3D打印技术用于经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术应用效果及对血清MMP-9和IGF-1水平的影响

目的:探究3D打印技术在经鼻蝶窦入路垂体腺瘤(PA)切除术的应用效果及对血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法:选取2020年5月至2022年5月秦皇岛市第一医院收治的84例PA患者,按照随机数表法将其分为观察组和对照组,每组42例。对照组行经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术,观察组行经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术联合应用3D打印技术,比较两组肿瘤切除效果、围术期指标、视力改善情况、MMP-9和IGF-1水平,以及鼻腔功能的鼻气道阻力(NAR)、T&T嗅觉测试评分及并发症。结果:观察组肿瘤切除效果优于对照组,差异有统计学意义(U=2.286,P<0.05);观察组手术时间、术中出血量及住院时间均少于对照组,差异有统计学意义(t=4.780、11.438、11.842,P<0.05);术后3 d、7 d时观察组血清MMP-9和IGF-1水平低于对照组,差异有统计学意义(F=7.526、4.985,P<0.05);术后1个月、3个月时观察组NAR及T&T嗅觉测试评分低于对照组,差异有统计学意义(F=6.359、8.436,P<0.05);两组视力视野改善情况及并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3D打印技术用于经鼻蝶窦入路垂体腺瘤切除术可提高肿瘤切除效果,优化手术操作,减少创伤,有利于减轻疼痛,改善嗅觉功能与视力视野,并能降低血清MMP-9、IGF-1水平,且安全性较高。

Caspase-9和CMYC在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及与患者病理特征和预后的关系

目的探讨半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)和细胞性骨髓细胞瘤病病毒癌基因(CMYC)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达及其与患者病理特征和预后的关系。方法选取2017年2月至2020年2月周口市中心医院收治的60例DLBCL患者纳入研究,比较DLBCL肿瘤组织及病灶旁正常组织的Caspase-9、CMYC表达水平,分析Caspase-9、CMYC表达与临床病理特征的关系,比较预后良好和预后不良患者的临床病理特征、Caspase-9、CMYC表达水平,采用二元Logistic回归分析DLBCL患者预后不良的影响因素。结果DLBCL患者肿瘤组织中Caspase-9阳性率为43.33%,明显低于正常组织的80.56%,CMYC阳性率为36.67%,明显高于正常组织的13.88%,差异均有统计学意义(P<0.05);Ann Arbor分期Ⅰ~Ⅱ期、国际预后指数(IPI)评分0~2分患者DLBCL肿瘤组织Caspase-9阳性率明显高于Ⅲ~Ⅳ期和3~4分患者,CMYC阳性率低于Ⅲ~Ⅳ期、3~4分患者,差异均有统计学意义(P<0.05);预后不良患者Ann Arbor分期中Ⅲ~Ⅳ期占比、IPI评分中3~4分占比、CMYC阳性表达占比分别为73.08%、65.38%、69.23%,均高于预后良好组的35.29%、32.35%、11.76%,Caspase-9阳性表达占比为23.08%,低于预后良好组的58.82%,差异均有统计学意义(P<0.05);Ann Arbor分期、IPI评分、Caspase-9、CMYC均为影响DLBCL患者预后不良的独立影响因素(P<0.05),其中Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期预后不良风险是Ⅰ~Ⅱ期的9.008倍;IPI评分3~4分预后不良风险是0~2分的10.298倍;Caspase-9表达阳性预后不良风险是阴性的0.622倍;CMYC表达阳性预后不良风险是阴性的19.922倍。结论Caspase-9、CMYC异常表达参与DLBCL的进展,与肿瘤恶性程度有关,且Caspase-9、CMYC异常表达是DLBCL预后不良的独立影响因素,对DLBCL预后具有一定的预测价值,可作为预测DLBCL患者预后的参考指标。

肝细胞癌患者血清ECM1、MMP-9和VEGF水平的变化及其意义

目的 探究肝细胞癌患者血清细胞外基质蛋白-1(ECM1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9和血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化及其意义。方法 对60例肝细胞癌患者进行回顾性分析,患者主要使用甲磺酸阿帕替尼进行治疗,必要时也可联合GEMOX方案肝动脉化疗栓塞术进行治疗。采用酶联免疫吸附法测定患者治疗前后的血清ECM1、VEGF、MMP-9水平。比较患者治疗前后ECM1、MMP-9和VEGF水平;比较不同临床病理特征(年龄、性别、血管侵犯、淋巴结转移、TNM分期、Edmondson分期和肿瘤直径)患者ECM1、MMP-9和VEGF水平。结果 治疗后,患者ECM1、MMP-9以及VEGF水平分别为(135.23±44.58)pg/ml、(421.25±87.56)μg/L和(657.56±54.56)pg/ml,均低于治疗前的(215.56±30.80)pg/ml、(499.56±30.56)μg/L、(798.02±50.79)pg/ml(P<0.05)。不同年龄、性别患者ECM1、MMP-9、VEGF水平比较差异无统计学意义(P>0.05);不同血管侵犯、淋巴结转移、TNM分期、Edmondson分期和肿瘤直径患者ECM1、MMP-9、VEGF水平比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 ECM1、MMP-9、VEGF三者相互作用可促进肝癌细胞的转移,可根据其水平情况,了解患者肝细胞、肝功能健康状况。

