采用Raman光谱研究小麦胚芽8S球蛋白的二级结构

采用显微激光拉曼光谱仪研究了小麦胚芽8S球蛋白的二级结构。结果表明:小麦胚芽8S球蛋白的二级结构主要为β折叠,另外还含有一定量的α螺旋和无规卷曲构象,小麦胚芽8S球蛋白的C—C—S—S—C—C侧链为扭曲—扭曲—扭曲式和扭曲—扭曲—反式两种构型,其酪氨酸残基趋于全部暴露于溶剂中,而其色氨酸残基趋向于埋藏。

小麦胚8S球蛋白的分离纯化及理化性质研究

本实验主要研究了小麦胚球蛋白的主要组成及其理化性质和二级结构。研究结果表明:8S球蛋白是小麦胚球蛋白中最主要的成分,其含有两个亚基谱带55.0kD和38.0～40.0kD;富含谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸和亮氨酸,而缺乏胱氨酸和蛋氨酸;小麦胚8S球蛋白主要是β折叠结构(54.9%),其次是无规卷曲结构(25.3%)和α螺旋(19.8%)。

绿豆种子8S球蛋白基因启动子的克隆及分析

根据绿豆种子8S球蛋白α′亚基基因的末端序列设计3个特异反向引物.以绿豆基因组DNA为模板,采用基因组步移法,获得了8S球蛋白α′亚基基因起始密码子上游784 bp的DNA片段,通过序列测定和生物信息学分析,发现该序列含有启动子核心区以及大量的种子特异表达相关的顺式作用元件,表明此序列为种子特异启动子序列.通过PCR方法在启动子3′端加上翻译增强序列TMV-omega序列,构建了植物双元表达载体pBI-8SGα-′o-mega-gus,并成功将其转化进入农杆菌.

食用豆类球蛋白研究进展

该文比较分析大豆、绿豆、豌豆、蚕豆等蛋白含量及组成,就豆类蛋白主要成分―11S球蛋白、7S球蛋白和8S球蛋白亚基结构及性质,球蛋白提取方法及功能特性进行概述,并展望其研究发展趋势,以期为豆类球蛋白进一步研究及应用提供参考。

种子特异启动子的克隆及植物表达载体构建

[目的]启动子是植物基因工程中一个重要工具,对构建植物生物反应器有着重要意义。8S球蛋白是绿豆中含量最丰富的种子贮藏蛋白,因此,其调控序列可能提供了一个很好来源的种子特异性启动子。[方法]通过基因组步移技术克隆了绿豆8S球蛋白a亚基基因8SGα的启动子区域,基因组步移使用的引物根据绿豆8SGα的cDNA序列设计。[结果]通过3轮PCR的扩增,得到了472 bp的上游序列片段,构建了植物双元表达载体pBI-8SGα-GUS。[结论]研究结果可用于转化植物,并于转基因植物中分析启动表达的时空特异性及表达强度,并为植物种子生物反应器提供重要元件。