左金丸与反左金丸诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的比较

目的比较左金丸(Zuojin Pill,ZP)和反左金丸(Retro-zuojin Pill,RZP)对人胃癌细胞(SGC-7901)生长的活性抑制和凋亡诱导作用。方法采用MTT比色法观ZP与RZP对SGC-7901的生长抑制情况;流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析细胞凋亡率;Hoechst33258染色观察细胞形态学变化。结果0.1mg/mlZP与RZP分别作用SGC-7901细胞后,均能抑制细胞活性,且与时间呈依赖关系。0.1、0.5和1.0mg/mlRZP作用SGC-7901细胞48h,细胞凋亡率为(5.52±0.54)%、(6.91±2.31)%、(8.50±1.02)%,0.1、0.5和1.0mg/ml的ZP对细胞的凋亡率分别为(11.60±1.24)%、(21.80±0.28)%、(36.40±1.59)%,与对照组(1.69±1.91)%比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Hochest染色细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡学特征。结论左金丸和反左金丸对SGC-7901生长都有明显的抑制作用并可诱导SGC-7901的凋亡,同一浓度的ZP和RZP作用SGC-7901相同时间,ZP的作用效果更为明显。

arresten cDNA在人胃癌细胞SGC-7901中的表达及活性鉴定

目的 :构建arrestencDNA的分泌型真核表达载体 ,将其转染人胃癌SGC 790 1细胞 ,探讨arresten体外抑制血管内皮细胞生长的活性。方法 :利用PCR法将小鼠Igκ链信号序列的 6 0个碱基拼接至arrestencDNA的氨基端 ,并克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+) ,然后以脂质体法将重组pcDNA3.1(+) arresten转染SGC 790 1细胞 ,Western印迹检测arresten的分泌表达 ,最后 ,提取SGC 790 1细胞培养上清 ,采用内皮细胞增殖抑制试验鉴定上清中arresten活性。结果 :成功构建了arrestencDNA的分泌型真核表达载体 ,获得可表达arresten的SGC 790 1细胞系 ,真核表达的arresten具有抑制血管内皮细胞增殖的活性。结论 :arresten是一种有效的血管生成抑制剂 ,其cDNA的真核表达载体的成功构建为针对人类胃癌的arresten抗血管基因治疗研究奠定基础。