PCSK9和MIF在乳腺癌中的水平及其临床意义

目的:探讨PCSK9和MIF在乳腺癌中的水平及其临床意义。方法:选取从2021年1月至2022年12月在我院就诊的139例乳腺癌患者和125健康体检人员。测定血清及组织PCSK9和MIF水平,分析在乳腺癌中的相关性。结果:乳腺癌患者的血清PCSK9和MIF水平明显高于对照组(P Objective: To investigate the relationship between the level of PCSK9 and MIF and breast cancer. Methods: From January 2021 to December 2022, 139 breast cancer patients after surgery and 125 health people as control group were elected. The levels of propotein convertase subtilisin/kexin 9 (PCSK9) and macrophage migration inhibitory factors (MIF) were measured, and analyzed the relationship in breast cancer. Results: The serum levels of PCSK9 and MIF in breast cancer patients was significantly higher than the control group (P < 0.05). The tissue levels of PCSK9 and MIF in breast cancer patients was significantly higher than breast fibroma patients, but the difference was not statistically significant. PCSK9 levels correlated positively with MIF levels in breast cancer tissue. Conclusion: The levels of PCSK9 and MIF were related to breast cancer, and PCSK9 levels correlated positively with serum MIF levels. Through monitoring the levels of PCSK9 and MIF, the methods should provide a new theoretical basis for early diagnosis and screening of breast cancer and accurate treatment.

加味宣白承气汤对慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-21、CTRP-9和IL-33的影响

目的 观察加味宣白承气汤对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清白细胞介素-21(IL-21)、肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP-9)和白细胞介素-33(IL-33)的影响。方法 120例患者随机分为研究组与对照组各60例。对照组患者给予常规治疗,研究组在此基础上予加味宣白承气汤治疗。检查两组患者治疗前后肺功能指标[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC)]、中医证候积分、6 min步行试验(6MWT)和血清指标(IL-21、CTRP-9、IL-33),并统计两组患者临床疗效。结果 研究组总有效率为91.67%,显著高于对照组的78.33%(P<0.05);治疗后,研究组FVC、FEV1、FEV1/FVC、中医证候积分和6MWT改善较对照组明显(P<0.05),IL-21、CTRP-9、IL-33均显著低于对照组(P<0.05)。结论 采用加味宣白承气汤治疗急性加重期慢性阻塞性肺疾病患者可抑制IL-21、CTRP-9和IL-33的表达,从而促进肺功能和临床症状康复。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子、基质金属蛋白酶-9和赖氨酸去甲基化酶6B在浸润性乳腺癌组织中的表达及其病理诊断价值

