诱导电子转移(PET)效应,以1条5'末端标记羧基荧光素且含有8-oxoG的DNA链为信号探针,1条3'末端含多个G碱基的互补序列作为猝灭基团,根据加入OGG1前后体系荧光强度的变化,建立了一种简单快速、灵敏检测OGG1酶活性的荧光传感器。结果表明,该方法可对OGG1浓度进行灵敏的定量检测,且OGG1酶浓度在0~60 U/mL范围内与体系荧光强度的变化值呈良好线性关系,检出限为0.7 U/mL。利用该方法检测人类血清样品中的OGG1酶,加标回收率为99.1%~105%,相对标准偏差(RSD)为1.0%~4.3%。该传感器选择性好,简化了实验步骤,节约了实验成本。

8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶在顺铂诱导的急性肾损伤中的作用和机制

目的:探讨在顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)中8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)的作用及机制。方法:48只8~10周龄C57BL/6雄性小鼠构建动物模型。24只分为4组,每组6只,分别经腹注射顺铂干预0 h、24 h、48 h和72 h。剩余小鼠也随机分为4组,即生理盐水对照组、顺铂组、OGG1抑制剂组(Th5487组)和顺铂+Th5487组。分别在腹腔注射生理盐水或顺铂和Th5487。留取血液测定肌酐、尿素氮,取肾组织进行病理分析,检测肾组织8-氧代鸟嘌呤含量和超氧化物歧化酶活力,RT-qPCR测定mRNA水平,Western Blot验证OGG1和炎症蛋白表达情况。利用顺铂诱导小鼠肾小管上皮细胞建立体外模型,检测线粒体膜电位改变、活性氧生成情况和蛋白表达变化。结果:在顺铂诱导的AKI模型中,OGG1表达上调,环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)信号轴及炎症反应激活;Th5487可抑制顺铂诱导的组织损伤、cGAS-STING信号轴的激活及炎性反应;在体外,Th5487可减少顺铂诱导的细胞中ROS含量升高及线粒体膜去极化。结论:在顺铂诱导的AKI过程中,OGG1可通过cGAS-STING信号促进肾脏损伤及炎症反应。

长期运动训练对青年男性淋巴细胞凋亡及线粒体DNA修复酶的影响

目的探究长期运动训练对青年男性淋巴细胞凋亡及线粒体DNA(mtDNA)修复酶(8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶,OGG1)的影响及可能机制。方法训练组为20名男子足球专业运动员,对照组为20名男子大学生。2组均在功率自行车上完成递增负荷力竭运动。运动前和运动后即刻采集静脉血。流式细胞法检测淋巴细胞凋亡率,比色法检测超氧阴离子和羟自由基含量和Caspase-3,Caspase-9活性,高效液相色谱法检测mtDNA中8-氧鸟嘌呤(8-oxodG)含量,Western-blotting法检测线粒体OGG1蛋白(mtOGG1)表达水平。结果运动前和运动后,训练组与对照组比较,超氧阴离子、羟自由基、Caspase-3,Caspase-9活性、8-oxodG降低,OGG1升高;运动后,训练组与对照组比较,淋巴细胞凋亡率降低。对照组和训练组在运动后与运动前比较,淋巴细胞凋亡率、超氧阴离子、羟自由基、Caspase-3,Caspase-9活性和8-oxodG均升高,但训练组升高幅度低于对照组;运动后对照组OGG1降低,而训练组OGG1升高。结论一次性力竭运动诱导产生高水平ROS,并抑制mtOGG1表达,使mtDNA氧化损伤,促进淋巴细胞凋亡;长期耐力训练可通过抑制ROS生成,并提高mtOGG1表达,抑制运动性淋巴细胞凋亡。

