9-5/8″技术套管旋转固井技术在中海油的首次成功应用

9-5/8″技术套管固井传统做法是采用一维轴向顶替方式,存在水泥浆走高边,低边冲洗困难,顶替效率低,固井质量较差,定向井尤其明显,井筒完整性很难保障。为了解决此该问题,9-5/8″技术套管旋转固井工艺技术在涠洲某油田钻完井作业过程中被首次提出并成功实施,为中海油首次。本文主要从9-5/8″技术套管旋转固井工艺的原理、优点及限制条件等方面详细介绍,9-5/8″技术套管旋转固井是通过以下几个措施来实现的:选用高抗扭套管保证旋转情况下套管串的有效性,利用顶驱下套管工具(CRT)对套管串施加动力,通过软件模拟计算合理加装套管扶正器降低套管串摩阻。结果表面,9-5/8″技术套管旋转固井工艺技术能够改变环空流态,改善冲洗效果,提高顶替效率和固井质量,保障井筒完整性。

DQ-9-5/8″套管阀的研制

套管阀是实现全过程欠平衡作业的关键技术装备。介绍了大庆钻探工程公司钻井工程技术研究院研制的拥有自主知识产权的DQ-9-5/8″套管阀的系统组成、工作原理、室内模拟检测。整套装备顺利通过动作试验、静水试验、稳压试验、承压试验、锈蚀试验等综合模拟试验。试验结果表明,该设备在使用性能上满足全过程欠平衡套管阀现场作业需求,应用前景广阔。

SLC5A8基因敲除后皮下种植结肠癌细胞株的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比观察

目的观察SLC5A8基因敲除后皮下种植结肠癌细胞株MC-38的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比变化,为结肠癌基因治疗提供实验依据。方法应用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建SLC5A8基因敲除型C57BL/6小鼠,记为实验组。将普通C57BL/6小鼠记为对照组。将两组小鼠皮下种植结肠癌细胞株MC-38细胞悬液制备MC-38负瘤模型,制备成功后完整剥离肿瘤组织,采用流式细胞法测算各组小鼠结肠肿瘤微环境中T淋巴细胞亚群占比。结果实验组小鼠肿瘤微环境中CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞占比分别为27.730%±2.861%、50.923%±4.823%、10.205%±1.234%,对照组小鼠肿瘤微环境中CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞占比分别为40.790%±9.940%、58.355%±3.292%、22.950%±1.948%,两组相比,P均<0.05。结论与普通C57BL/6小鼠相比,SLC5A8基因敲除后皮下种植MC-38细胞的负瘤模型小鼠肿瘤微环境中CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞占比均下降。

9-5/8"套管井一次多层压裂充填管柱研制与应用

多层压裂充填技术选用合适粒径的砾石,通过水力压裂技术在储层中造出具有一定导流能力的裂缝,在地层与井口之间形成导流通道,增大原油渗流面积,达到增产的效果。目前,在应用过程中存在整体管柱的抗冲蚀性能低、封隔器密封性能差等问题,进行了工艺流程优化、关键环节仿真、现场应用等研究。结果表明,反循环时排量为8bpm时,冲管长度为480m;排量25bpm时,砂比8lb/gal的压裂充填作业;已用于渤海、南海的20口高难度防砂井。

基于CRISPR/Cas9点突变技术构建HIV-1基因型耐药检测质控品

目的人外周血淋巴细胞株8E5可分泌无感染性HIV-1病毒颗粒,靶向于8E5细胞株基因组整合的HIV-1前病毒基因POL区,基于CRISPR/Cas9点突变技术构建含有POL区耐药突变位点的单克隆细胞株,可用于制备一种安全稳定的新型HIV-1基因型耐药检测质控品。方法设计构建小向导RNA(single guide RNA,sgRNA)和Cas9共表达载体以及携带有目标突变位点的供体单链寡核苷酸(donor single-stranded oligonucleotides,Donor ssODN)共转染8E5细胞,通过流式微孔板分选获得转染成功的阳性单克隆细胞株,通过Sanger测序确认定点突变的编辑效果。对定点突变编辑成功的单克隆细胞株培养至第3代、5代和7代的细胞及细胞分泌到上清中的HIV病毒颗粒进行Sanger测序,验证定点突变的编辑效果。结果成功构建双sgRNA和Cas9共表达载体,与携带有耐药突变位点Q151M的Donor ssODN共转染8E5细胞株的效果良好。对分选获得的共转染阳性单克隆细胞株进行靶位点测序,结果显示成功构建了携带有定点突变Q151M的纯合子单克隆细胞株8E5Q151M。细胞株8E5Q151M多次传代后的细胞及细胞分泌的无感染性HIV-1病毒颗粒可被持续检测出Q151M突变位点。结论利用CRISPR/Cas9点突变技术成功构建稳定携带有Q151M耐药突变位点的细胞株8E5Q151M,为制备HIV-1基因型耐药检测质控品提供新的技术平台。

渤海油田Y型电泵分采管柱优化设计研究

针对渤海油田大型电泵与9-5/8″套管不匹配的问题,对Y型电泵分采管柱配套工具进行优化。研制出Y接头、电泵及测试电缆引鞋、扁电缆护罩等一系列工具,通过对此系列工具进行性能测试试验,结果表明设计的工具满足海上油田安全作业相关技术要求。在渤海油田某油井进行的现场应用表明优化后的Y型电泵分采管柱能在9-5/8″套管中安全下入,说明设计的一系列新工具具有一定的推广价值。