目的探讨浸润性乳腺癌组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和赖氨酸去甲基化酶6B(KDM6B)蛋白的表达及其与临床病理特征的关系,并分析3种蛋白的相关性及其在浸润性乳腺癌病理诊断中的价值。方法选择2014年1月至2017年12月河南中医药大学第五临床医学院/郑州人民医院病理科保存的124例浸润性乳腺癌患者的手术切除活检标本为研究对象,另选取同期保存的低级别导管内癌组织标本20例、高级别导管内癌组织标本27例、距离浸润性乳腺癌>1 cm处癌旁组织标本22例作为对照组。采用免疫组织化学法检测乳腺癌旁组织、低级别导管内癌、高级别导管内癌及浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的表达。分析EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的相对表达量与浸润性乳腺癌临床病理特征的关系;采用Spearman法分析浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN、MMP-9、KDM6B蛋白的相关性,受试者操作特征(ROC)曲线评估EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白对浸润性乳腺癌的诊断价值。结果高级别导管内癌和浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量显著高于乳腺癌旁组织和低级别导管内癌组织(P<0.05),KDM6B蛋白的相对表达量显著低于癌旁组织和低级别导管内癌组织(P<0.05);浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量显著高于高级别导管内癌组织(P<0.05),KDM6B蛋白的相对表达量显著低于高级别导管内癌组织(P<0.05);癌旁组织与低级别导管内癌组织中EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。EMMPRIN、KDM6B蛋白相对表达量与浸润性乳腺癌患者的年龄、肿瘤部位和肿瘤直径无关(P>0.05),MMP-9蛋白相对表达量与浸润性乳腺癌患者的年龄和肿瘤部位无关(P>0.05)。EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的相对表达量与浸润性乳腺癌的世界卫生组织(WHO)分级、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),MMP-9蛋白的相对表达量与浸润性乳腺癌的肿瘤直径有关(P<0.05)。浸润性乳腺癌WHO分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级中,EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量依次升高,KDM6B蛋白的相对表达量依次降低(P<0.05);浸润性乳腺癌淋巴结有转移组EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量显著高于无淋巴结转移组(P<0.05),KDM6B蛋白的相对表达量显著低于无淋巴结转移组(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期组EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量显著高于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05),KDM6B蛋白的相对表达量显著低于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05)。在浸润性乳腺癌肿瘤直径≤2 cm、2~5 cm、>5 cm组中MMP-9蛋白的相对表达量依次升高(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN与MMP-9蛋白的表达呈显著正相关(r=0.990,P=0.000),EMMPRIN与KDM6B蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.606,P=0.000),MMP-9与KDM6B蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.612,P=0.000)。ROC曲线分析显示,EMMPRIN蛋白诊断浸润性乳腺癌的曲线下面积(AUC)为0.875[95%置信区间(CI):0.823~0.926,P<0.05],最佳界值为10.043,敏感度为79.0%,特异度为76.8%;MMP-9蛋白诊断浸润性乳腺癌的AUC为0.863(95%CI:0.808~0.917,P<0.05),最佳界值为10.070,敏感度为74.2%,特异度为76.8%;KDM6B蛋白诊断浸润性乳腺癌的AUC为0.267(95%CI:0.196~0.338,P<0.05),最佳界值为11.003,敏感度为71.0%,特异度为98.6%。结论EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白与浸润性乳腺癌的发生发展有关,检测EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的表达有助于浸润性乳腺癌的病理诊断及其浸润转移的临床判断。

北京黑猪AQP9和RPS10基因多态性及其与背膘厚的关联分析

旨在研究水通道蛋白9(aquaporins9,AQP9)及核糖体蛋白10(ribosomal protein S10,RPS10)基因多态性及其与北京黑猪背膘厚的相关性,以期能够获得北京黑猪背膘厚的有效标记。本研究以413头北京黑猪为研究对象,测定不同部位(肩部、6-7肋间、胸腰结合、腰荐结合)的背膘厚度。PCR扩增AQP9和RPS10基因的启动子区和外显子区序列筛选SNP位点,并将SNPs与各部位背膘厚进行关联分析。运用荧光定量PCR检测基因的差异表达。结果发现,AQP9基因启动子区有4个突变位点,其中1个SNP:rs332699245 A>C与胸腰结合处背膘厚关联显著(P<0.05),且该位点突变预测到了结合转录因子的改变;RPS10基因在3′UTR、CDS区共有8个突变位点,其中5个与背膘厚显著关联:rs80795904 C>G、rs80932213 T>C与6~7肋间背膘厚关联显著(P<0.05),rs3469834461 C>T与肩部背膘厚、四点平均背膘厚关联显著(P<0.05),rs80862457 C>T与胸腰结合处背膘厚、腰荐结合处背膘厚关联显著(P<0.05),rs336938272 A>C与6~7肋间背膘厚、腰荐结合处背膘厚、四点平均背膘厚均关联显著(P<0.05);且在3′UTR区检测到1个SNP(rs80862457 C>T),位于小RNA(microRNA,miRNA)结合靶点。基因表达差异分析表明,rs332699245 A>C中AA型个体的AQP9基因mRNA水平显著高于AC型个体(P<0.05),rs80862457 C>T中TT型个体的RPS10基因mRNA水平显著高于CC型个体(P<0.05)。综上所述,AQP9和RPS10基因与北京黑猪背膘厚显著关联,rs332699245 A>C和rs80862457 C>T位点可作为北京黑猪背膘厚选育的潜在分子标记,为北京黑猪的选育提供理论支撑。

戊糖片球菌37X-9和茶多酚对发酵羊肉香肠生物胺及品质的影响

为研究发酵剂和茶多酚对发酵羊肉香肠安全品质的影响,降低生物胺在发酵羊肉香肠制作过程中的积累,该研究利用戊糖片球菌37X-9和茶多酚制作发酵羊肉香肠,分为对照组、茶多酚组、37X-9组和37X-9+茶多酚组,对发酵羊肉香肠制作过程中理化指标、微生物指标、游离氨基酸和生物胺的变化进行分析。研究结果表明:发酵羊肉香肠中37X-9+茶多酚组的色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺和酪胺含量均明显低于对照组。37X-9+茶多酚组的总游离氨基酸含量(130.41 mg/100 g)显著高于对照组(91.63 mg/100 g)(P<0.05)。除此之外,戊糖片球菌37X-9和茶多酚可以抑制发酵羊肉香肠的pH值、水分含量、水分活度的降低,提升香肠的硬度、弹性和咀嚼度。因此戊糖片球菌37X-9和茶多酚可以改善发酵羊肉香肠的品质,提高发酵羊肉香肠的安全性。