原发性肝癌患者DNA损伤修复酶基因多态性分析

目的探讨DNA损伤修复酶基因多态性与原发性肝癌发生发展的关系。方法 PCR-RFLP法检测150例肝癌患者(肝癌组)和150例健康体检者(对照组)DNA损伤修复酶基因的表型,并进行比较。结果肝癌组XRCC1 Arg399Gln位点野生型的比率明显低于对照组(P<0.05);XRCC1(Arg194Trp、Arg280His)、hOGG1Ser326Cys位点多态性型别在两组中出现的频率相近(P>0.05);各基因位点不同表型者的尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平相比,P均>0.05。结论 DNA修复酶基因多态性与肝癌的发生发展无明确的相关关系。

汽油尾气致大鼠肺组织氧化损伤机制的研究

目的探讨汽油尾气对大鼠肺DNA损伤、8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶-1(OGG1)表达和细胞超微结构的影响。方法将汽油尾气的颗粒物、冷凝物和半挥发性有机物的二氯甲烷提取物以0、5.6、16.7和50.0L/kg的剂量经气管滴注染毒SD大鼠,每周一次,共4次,末次染毒24h后处死动物,用彗星实验检测肺组织细胞中DNA单链断裂水平,免疫组化检测肺组织中OGG1的含量,并在电镜下观察各型肺细胞超微结构的变化。结果在汽油尾气16.7和50.0L/kg组,肺组织细胞的拖尾率明显高于溶剂对照组(P<0.05),并有随剂量增加而增加的趋势,但各剂量组尾长的增加均无统计学意义;而汽油尾气中、高剂量组OGG1蛋白水平明显增加(P<0.05);在汽油尾气50.0L/kg组,肺组织各型细胞中的线粒体发生肿胀和空泡化,且线粒体数量明显减少。结论汽油尾气可诱导大鼠肺组织DNA单链断裂、OGG1蛋白含量增加和线粒体的损伤。

DNA修复基因hOGG1多态性与新疆哈萨克族食管癌易感性的研究

目的:研究DNA修复基因hOGG1多态性与新疆哈萨克族食管癌易感性的关系。方法:采用病例-对照研究方法,以聚合酶链式反应-连接酶检测反应(polymerase chain reaction-ligase detection reaction,PCR-LDR)技术,分析了132例哈萨克族食管癌患者(病例组)和133名正常对照者(对照组)hOGG1基因rs2072668C/G位点基因型分布,并比较不同基因型与食管癌发病风险的关系。结果:CC、CG、GG基因型在病例组中的频率分别为25.2%、51.3%和23.5%,在对照组中是28.3%、54.3%和17.4%,两组间基因型频率分布差异无统计学意义(χ2=1.206,P=0.547);携带hOGG1G变异基因与哈萨克族食管癌危险性无明显相关(OR=1.203,95%CI=0.818～1.770)。结论:hOGG1基因rs2072668C/G位点多态性与新疆地区哈萨克族食管癌易感性无相关性。

hOGG1重组腺病毒载体在人视网膜色素上皮细胞的表达及其抗氧化应激作用研究

目的:观察重组腺病毒pAd-CMV5-DEST-hogg1转染人视网膜色素上皮细胞ARPE-19后,高表达hOGG1对视网膜色素上皮细胞在H2O2诱导的氧化损伤中的作用。方法:鉴定和包装重组腺病毒pAd-CMV5-DEST-hogg1和腺病毒载体对照p Ad/CMV/V5-GW/lac Z,并分别转染ARPE-19细胞。H2O2(100μmol·L-1,2 h)干预转染重组腺病毒的ARPE-19细胞(RPE-Ad-hogg1)、转染腺病毒载体对照的ARPE-19细胞(RPE-Ad-lac Z)以及未转染病毒的ARPE-19细胞。蛋白免疫印迹法检测3组细胞hOGG1的表达量;流式细胞仪检测细胞内ROS的生成量;免疫细胞化学方法检测氧化损伤标志性终产物8-羟基鸟嘌呤(8-oxod G)的形成量。结果:重组腺病毒p Ad-CMV5-DEST-hogg1包装成功,并在ARPE-19细胞中表达;高表达h OGG1的视网膜色素上皮细胞较两对照组细胞显示出更少的ROS生成量(P<0.05)、更低的8-oxod G氧化损伤程度(P<0.01)。结论:视网膜色素上皮细胞hOGGl蛋白高表达,可提高ARPE-19细胞碱基水平的修复能力。

