810nm弱激光作用下巨噬细胞对星形胶质细胞活化与CSPG分泌的影响

围绕巨噬细胞,基于810nm弱激光作用下,分析其对星形胶质细胞活化所具有的影响,另分析其对硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)分泌所产生的影响。方法 对脊髓损伤(SCI)动物模型进行构建,且设两组,其一为脊髓损伤后弱激光(LLLT)组,其二是脊髓损伤(SCI)组,采用当前比较常用的免疫荧光法。结果 LLLT组的损伤区CSPG、GFAP表达相比SCI组,显著偏少(P<0.05)。而经体外试验发现,针对LLLT后所对应的巨噬细胞iNOS来分析,其在具体的表达上,降低大(P<0.05)。针对M1组来讲,其较之Ctrl组,在具体的星形胶质细胞活性上,有升高(P<0.05)。与M1组相比,M1+LLLT组在具体的星形胶质细胞活性上,存在明显下降(P<0.05)。结论 针对LLLT而言,其对于小鼠脊髓损伤区星形胶质细胞的活化而言,可以进行较好的抑制,并且还能根据现实需要,对CSPG的表达施加相应抑制,使之减少;而对于此种作用来分析,其可以通过弱激光辅助下的巨噬细胞来得到。

810 nm弱激光抑制M1型骨髓源性巨噬细胞极化促进脊髓背根神经元轴突生长

目的研究810 nm弱激光对原代培养M1型骨髓源性巨噬细胞(BMDM)表型极化及分泌对背根神经节(DRG)神经元轴突的作用。方法分离培养BMDM,经脂多糖(LPS)联合γ干扰素(IFN-γ)诱导BMDM向M1表型极化,采用流式细胞术检测细胞F4/80和CD16/32表达。将诱导成熟的M1型BMDM随机分为弱激光照射组与对照组。照射组分别采用波长810 nm,0.4J、 4J和10J的弱激光进行照射;对照组不进行照射。照射后24 h,反转录PCR法检测M1型BMDM诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA水平, Western blot法检测iNOS的蛋白水平, ELISA检测培养细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的含量,免疫荧光细胞化学染色检测神经元核蛋白(NeuN)和β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)的表达,确定M1型BMDM上清液培养对DRG神经元轴突生长的影响。结果与对照组相比,各能量参数弱激光照射后24h, M1型BMDM iNOS mRNA水平均显著下调, 4J弱激光照射组下调最显著;0.4J及4J弱激光照射组iNOS蛋白水平显著下调, 4J弱激光照射组下调水平较0.4J弱激光照射组更显著。4J和10J弱激光照射组M1型BMDM TNF-α的分泌明显减少,各照射组M1型BMDM IL-1β的分泌明显下调, 0.4J及4J弱激光照射组抑制程度较10J弱激光照射组更为显著。4J弱激光照射组明显促进M1型BMDM的BDNF和NGF分泌。采用照射后的BMDM上清液过继培养DRG 24 h后, 4J及10J弱激光照射组上清液可显著促进DRG神经元轴突的生长。结论弱激光照射可以抑制M1型BMDM表型极化及促炎因子TNF-α、 IL-1β分泌,上调神经营养因子BDNF和NGF的分泌,促进DRG神经元轴突的生长,且呈一定的剂量依赖性。