腹主动脉瘤患者血清转胶蛋白、基质金属蛋白酶9和核因子-κB p65水平检测及意义

目的:检测腹主动脉瘤(AAA)患者血清转胶蛋白(TAGLN)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和核因子-κB(NF-κB)p65水平变化,探讨其临床意义。方法:通过酶联免疫吸附法检测肾下AAA患者80例(AAA组)及体检健康者50例(健康组)血清TAGLN、MMP-9和NF-κB p65水平并进行比较。分析三者间的相关性,分析三者对AAA的诊断价值。结果:健康组血清TAGLN水平高于AAA组,MMP-9和NF-κB p65水平低于AAA组(均P<0.05)。血清TAGLN与MMP-9和NF-κB p65呈负相关(r=-0.196、-0.364,均P<0.05),MMP-9与NF-κB p65呈正相关(r=0.213,P=0.015)。TAGLN、MMP-9和NF-κB p65联合诊断AAA的曲线下面积(AUC)高于任意单独指标,而敏感度和特异度不低于任意单独指标(均P<0.05)。结论:AAA患者血清TAGLN水平升高,MMP-9和NF-κB p65水平降低,三者联合检测对AAA的诊断具有较高价值。

肝细胞癌组织HOXC9和KIF4A表达及其临床意义探讨

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者癌组织同源盒基因C9(HOXC9)和驱动蛋白家族成员4A(KIF4A)蛋白表达及其临床意义。方法2018年1月~2021年1月我院收治的86例HCC患者,行肝叶手术治疗,取癌组织和癌旁肝组织,采用免疫组织化学染色法检测组织HOXC9和KIF4A蛋白表达。随访2年。结果HCC癌组织HOXC9和KIF4A高表达阳性率分别为69.8%和51.2%,均显著高于癌旁肝组织的15.1%和16.3%,差异具有统计学意义(P<0.05);56例肿瘤细胞低/中分化、40例Ⅱb/Ⅲb期TNM分期、38例有肿瘤包膜侵犯和37例微血管侵犯患者癌组织HOXC9蛋白高表达阳性率分别为78.6%、85.0%、71.1%和83.8%,均显著高于30例高分化、46例Ⅰa/Ⅱa期TNM分期、48例无肿瘤包膜侵犯和49例无微血管侵犯患者癌组织(分别为53.3%、56.5%、47.9%和59.2%,P<0.05);肿瘤细胞低/中分化、Ⅱb/Ⅲb期TNM分期、肿瘤包膜侵犯和微血管侵犯患者癌组织KIF4A蛋白高表达阳性率分别为60.7%、80.0%、60.5%和89.2%,也显著高于对应组癌组织表达(分别为33.3%、26.1%、43.8%和22.4%,P<0.05);在随访结束时,86例患者生存38例(44.2%),死亡48例(55.8%);60例癌组织HOXC9蛋白高表达患者生存时间为14.0(7.8,26.7)个月,显著短于26例HOXC9蛋白低表达患者【27.0(18.8,30.5)个月,P<0.05】;44例癌组织KIF4A蛋白高表达患者生存时间为9.0(7.0,26.3)个月,也显著短于42例HOXC9蛋白低表达患者【15.3(26.0,28.8)个月,P<0.05】。结论HCC患者癌组织HOXC9和KIF4A蛋白高表达可能与肿瘤细胞恶性程度相关,并影响肝叶手术治疗后预后,值得深入研究。

