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日本血吸虫新基因—Ⅲ8kDa钙结合蛋白基因的发现与克隆
被引量:
1
1
作者
彭鸿娟
陈晓光
+1 位作者
支国舟
王珣章
《热带医学杂志》
CAS
2002年第2期114-117,共4页
目的 将用EST策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因—Ⅲ 8kDa钙结合蛋白 (Calcium -bindingprotein ,CBP)cDNA克隆到表达质粒pET32a(+)上 ,为下一步对该基因的功能进行研究做准备。方法 将插入于pTriplEx2质粒上的cDNA进行测序 ,...
目的 将用EST策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因—Ⅲ 8kDa钙结合蛋白 (Calcium -bindingprotein ,CBP)cDNA克隆到表达质粒pET32a(+)上 ,为下一步对该基因的功能进行研究做准备。方法 将插入于pTriplEx2质粒上的cDNA进行测序 ,测序结果经BLASTn程序搜索 ,发现该插入cDNA序列与曼氏血吸虫钙结合蛋白cDNA高度同源。根据表达质粒pET32a(+)上的克隆位点及该cDNA序列设计PCR引物 ,将PCR产物纯化后连接到pMD 1 8-T载体上 ,将重组T载体经EcoRI/XhoI双酶切后切下的SjCBP基因亚克隆入原核可溶性表达质粒pET32a(+)中。结果 所发现的新基因与曼氏血吸虫 8kDaCBP基因的同源性达 82 % ,PCR产物的片段长度与预期大小一致 ,重组T载体及表达质粒经EcoRI及XhoI双酶切后证明具有与目标片段长度相符的插入片段。结论 所发现的cDNA与曼氏血吸虫 8kDaCBPcDAN高度同源 ,并且已成功地构建出重组表达质粒pET32a(+) -SjCBP。
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关键词
日本血吸虫
曼氏血吸虫
8kda钙结合蛋白
pET32a(+)
基因克隆
下载PDF
职称材料
几种日本血吸虫新基因的表达特性分析
被引量:
2
2
作者
彭鸿娟
陈晓光
+3 位作者
李华
周晓红
沈树满
王珣章
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2003年第2期46-49,共4页
目的 对从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的 3种新基因 ,腺苷酸激酶 (AK)、蛋白酶体激活因子PA2 8β亚单位 (PA2 8)、8kDa钙结合蛋白 (CBP)基因进行表达特性研究。方法 分别提取雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫的总RNA ,利用RT-PCR酶混合...
目的 对从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的 3种新基因 ,腺苷酸激酶 (AK)、蛋白酶体激活因子PA2 8β亚单位 (PA2 8)、8kDa钙结合蛋白 (CBP)基因进行表达特性研究。方法 分别提取雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫的总RNA ,利用RT-PCR酶混合物试剂盒 ,一步法对总RNA进行反转录及PCR扩增。结果 AK及PA2 8蛋白基因可以在雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫体内表达 ,CBP只在尾蚴及断尾童虫中表达。结论 所筛到的AK、PA2 8、CBP基因均是日本血吸虫特异基因 ,AK及PA2 8基因可以在雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫体内表达 ,CBP可能是日本血吸虫尾蚴。
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关键词
日本血吸虫
新基因
表达特性
腺苷酸激酶
蛋白
酶体激活因子
8kda钙结合蛋白
下载PDF
职称材料
题名
日本血吸虫新基因—Ⅲ8kDa钙结合蛋白基因的发现与克隆
被引量:
1
1
作者
彭鸿娟
陈晓光
支国舟
王珣章
机构
中山大学生物防治国家重点实验室
第一军医大学寄生虫学教研室
出处
《热带医学杂志》
CAS
2002年第2期114-117,共4页
基金
联合国发展开发署 /世界银行 /世界卫生组织热带病研究和培训特别规划署基金ID(No.A0 0 690 A0 0 1 91 )
文摘
目的 将用EST策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因—Ⅲ 8kDa钙结合蛋白 (Calcium -bindingprotein ,CBP)cDNA克隆到表达质粒pET32a(+)上 ,为下一步对该基因的功能进行研究做准备。方法 将插入于pTriplEx2质粒上的cDNA进行测序 ,测序结果经BLASTn程序搜索 ,发现该插入cDNA序列与曼氏血吸虫钙结合蛋白cDNA高度同源。根据表达质粒pET32a(+)上的克隆位点及该cDNA序列设计PCR引物 ,将PCR产物纯化后连接到pMD 1 8-T载体上 ,将重组T载体经EcoRI/XhoI双酶切后切下的SjCBP基因亚克隆入原核可溶性表达质粒pET32a(+)中。结果 所发现的新基因与曼氏血吸虫 8kDaCBP基因的同源性达 82 % ,PCR产物的片段长度与预期大小一致 ,重组T载体及表达质粒经EcoRI及XhoI双酶切后证明具有与目标片段长度相符的插入片段。结论 所发现的cDNA与曼氏血吸虫 8kDaCBPcDAN高度同源 ,并且已成功地构建出重组表达质粒pET32a(+) -SjCBP。
关键词
日本血吸虫
曼氏血吸虫
8kda钙结合蛋白
pET32a(+)
基因克隆
Keywords
Schistosoma japonicum
Schistosoma mansonii
8
kda
Calcium binding protein
pET32a(+)
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
几种日本血吸虫新基因的表达特性分析
被引量:
2
2
作者
彭鸿娟
陈晓光
李华
周晓红
沈树满
王珣章
机构
中山大学生物防治国家重点实验室
第一军医大学寄生虫学教研室
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2003年第2期46-49,共4页
基金
联合国发展开发署/世界银行/世界卫生组织热带病研究和培训特别规划署资助基金
IDNo A0 0 6 90
A0 0 191
文摘
目的 对从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的 3种新基因 ,腺苷酸激酶 (AK)、蛋白酶体激活因子PA2 8β亚单位 (PA2 8)、8kDa钙结合蛋白 (CBP)基因进行表达特性研究。方法 分别提取雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫的总RNA ,利用RT-PCR酶混合物试剂盒 ,一步法对总RNA进行反转录及PCR扩增。结果 AK及PA2 8蛋白基因可以在雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫体内表达 ,CBP只在尾蚴及断尾童虫中表达。结论 所筛到的AK、PA2 8、CBP基因均是日本血吸虫特异基因 ,AK及PA2 8基因可以在雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫体内表达 ,CBP可能是日本血吸虫尾蚴。
关键词
日本血吸虫
新基因
表达特性
腺苷酸激酶
蛋白
酶体激活因子
8kda钙结合蛋白
Keywords
Schistosoma japonicum
Adenylate kinase
Calcium binding protein
Proteasome activator PA2
8
beta subunit
RT PCR
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
日本血吸虫新基因—Ⅲ8kDa钙结合蛋白基因的发现与克隆
彭鸿娟
陈晓光
支国舟
王珣章
《热带医学杂志》
CAS
2002
1
下载PDF
职称材料
2
几种日本血吸虫新基因的表达特性分析
彭鸿娟
陈晓光
李华
周晓红
沈树满
王珣章
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2003
2
下载PDF
职称材料
已选择
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引证文献
统计分析
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