GP5^(Δ84-119)稳定表达对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的影响

为探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要结构蛋白GP5的第二胞外区在病毒复制中的作用及机制,利用PiggyBac Transposon System Vectors构建了表达删除84—119氨基酸残基的截短型GP5的重组质粒(pPBGP5Δ84-119),转染Marc-145细胞通过嘌呤霉素抗性筛选和3次亚克隆,筛选稳定表达GP5Δ84-119的Marc-145细胞系,并利用cck-8试剂盒检测细胞的增殖情况;用PRRSV SD16株感染筛选的细胞,通过病毒基因拷贝数和病毒滴度检测GP5Δ84-119表达对PRRSV复制影响;通过Real-time PCR和ELISA检测病毒感染前后细胞IFN-α、IFN-β、IFN-γ的表达情况。经RT-PCR、Western blot和IFA检测,GP5Δ84-119在Marc-145细胞中获得稳定表达,将此细胞命名为Marc-145-GP5Δ84-119;细胞增殖曲线显示GP5Δ84-119的表达不影响细胞的增殖;对病毒基因拷贝数和病毒滴度检测发现GP5Δ84-119的表达可以抑制PRRSV的复制,这种抑制作用可能是通过上调IFN特别是IFN-β的表达而实现的。研究表明GP5第二胞外区在PRRSV复制中发挥重要作用。

播期和越冬定植对洋葱生长发育及产量的影响

对江苏境内三个黄皮洋葱品种在南京进行了播期和越冬定植对洋葱生长发育及鳞茎商品性影响的研究。结果表明 :秋季播种越冬前定植的植株 ,越冬时生长速率随播期延迟递减 ;对鳞茎生长期无影响 ,但与品种特性有关 ,与越冬前植株大小无关 ;对洋葱抽薹率、小区产量和平均鳞茎重均有明显影响。据此认为 :在长江中下游地区高产栽培条件下 ,早熟品种“阳春黄”适宜于 9月 1 0日前后播种 ;中晚熟品种“84 5”和“986 6”适宜于 9月 2 0日前后播种。 9月 2 0日、9月 30日播种的“84 5”和“986 6” ,冬后定植比冬前定植的抽薹率明显升高 。