先兆流产保胎治疗孕妇血清PCSK9和CTRP6水平对妊娠结局的预测价值研究

目的探究先兆流产保胎治疗孕妇血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9),C1q肿瘤坏死因子相关蛋白6(complement-C1q/tumor necrosis factor-related protein 6,CTRP6)水平对妊娠结局的预测价值。方法选取2021年08月~2022年05月在陕西中医药大学第二附属医院行保胎治疗的80例先兆流产孕妇为研究对象,根据妊娠结局将其分为良好妊娠结局组(n=62)、不良妊娠结局组(n=18);另选取同期在该院孕检正常的孕妇60例作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测研究对象血清PCSK9,CTRP6,孕酮和β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平;采用Pearson法分析血清PCSK9,CTRP6水平与孕酮,β-HCG水平的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响先兆流产保胎治疗孕妇妊娠结局的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析先兆流产保胎治疗孕妇血清PCSK9和CTRP6对妊娠结局的预测价值。结果对照组、良好妊娠结局组和不良妊娠结局组的孕酮(45.65±3.48,38.29±3.54和31.56±4.11 nmol/L),β-HCG(32056.56±4244.54,23642.32±3897.67和11375.56±3454.35 mIU/L),CTRP6(436.53±36.23,328.44±31.06和277.86±25.56 ng/ml)水平均呈逐渐降低趋势,PCSK9(64.22±10.35,82.24±13.33和114.56±17.67 ng/ml)表达水平呈逐渐升高趋势,差异具有统计学意义(F=129.231,199.334,244.007,111.297,均P<0.05)。Pearson法分析显示,血清PCSK9与孕酮、β-HCG水平呈负相关(r=-0.545,-0.514,均P<0.05),血清CTRP6与孕酮、β-HCG水平呈正相关(r=0.567,0.496,均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,PCSK9水平升高为先兆流产保胎治疗孕妇妊娠结局的独立危险因素,CTRP6,孕酮、β-HCG水平升高为先兆流产保胎治疗孕妇妊娠结局的独立保护因素(P<0.05)。ROC结果显示,先兆流产保胎治疗孕妇血清PCSK9,CTRP6预测患者发生不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.843,0.849,两者联合预测的AUC为0.941,优于两者各自单独预测(Z=1.725,1.882,P<0.05),且特异度和敏感度分别为85.48%,94.44%。结论先兆流产保胎治疗孕妇血清PCSK9水平显著上调,CTRP6水平显著下调,两者在预测先兆流产保胎治疗孕妇的妊娠结局中具有重要价值。

血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9和脂多糖对老年非瓣膜性心房颤动患者心脑血管病死亡的预测价值分析

目的探讨血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)、脂多糖对老年非瓣膜性心房颤动(NVAF)患者心脑血管病死亡的预测价值。方法选取2016年10月至2020年12月海南省海口市人民医院收治的老年NVAF患者575例,随访3年根据是否发生心脑血管病死亡分为死亡组(74例)和存活组(501例),采用酶联免疫吸附试验法检测血清PCSK9、脂多糖水平。通过多因素Logistic回归分析老年NVAF患者心脑血管病死亡的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PCSK9、脂多糖水平对老年NVAF患者心脑血管病死亡的预测价值。结果随访3年,575例老年NVAF患者心脑血管病死亡率为12.9%(74/575)。死亡组血清PCSK9、脂多糖水平均高于存活组(均P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,年龄增加、CHA 2DS 2-VASc评分增加、急性心肌梗死、卒中/短暂性脑缺血发作、心力衰竭和PCSK9升高、脂多糖升高为老年NVAF患者心脑血管病死亡的独立危险因素(均P<0.05)。ROC曲线显示,血清PCSK9、脂多糖水平联合预测老年NVAF患者心脑血管病死亡的曲线下面积为0.873,大于血清PCSK9、脂多糖水平单独预测的0.781、0.795(均P<0.001)。结论血清PCSK9、脂多糖水平升高是老年NVAF患者心脑血管病死亡的独立危险因素,血清PCSK9、脂多糖水平联合对老年NVAF患者心脑血管病死亡的预测价值较高。

CYP2C9和COX-2基因多态性对非甾体类抗炎药治疗强直性脊柱炎临床疗效的影响

目的探讨细胞色素P450同工酶2C9(CYP2C9)和环氧化酶-2(COX-2)基因多态性对非甾体类抗炎药治疗强直性脊柱炎(AS)临床疗效的影响。方法选择2020年1月至2021年6月在该院就诊的117例AS患者作为观察组;根据“性别相同、年龄±1岁”的原则,选择同期在该院健康体检的受试者作为117例作为对照组。观察两组受试者CYP2C9*3和COX-2基因启动子区域中的1190A/G和-1195G/A基因多态性,观察AS患者治疗前后的临床资料变化,观察CYP2C9*3、COX-2-1190A/G、COX-2-1195G/A等不同基因型AS患者基于ASAS20改善标准和ASAS40改善标准的疗效是否存在差异。结果两组受试者CYP2C9*3基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。两组受试者COX-2-1290A/G基因型和等位基因频率以及COX-2-1195G/A基因型和等位基因频率的差异均存在统计学意义(P<0.05)。治疗后,AS患者晨僵持续时间、周围关节受累、指地距、枕墙距、Schober测试、ESR、CRP、BASDAI(VAS)、BASDAI≥4、BASFI(VAS)、总体评价(VAS)等指标数值均较治疗前显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。117例患者中,有68例(58.12%)符合ASAS20改善标准,30例(25.64%)符合ASAS40改善标准。不同CYP2C9*3基因型(AA、AC+CC)之间的ASAS20、ASAS40改善情况差异均无统计学意义(P>0.05);不同COX-2-1290A/G基因型之间的ASAS20、ASAS40改善情况差异存在统计学意义(P<0.05),其中AA基因型患者的ASAS20和ASAS40改善率均显著高于AG+GG基因型患者(P<0.05);不同COX-2-1195G/A基因型之间的ASAS20、ASAS40改善情况差异存在统计学意义(P<0.05),其中GG+AA基因型的ASAS20和ASAS40改善率显著高于GG患者(P<0.05)。结论COX-2-1290A/G和COX-2-1195G/A多态性可增加AS患者预后不良的风险,可能是预测非甾体类抗炎药治疗AS疗效的生物学指标,而CYP2C9*3多态性与非甾体类抗炎药治疗AS疗效的关系尚有待进一步研究。

