微管-微丝系统的改变对培养的MGc 80-3人胃癌细胞粘液分泌的影响

本工作用PAS反应显示粘液蛋白的方法对细胞内微管微丝变化时人胃腺癌MGc 80-3细胞粘液分泌活动进行了研究。秋水仙酰胺、低温(2~4℃)及细胞松弛素B(CB)处理后,细胞内微管微丝解聚,粘液分泌活动受到抑制,当细胞从低温回置37℃温育,微管重新组装后,粘液分泌又得到恢复。Taxol短时间处理对MGc 80-3细胞粘液分泌有促进作用、但长时间处理后,由于细胞内微管的高度浓集化,从而破坏了细胞内微管网络结构(CMTC),使粘液分泌活动停止,说明人胃腺癌MGc80-3细胞的粘液分泌活动依赖于细胞内CMTC和微丝的存在。毛果芸香碱能直接刺激培养的MGc 80-3细胞的粘液分泌,提示人胃腺癌MGc 80-3细胞膜也可能存在类胆碱能受体。硫杂脯氨酸对人胃腺癌MGc 80-3细胞的增殖具有抑制作用,但对其粘液分泌具有强烈的刺激作用,这种刺激作用可通过加速粘液的排放而实现。毛果芸香碱和硫杂脯氨酸对MGc 80-3细胞粘液分泌的刺激作用也依赖于细胞内微管微丝的存在,一旦微管微丝解聚,其刺激粘液分泌的作用便消失。db-cAMP对MGc 80-3细胞的粘液分泌也有促进作用。CB单独处理或CB与秋水仙酰胺同时处理,都能抑制MGc 80-3细胞的粘液分泌,但CB单独处理后,分泌颗粒多聚集于细胞边缘,而CB与秋水仙酰胺同时处理后,分泌颗粒则散在分布于胞质中,提示在MGc 80-3细胞内微丝对粘液的排放,而微管对分泌颗粒的输送起主要作用。

肉桂酸和1,25-二羟维生素D_3联用对人胃腺癌细胞的诱导分化作用

目的观察肉桂酸(CINN)和1,25-二羟维生素D3(1,25-(OH)2D3)联合用药对人胃腺癌MGC-803细胞的诱导分化作用。方法 1,25-(OH)2D3和CINN联合用药(2 mmol/L CINN+10-6mmol/L 1,25-(OH)2D3、1 mmol/L CINN+10-5mmol/L 1,25-(OH)2D3)及单独用药作用于MGC-803细胞48 h后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力,平板克隆试验测定细胞集落形成率,流式细胞仪测定细胞周期,TRAP-银染法测定端粒酶活性。结果 1,25-(OH)2D3和CINN联合用药后胃腺癌细胞生长明显受抑制,细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变,端粒酶活性明显受到抑制。细胞集落形成率明显下降。结论 CINN和1,25-(OH)2D3联合用药对人胃腺癌细胞的诱导分化具有协同作用。

ω-3多不饱和脂肪酸对人胃腺癌细胞系AGS的作用

目的探讨ω-3多不饱和脂肪酸对人胃腺癌AGS细胞生长增殖的作用和可能的机制。方法以不同浓度梯度的DHA、EPA作用于体外培养的AGS细胞和人微血管内皮细胞HMEC-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)观察细胞增殖抑制率,使用流式细胞仪检测细胞周期变化,采用Western blot分析细胞线粒体呼吸链膜蛋白复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ表达变化。结果 DHA和EPA对胃腺癌AGS细胞增殖具有明显抑制作用,该抑制作用呈现明显的剂量时间依赖效应的特点(P<0.05),在相同的浓度梯度下,DHA的抑制作用强于EPA(P<0.05)。倒置显微镜下DHA作用后观察到AGS细胞明显皱缩,细胞的贴壁能力明显减弱。流式细胞仪检测显示,DHA、EPA干预后AGS细胞的DNA合成前期(G0/G1期)细胞分布比例明显增加,DNA合成期(S期)细胞分布比例明显减少(P<0.05)。Western blot分析可见,DHA干预AGS细胞24h和48h后,与对照组比较,AGS线粒体呼吸链膜蛋白复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ表达灰度值显著下降,而且随着作用时间延长,复合体表达灰度值下降愈明显(P<0.05)。DHA对人微血管内皮细胞的生长增殖、细胞形态和线粒体呼吸链膜蛋白复合体无明显影响(P>0.05)。结论ω-3多不饱和脂肪酸可选择性有效地抑制人胃腺癌AGS细胞的生长增殖。该作用可能是通过阻滞AGS细胞于G0/G1期和抑制AGS细胞能量代谢来实现的。

华蟾素对MGC-80-3细胞生长及凋亡影响的实验研究

目的 :观察华蟾素对细胞生长及凋亡的影响。方法 :应用体外细胞培养技术、MTT测定、集落形成试验、电镜观察及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法。结果 :华蟾素对MGC 80 3细胞的生长有显著抑制作用 ,能抑制细胞的集落形成 ,MTT法测定 ,其IC50 约为 0 16 μg/ml;电镜下观察到细胞呈凋亡特征 ;琼脂糖凝胶电泳显示DNA呈梯状降解。 结论 :华蟾素能抑制MGC- 80 - 3细胞生长 ,药物作用方式在较高浓度时以细胞毒作用为主 ,在较低浓度时以诱导细胞凋亡为主。诱导细胞凋亡是华蟾素抗肿瘤的重要方式之一。

G5-BGG/pDNA的制备及其对SGC-7901细胞的抑制作用

非病毒载体具有质量可控、携带能力高和免疫原性低等优点,但存在转染效率低的致命缺陷,限制了广泛应用。本研究采用计算机模拟设计了新型功能性基团1,3-间苯二甲酰胍(BGG),并通过酰胺键将其修饰于第5代(G5)聚酰胺-胺树枝状大分子表面,得到新型非病毒载体材料G5-BGG。G5-BGG可将基因压缩成荷正电的基因复合物。体外定性和定量转染试验表明,G5-BGG作为基因药物载体可显著提高报告基因在人胃腺癌细胞(SGC-7901)中的转染效率,同时具有良好的生物相容性。G5-BGG负载肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(pTRAIL)基因时可在细胞水平上诱导SGC-7901细胞凋亡,抑制肿瘤细胞生长,具有良好的抗肿瘤作用。本研究表明G5-BGG在胃癌基因治疗领域具有潜在的应用前景。