术前化疗对hOGG1及PARP在原发性肝癌组织中表达的影响

目的:探讨术前化疗对损伤修复机制的影响.方法:应用EnVision免疫组化法检测41例正常肝组织、187例(术前未做化疗患者99例和术前行经肝动脉插管化疗患者88例)原发性肝癌患者的肝癌组织和癌旁组织中hOGG1和PARP的表达.结果:正常肝组织、术前化疗组与术前未化疗组肝癌组织中,hOGG1蛋白细胞核表达阳性分度依次递增,而PARP蛋白细胞核表达阳性分度依次递减,三者之间差异均有显著性差异(均P<0.05).PARP癌旁组织阳性表达强度(P=0.038)、ALT(P=0.001)、病理分级(P=0.040)是肿瘤复发的危险因素,外周血淋巴细胞数(P=0.026)、化疗(P=0.049)是肿瘤复发的保护因素.结论:术前化疗可以杀伤对氧化损伤敏感的肝癌细胞.

肿瘤线粒体DNA损伤修复的研究进展

线粒体是哺乳动物细胞中唯一存在于细胞核外又带有遗传物质线粒体DNA(mtDNA)的细胞器。mtDNA支持和参与诸多重要的细胞功能。mtDNA因其特殊的结构和遗传学地位,易受各种因素的损伤。当损伤发生时,线粒体内的DNA损伤修复因子,诸如线粒体转录因子A、mtDNA聚合酶-γ、8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶等参与修复过程,而整个修复过程受到上游相关因子的调控。

hOGG1基因多态性与川北地区肺癌易感性关系的研究

目的探讨四川北部地区汉族人群8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(hOGG1)基因Ser326Cys位点多态性状况及其与该地区肺癌易感性的关系,并与其他地区人群进行比较。方法采用病例对照研究方法和聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerise chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测四川北部地区肺癌患者125例和非肿瘤患者125例(对照组)hOGG1基因第326位点Ser/Cys基因型分布,并比较不同基因型与肺癌发病危险的关系。结果病例组的Ser/Ser、Ser/Cys、Cys/Cys基因型频率分别为15.2%、27.2%、57.6%,而对照组分别为32.0%、42.4%、25.6%。χ2检验显示两组基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)。与携带Ser/Ser基因型相比,携带Ser/Cys基因型者患肺癌风险增加(OR=1.351,95%CI=0.674～2.707,P=0.397),而携带Cys/Cys基因型者肺癌风险增加3倍(OR=4.737,95%CI=2.384～9.413,P=0.000)。结论 hOGG1基因Ser326Cys多态性可能与四川北部肺癌易感性有关,携带Cys/Cys基因型肺癌风险明显增加。

香烟烟雾提取物致大鼠膈肌细胞氧化损伤

目的研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠膈肌细胞8一羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1（OGGl）表达对8．OHdG含量变化的影响。方法用不同浓度CSE分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后，采用高效液相色谱．电化学法（HPLC—ECD）检测大鼠膈肌细胞8．OHdG的含量，流式细胞术检测大鼠膈肌细胞ROS水平，采用实时定量PCR检~IJOGG!mRNA水平，用Western印迹法检测OGGl蛋白水平。结果经相同CSE浓度分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后，大鼠膈肌细胞中8-OHdG含量、ROS水平及OGGlmRNA和蛋白水平均无明显差异。但经不同浓度CSE刺激相同时间后，10．00％CSE和20．00％CSE刺激组大鼠膈肌细胞8-OHdG含量明显高于对照组和5．00％CSE刺激组（P〈0．05）；大鼠膈肌细胞内ROS水平、OGGlmRNA和蛋白水平较对照组均明显升高（P〈0．05）；大鼠膈肌细胞8-OHdG含量与其ROS水平呈明显正相关（r=0．826，P：0．000）；经CSE刺激后，大鼠膈肌细胞OGGlmRNA和蛋白水平均高于对照组（P〈O．05），但大鼠膈肌细胞8．OHdG含量与其OGGlmRNA和蛋白水平无明显相关（r=0．373，P=0．254；r=0．329，P=0．296）。结论CSE刺激可引起大鼠膈肌细胞8-OHdG升高，8-OHdG含量与ROS水平有关，但与其修复酶OGGl表达水平无明显相关。