血清CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9和SCC水平对食管癌的诊断价值

目的探究血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原19-9(CA19-9)和鳞状细胞癌抗原(SCC)水平对食管癌的诊断价值。方法选取2022年2月至2024年2月郑州大学附属郑州中心医院收治的86例食管癌患者的临床资料开展回顾性分析(研究组),另按2∶1比例选取郑州大学附属郑州中心医院同期体检的43名健康人群的临床资料进行对照研究(对照组),比较两组血清CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9和SCC水平差异,并通过受试者工作特征(ROC)曲线分析其诊断食管癌的价值。分析血清CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9和SCC水平与食管癌病理特征的关系。结果研究组血清CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9和SCC水平均高于对照组(P<0.05)。二元logistic回归分析结果显示,CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9、SCC均是影响食管癌发病危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9和SCC水平诊断食管癌的AUC分别为0.747、0.779、0.745、0.749、0.765,诊断具有一定价值。联合数据诊断食管癌的AUC为0.855,敏感度为90.7%、特异性为98.5%。肿瘤≥3 cm患者血清CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9和SCC水平均高于肿瘤<3 cm患者;临床分期Ⅲ~Ⅳ期患者血清CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9和SCC水平均高于Ⅰ~Ⅱ期患者;存在淋巴结转移患者血清CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9和SCC水平均高于未发生淋巴结转移患者(P<0.05)。结论食管癌患者血清CYFRA21-1、VEGF、AFP、CA19-9、SCC水平升高,且与食管癌临床特征密切相关,是食管癌发生的危险因素,可作为诊断食管癌的相关指标,且联合诊断价值更好。

枳SPL9和SPL13全长cDNA克隆、亚细胞定位和表达分析

【目的】从枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]中克隆SBP类[SQUAMOSA(SQUA)promoter-binding-like]转录因子基因SPL9和SPL13全长,构建SPL9和SPL13亚细胞定位表达载体验证其是否具有核定位功能,利用荧光定量PCR研究其在枳不同组织的表达特性,初步确定SPL9和SPL13在枳生长发育过程中的作用。【方法】利用生物信息学结合RACE技术以枳花器官的cDNA为模板,克隆出SPL9和SPL13基因全长,分别命名Pt-SPL9和Pt-SPL13,大小分别是1519bp和1824bp,在GenBank的登录号分别是FJ502237和FJ502238;构建Pt-SPL9和Pt-SPL13亚细胞定位载体35S-GW-FJ502237/FJ502238-GFP,基因枪转化洋葱表皮细胞,暗培养24h后激光共聚焦显微镜下观察;利用SYBR Green I实时定量RT-PCR方法检测Pt-SPL9和Pt-SPL13在根、茎、叶、花序、花和果等不同组织中的表达。【结果】生物信息学分析表明,Pt-SPL9和Pt-SPL13的cDNA序列中都有microRNA156的识别位点,Pt-SPL9与金鱼草、拟南芥和玉米SPL9的同源性分别为48.9%、42.5%和41.7%;Pt-SPL13与拟南芥SPL13、水稻的SPL16和玉米的TGA1同源性分别为40.8%、38.1%和35.8%。Pt-SPL9和Pt-SPL13与其它植物的SBP一样有着高度保守的序列,即SBP结构域和一个双向核定位信号KRXXXRRRK。亚细胞定位结果表明,Pt-SPL9和Pt-SPL13均定位于细胞核中。SYBR Green I实时定量RT-PCR结果表明,Pt-SPL9和Pt-SPL13在各个器官均有表达,但表达量不同,Pt-SPL9在茎中的表达量最高,在花和叶中的表达量次之,在根、花芽和幼果中的表达量最低;Pt-SPL13在幼果中的表达量最高,在茎和花芽中的表达量相当,其次为叶,在花和根中的表达量很低。【结论】转录因子Pt-SPL9和Pt-SPL13均具有核定位功能,Pt-SPL9和Pt-SPL13对枳的茎和果实的发育可能有着重要作用。

