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环介导等温扩增法检测转基因玉米MON89034 被引量:16
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作者 张隽 李志勇 +5 位作者 叶宇鑫 黄韵 刘津 余以刚 高东微 石磊 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2012年第4期469-472,共4页
根据MON89034外源插入片段与植物基因组序列设计特异性引物,筛选最佳引物并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米MON89034转化体特异性LAMP检测方法。对该方法进行了特异性、灵敏度、稳定性和重复性测试。结果表明:该方法... 根据MON89034外源插入片段与植物基因组序列设计特异性引物,筛选最佳引物并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米MON89034转化体特异性LAMP检测方法。对该方法进行了特异性、灵敏度、稳定性和重复性测试。结果表明:该方法能够特异性检测出MON89034玉米;检测其灵敏度达到1 pg;以转基因玉米MON89034 DNA标准品质量分数为1.00%,0.10%,0.05%的样品为模板,其稳定性好、重复性高,假阴性率为0。本试验设计的LAMP方法适用于特异性检测转基因玉米MON89034。 展开更多
关键词 环介导等温扩增法 转基因玉米MON 89034 检测
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双重荧光定量PCR杂交探针标记法快速鉴定转基因玉米MON89034
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作者 王凤军 陈强 +2 位作者 许海锋 杨伊平 周叶熹 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第10期3341-3348,共8页
本研究创建一种简单快捷、成本低廉、灵敏准确及可靠性强的高通量鉴定转基因玉米MON89034转化体的快速检测方法。采用多重实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)对转基因玉米MON89034品系进行检测,并针对转基因玉米MON89... 本研究创建一种简单快捷、成本低廉、灵敏准确及可靠性强的高通量鉴定转基因玉米MON89034转化体的快速检测方法。采用多重实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)对转基因玉米MON89034品系进行检测,并针对转基因玉米MON89034靶标基因设计高效稳定的引物和探针,使用zSSIIb基因作为内源基因,避免检测出现假阴性,将反应体系及条件优化后,用实时荧光定量PCR仪进行扩增,初步建立转基因玉米MON89034双重实时荧光PCR检测方法,通过对该方法进行特异性和大样本可靠性测试验证,继而创建出一种高通量鉴定转基因玉米MON89034转化体的检测方法。通过建立的双重荧光定量PCR方法对转基因玉米、非转基因玉米和转基因大豆的DNA混合模板检测得出的结果表明,多种作物DNA混合模板可在单根PCR反应管内实现对zSSIIb基因和MON89034的同时检测,并在2 h内完成检测得到准确结果。目前,建立的该双重实时荧光PCR方法可用于多个转基因作物样品间快速筛查,检测快速,结果准确,可满足大多数检测机构日常检测的需求。 展开更多
关键词 转基因 MON89034 实时荧光PCR
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