hOGG1 Ser326Cys基因多态性与食管癌相关性的Meta分析

目的:本研究采用Meta分析旨在更好地探讨人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(human 8-oxoguanine glycosylase,h OGG1)Ser326Cys多态性与食管癌易感性之间的关系.方法:使用中国生物医学文献数据库(CBM)、中国期刊全文数据库(C N K I)、万方数据库(Wan Fang DATA)、中文科技期刊全文数据库维普(VIP)、Medline、Pub Med、Academic Search Premier(ASP)等数据库检索关于h OGG1 Ser326Cys多态性与食管癌相关性的文献,使用OR值及95%可信区间评估相关度,使用Stata/SE 11.0软件进行统计分析.结果:14项病例-对照研究,包括2693例食管癌患者和4027名正常对照个体被纳入当前的Meta分析.我们发现h OGG1 Ser326Cys多态性与食管癌存在相关性.隐性模型C/C v s C/S+S/S:O R=1.26,95%C I:1.08-1.48;共显性模型C/C vs S/S:OR=1.25,95%CI:1.05-1.49.在亚组分析中显示:在隐性模型(C/C vs C/S+S/S)和共显性模型(C/C vs S/S)中,亚洲人群、鳞癌患者、以随机人群为来源的研究及以血液为DNA来源的研究中,h OGG1 Ser326Cys多态性可增加食管癌的易感性.结论:本研究显示h OGG1 Ser326Cys多态性与食管癌易感性之间存在相关性,Cys326基因型能增加食管癌发病风险.但以上结论仍需要大样本研究进行验证.

hOGG1和PARP在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的检测DNA修复酶hOGG1及PARP在原发性肝癌及肝硬化组织中的表达,探讨hOGG1和PARP在HCC和肝硬化组织中的表达特点及其与临床病理的关系。方法应用EnVision免疫组化法检测41例非HCC正常肝组织、99例HCC组织、51例HCC癌旁肝硬化组织中hOGG1和PARP表达情况。结果在HCC组织中hOGG1和PARP在细胞核与细胞质中均有表达,其中hOGG1细胞核阳性分度在正常组、肝硬化组、HCC组之间依次增高(P<0.001);PARP细胞核阳性分度在正常组、肝硬化组、HCC组之间依次降低(P<0.001)。多因素分析显示:hOGG1蛋白在细胞核表达与ALT有关(相对危险度为1.022,P=0.041),hOGG1蛋白在细胞浆表达与总胆红素有关(相对危险度为1.155,P=0.018),PARP蛋白在细胞浆表达与外周血白细胞数(相对危险度为0.757,P=0.037)有关。结论在HCC发生过程中hOGG1蛋白在肝细胞核中的表达可能随着病程进展而增强,PARP蛋白在肝细胞核中的表达可能随着病程进展而降低,可能反应了从肝硬化到肝癌进程中肝细胞内氧化应激状态的改变。

hOGG1在原发性肝癌和肝硬化组织中的表达及意义

目的通过检测DNA修复酶hOGG1在原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及肝硬化组织中的表达,探讨hOGG1在HCC和肝硬化组织中的表达特点及其与临床病理因素的关系。方法应用EnVision免疫组化法检测41例非HCC正常肝组织、99例HCC、51例HCC癌旁肝硬化组织中hOGG1表达情况。结果在HCC组织中hOGG1在细胞核与细胞质中均可表达,其中hOGG1细胞核阳性分度在正常组、肝硬化组、HCC组之间依次增高(P<0.001)。多因素分析显示hOGG1蛋白在细胞核表达与ALT有关(OR=1.022,P=0.041),hOGG1蛋白在细胞浆表达与总胆红素有关(OR=1.155,P=0.018)。结论在HCC发生过程中hOGG1蛋白在肝细胞核中的表达可能随着病程进展而增强,反映了从肝硬化到肝癌进程中肝细胞内氧化应激状态的改变。