比较CRISPR/Cas9和PE技术对HEK293T细胞中eGFP基因的编辑效率影响

为了构建增强型eGFP(Enhanced GFP)基因CRISPR/Cas9和引导编辑(Prime Editing,PE)相关载体,确定CRISPR/Cas9和PE对eGFP基因的编辑效率,本研究通过生物信息学对eGFP基因进行靶位点分析,人工合成eGFP sgRNA/15 bp缺失的pegRNA及niRNA,构建LentiCRISPRV2-eGFP sgRNA、15 bp缺失的pU6-eGFP-pegRNA和U6-eGFP-niRNA质粒;培养293T细胞,利用荧光倒置显微镜、流式细胞仪和HiTOM深度测序,检测eGFP基因的FITC-A-Mean和细胞发生的编辑类型,同时预测不同编辑类型蛋白结构变化。结果发现,eGFP-sgRNA组的FITC-A-Mean显著低于阴性对照组;eGFP-PE2组的FITC-A-Mean极显著低于阴性对照组;eGFP-PE3b组的FITC-A-Mean极显著低于阴性对照组;Hi-TOM测序表明eGFP-sgRNA、eGFP-PE2和PE3b的编辑效率分别为20.420%、36.735%和40.180%;PE3b较PE2编辑效率提升3.445%;eGFP野生型蛋白二级结构中延伸链最多达到83个(34.73%),eGFP-CRISPR/Cas9-1bp插入蛋白二级结构中无规则卷曲达到144个(56.69%);eGFP-PE-15 bp缺失蛋白中延伸链最多达到85个(36.32%)。本试验成功构建LentiCRISPRV2-eGFP sgRNA、15 bp缺失的pU6-eGFP-pegRNA和U6-eGFP-niRNA质粒,转染后绿色荧光强度均极显著降低,CRISPR/Cas9编辑存在多种编辑形式,而PE编辑除15 bp缺失的精准编辑外存在比例较少的碱基替换,表明利用PE编辑系统可以实现精准编辑,为研究动物功能基因和精准分子育种领域奠定基础。

骨架蛋白MYH9和Palladin在肺癌发生发展中的联合作用和临床价值

目的:研究骨架蛋白MYH9和Palladin对肺癌患者预后和恶性表型的联合作用及临床价值。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载肺癌转录组数据以及相关临床信息。利用生物信息学方法,分析MYH9和Palladin对肺癌患者预后及其与临床病理特征的关系,进一步分析两者对肺癌预后的联合作用。同时构建双分子敲降和单分子敲降的NCI-H460细胞,分别采用CCK-8法检测双分子敲降对肺癌细胞增殖和耐药的影响,Transwell实验检测双分子联合敲降对肺癌细胞迁移和侵袭的影响,甲基纤维素成球实验检测双分子敲降对肺癌细胞自我更新的作用。最后通过组织芯片进一步验证MYH9和Palladin联合在肺癌中的表达及其对患者预后的影响。结果:生物信息学分析结果显示MYH9和Palladin在肺癌组织中均呈现高表达,相比于低表达组患者,MYH9和Palladin高表达组患者的预后以及临床分期更差,其中双分子均高表达组肺癌患者的预后最差(P<0.01)。细胞生物学实验结果表明双分子敲降组肺癌细胞增殖、耐药性、迁移、侵袭及自我更新能力均明显低于单分子敲降组和对照组细胞(P<0.01)。组织芯片结果进一步证实了相比于癌旁组织,MYH9和Palladin在肺癌组织中均呈现高表达,与低表达组相比,MYH9和Palladin高表达组的肺癌患者预后更差(P<0.01),且双分子均高表达组肺癌患者的临床预后最差。结论:MYH9和Palladin的联合作用对肺癌细胞干性相关特征的影响显著高于其单独作用,MYH9和Palladin双分子联合对肺癌的临床预后作用更显著,这表明MYH9和Palladin有可能成为靶向非小细胞肺癌的联合靶标分子。

川崎病患儿血清CTRP9和sCD146水平表达与冠状动脉损伤的相关性研究

目的探究川崎病(Kawasaki disease,KD)患儿血清C1q/TNF相关蛋白9(C1q/tumor necrosis factor relatedprotein 9,CTRP9)和可溶性CD146(soluble CD146,sCD146)水平与冠状动脉损伤(coronary artery lesion,CAL)的相关性。方法选取重庆市开州区人民医院2020年10月~2023年2月收治的116例KD患儿为研究对象(KD组),根据超声诊断结果将KD患儿分为CAL组(n=40)和非CAL组(n=76);另根据CAL严重程度将CAL组KD患儿分为轻度组(n=14)、中度组(n=18)和重度组(n=8)。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清CTRP9和sCD146水平;比较对照组、CAL组、非CAL组及不同CAL严重程度患儿血清CTRP9,sCD146水平;多元Logistic回归分析影响KD患儿出现CAL的因素;ROC曲线分析血清CTRP9,sCD146水平对KD患儿出现CAL的预测价值。结果与对照组比较,KD组血清CTRP9水平降低(3.27±0.27ng/ml vs 3.79±0.91ng/ml),sCD146水平升高(191.28±50.39 ng/mlvs 143.97±38.29 ng/ml),差异具有统计学意义(t=5.900,8.051,均P<0.05)。CAL组患儿血清CTRP9水平低于非CAL组(3.01±0.23ng/ml vs 3.41±0.29 ng/ml),sCD146水平高于非CAL组(232.18±59.37 ng/ml vs 169.76±45.66ng/ml),差异具有统计学意义(t=7.557,6.294,均P<0.05)。与轻度组比较,中度组、重度组患儿血清CTRP9水平降低(q=3.277,6.281),血清sCD146水平升高(q=3.154,3.551),且重度组患儿血清CTRP9水平低于中度组(q=3.845),血清sCD146水平高于中度组(q=3.145),差异均具有统计学意义(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,白细胞计数(white blood cell count,WBC)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(Creactive protein,CRP)、CTRP9和sCD146均是影响KD患儿发生CAL的影响因素(均P<0.05)。ROC曲线结果显示,CTRP9,sCD146单独预测KD患儿发生CAL的AUC分别为0.781,0.782,敏感度分别为82.5%,67.5%,特异度分别为52.2%,55.7%,两者联合诊断KD患儿发生CAL的AUC为0.889,敏感度和特异度分别为97.5%,65.9%。结论血清CTRP9,sCD146为KD患儿发生CAL的影响因素,且CTRP9水平在CAL患儿血清中水平降低,sCD146水平升高,两者联合可有效预测KD患儿CAL的发生。

血清Galectin-9和PD-L1蛋白水平与高血压脑出血病人病情严重程度及预后的相关性分析

目的探讨血清半乳糖凝集素-9(Galectin-9)和抗程序性死亡因子配体1(PD-L1)蛋白水平与高血压脑出血病人病情严重程度及预后的相关性。方法纳入2020年1月至2022年1月恩施土家族苗族自治州中心医院所收治的117例高血压脑出血病人作为研究对象,根据病人病情严重程度将其分为将分为轻型组(41例),中型组(54例)以及重型组(22例),并根据病人的预后状态将其分为预后良好组(76例)和预后不良组(41例)。采用酶联免疫吸附测定检测病人血清中Galectin-9,PD-L1的表达水平;采用logistic回归分析与高血压脑出血病人预后状态有关的影响因素;采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析Galectin-9、PD-L1对高血压脑出血病人预后状态的预测价值。结果血清Galectin-9水平随病情严重程度的增加而升高,而血清PD-L1水平则随病情严重程度的增加逐渐降低(P<0.05);预后良好组病人血清Galectin-9水平(12.38±2.97)ng/L低于预后不良组(18.46±5.86)ng/L,而血清PD-L1水平(68.19±11.88)mg/L则高于预后不良组(53.23±9.76)mg/L(P<0.05);预后不良组中出血量≥30 mL、出血破入脑室以及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分≥20分的病人所占比例均高于预后良好组(P<0.05);出血量≥30 mL、出血破入脑室、NIHSS评分≥20分及Galectin-9≥15 ng/L均为高血压脑出血病人预后不良的危险因素,而PD-L1≥60 mg/L则为保护因素;血清Galectin-9和PD-L1预测高血压脑出血病人预后的曲线下面积(AUC)分别为0.88、0.82,二者联合预测的AUC为0.94,优于血清Galectin-9、PD-L1各自单独预测(Z_(二者联合-Galectin-9)=2.21、Z_(二者联合-PD-L1)=1.98,P=0.022、0.047)。结论血清Galectin-9和PD-L1表达水平与高血压脑出血病人病情严重程度密切相关,二者联合检测对病人的预后具有较好的预测效能。

分子标记辅助选择聚合Xa23,Pi9和Bt基因

利用分子标记辅助选择将高抗水稻白叶枯病的Xa23基因、广谱高抗稻瘟病的Pi9基因、抗水稻螟虫和稻纵卷叶螟的Bt基因聚合到同一株系中,获得了三基因聚合的纯合株系。病、虫抗性鉴定结果显示:聚合了Xa23、Pi9和Bt基因的株系HB1471、HB1473能同时抗白叶枯病、稻瘟病和稻纵卷叶螟;与Xa23、Pi9基因的供体材料L10相比,对白叶枯病和稻瘟病的抗谱相同、抗性水平相当;对稻纵卷叶螟抗性与Bt基因的供体亲本MH63-Bt水平相当。Xa23、Pi9和Bt三基因纯合株系可以作为水稻育种的多抗供体材料。