γ-射线上调线粒体DNA损伤修复相关因子的表达

目的研究γ-射线对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞线粒体DNA(mtDNA)损伤相关修复因子——线粒体转录因子A(Tfam)、8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶(Ogg)-1和DNA聚合酶-γ(Polg)表达的影响。方法体外培养OSCC-2和-5细胞株,甲噻唑四唑氮比色检测其存活率,RNA干涉技术敲除相关基因,半定量反转录PCR检测其相关mRNA的表达水平,蛋白质印迹技术检测相关蛋白质的表达。结果 OSCC-2和5细胞株经30Gy的γ-射线处理后,存活率分别下降至(35.33±6.03)%和(75.67±4.16)%,tfammRNA的表达水平升高;但是OSCC-5细胞株tfammRNA水平存在时相性,即在射线处理6h后,tfammRNA的水平较高。经过γ-射线处理的OSCC-5细胞株的Ogg-1和Polg的表达也较强,Tfam、Ogg-1和Polg各自的小分子干扰RNA(siRNA)都下调了相应的蛋白质表达水平。siRNA转染细胞经射线处理后程序性亡率有所增加。结论γ-射线能抑制OSCC-2和-5细胞株的增殖,上调mtDNA修复相关因子Tfam、Polg和Ogg-1的表达。

Mdogg1基因参与家蝇体内氧化还原平衡的维持

【目的】本研究旨在克隆鉴定家蝇Musca domestica中8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(8-hydroxyguanine glycosylase 1,OGG1)编码基因Mdogg 1,明确其是否参与家蝇氧化应激调控。【方法】根据家蝇转录组数据,利用RT-PCR克隆Mdogg 1基因cDNA序列,并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR检测Mdogg 1在家蝇不同发育阶段(卵、1-3龄幼虫、蛹和成虫)的表达变化、3龄幼虫不同组织(血细胞、肌肉、肠道和脂肪体)中的表达分布以及不同胁迫处理[2.5~100 mmol/L CdCl 2胁迫24 h,0.1 g/L盐酸阿霉素(DOX)浸泡30 min并恢复培养6,12和24 h,以及280-315 nm紫外线(UV)(强度5 J/cm 2)处理5~30 min]后2龄幼虫中的转录水平变化;通过RNAi技术敲低家蝇2龄幼虫Mdogg 1表达,并检测其丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和8-羟基鸟嘌呤(8-oxoguanine,8-oxoG)含量的变化。【结果】Mdogg 1(GenBank登录号:AYK27449.1)cDNA序列全长1062 bp,编码353个氨基酸,该蛋白的理论分子量和等电点分别为41.08 kD和9.02。MdOGG1氨基酸序列中含有螺旋-发夹-螺旋(HhH)结构域,并包含核酸内切酶Ⅲ保守结构域ENDO3c。qRT-PCR结果显示,Mdogg 1主要在家蝇卵和3龄幼虫脂肪体中呈高水平表达。2龄幼虫暴露于2.5~100 mmol/L CdCl 2下,Mdogg 1表达量呈现先上升再下降趋势,并伴有8-oxoG含量的持续升高。2龄幼虫浸泡于0.1 g/L DOX 30 min并恢复培养12和24 h以及UV照射30 min后,Mdogg 1表达量较未处理对照均显著上调。利用RNAi技术敲低家蝇2龄幼虫体内Mdogg 1的表达后,家蝇幼虫体内的ROS水平、MDA含量和8-oxoG含量较注射ds GFP的对照组显著增高,而SOD活性下降。【结论】Mdogg 1参与家蝇氧化还原平衡的维持,具有保护机体抵抗氧化损伤的生物学效应。