Septin9甲基化及膳食因素对结直肠癌发病的影响

目的:探讨Septin9甲基化与膳食因素对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发病的影响。方法:采用病例-对照研究分析,收集CRC病例60例,根据年龄进行1∶1匹配收集健康人群60例作为对照组。采用χ2检验比较病例和对照组的基本特征、膳食和Septin9甲基化分布,采用非条件Logistic回归分析比较不同的Septin9基因甲基化和膳食对CRC发病的影响。结果:病例组和对照组的年龄、性别、民族、家庭人均月收入、文化程度和一级亲属肿瘤史,均无显著统计学差异(P>0.05);病例组中Septin9基因甲基化阳性24例(40.0%),显著高于对照组(P<0.05),但病例组和对照组的平均每日蔬菜摄入量和家畜肉类摄入量无显著统计学差异(P>0.05);通过单因素分析所有变量,并将有统计学意义的变量纳入多因素逻辑回归中,最后确定CRC的独立危险因素包括Septin9甲基化(OR=1.88,95%CI:1.56~2.27)和平均家畜肉摄入量≥300 g/d(OR=1.30,95%CI:1.24~1.37);以Septin9甲基化阳性且平均蔬菜摄入量<400 g/d(OR=4.650,95%CI:1.393~15.518)为参照组,Septin9甲基化阳性且平均蔬菜摄入量≥400 g/d显著降低CRC的发病风险(OR=4.650,95%CI:1.393~15.518);以Septin9甲基化阳性且平均家畜肉摄入量<300 g/d(OR=4.500,95%CI:1.463~13.843)为参照组,Septin9甲基化阳性且平均家畜肉摄入量≥300 g/d显著增加CRC的发病风险(OR=7.333,95%CI:2.195~24.501)。结论:Septin9甲基化阳性人群蔬菜摄入量≥400 g/d降低CRC的发病风险,Septin9甲基化阳性且平均家畜肉摄入量≥300 g/d显著增加CRC的发病风险,对此人群减少脂肪肉类摄入并增加蔬菜摄入量具有降低CRC发病风险的可能。

ICSI导致小鼠胚胎雄原核H3K9甲基化异常以及胚胎发育迟缓

目的:以小鼠为模型,评估卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)技术的安全性。方法:模拟临床ICSI技术,通过孤雌激活、免疫荧光、胚胎移植、早期植入点检测、中期顶臀径检测等实验方法综合评估该技术。结果:ICSI导致小鼠植入前胚胎发育能力显著下降,尤其是8细胞之后的胚胎发育率下降极显著(P<0.01),而且在ICSI胚胎的雄原核上检测到异常的H3K9双甲基化荧光。进一步检测移植后的ICSI胚胎发育情况,结果显示,与对照(正常受精)相比,E5.5 d早期植入率无显著差异(P=0.6),但是E9.5 d的"正常胚胎"百分率却显著降低(P<0.01),即使在这些"正常的ICSI胚胎"中也出现了高比例的发育滞后现象。结论:ICSI有可能通过对雄原核H3K9双甲基化的影响进而影响胚胎生长发育。

血浆Septin9甲基化在肝癌鉴别诊断中的临床价值

目的探究血浆Septin9甲基化在原发性肝癌(简称肝癌)鉴别诊断中的临床价值。方法选取2018年11月至2019年11月在解放军总医院确诊的原发性肝细胞癌患者175例、胆管细胞癌患者101例和同期体检健康者163例的临床资料,分别作为肝细胞癌组、胆管细胞癌组和健康对照组,对3组肝功能、肿瘤标志物和血浆Septin9甲基化指标进行比较。结果肝细胞癌组Septin9甲基化阳性表达率[61.7%(108/175)]高于胆管细胞癌组Septin9甲基化阳性表达率[39.6%(40/101)]和健康对照组(0.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。胆管细胞癌组糖类抗原199、糖类抗原125、糖类抗原153、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、谷氨酰转移酶、总胆红素、直接胆红素水平高于肝细胞癌组和健康对照组(P<0.05)。GGT和血浆Septin9甲基化组合诊断肝细胞癌较为理想,其受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.845(95%CI:0.797~0.893),二分类Logistic回归模型对肝细胞癌和胆管细胞癌的鉴别诊断准确率为78.3%。结论Septin9甲基化检测能提高肝癌鉴别诊断准确率,可作为肝细胞癌早期筛查和诊断新的肿瘤标志物。

血浆Septin9甲基化检测在结直肠癌中的诊断价值

目的探讨血浆游离DNA中Septin9甲基化(mSEPT9)检测在结直肠癌中的诊断意义。方法收集2019年6~11月在重庆医科大学附属第二医院接受肠镜检查的患者共100例,包括确诊为结直肠癌的患者45例,非结直肠癌对照组55例,对其进行mSEPT9检测、大便隐血试验(FOBT)和癌胚蛋白(CEA)检测,评价其在结直肠癌中的应用价值。结果①mSEPT9筛查结直肠癌的敏感度为82.22%(95%CI:70.60%~93.83%),明显高于CEA(42.2%,95%CI:27.22%~57.23%),特异度为89.09%(95%CI:80.58%~97.60%),高于FOBT(75%,95%CI:60.98%~89.02%)。②结直肠癌组mSEPT9阳性率为82.22%(37/45),非结直肠癌对照组mSEPT9阳性率为10.91%(6/55),结直肠癌组和非结直肠癌组相比,mSEPT9检测结果差异有统计学意义(χ2=4.917,P<0.05)。③mSEPT9检测结果与患者性别、年龄、病例分化程度无相关性(χ2=0.020,1.142,1.649,P<0.05)。结论mSEPT9检测在结直肠癌诊断中有较高的敏感度和特异度,并且具有无创、采样方便、方法稳定等优势,可以作为临床诊断结直肠癌的辅助手段。

血浆Spetin9甲基化对结直肠癌的诊断和治疗监测作用

目的研究血浆Septin9甲基化对结直肠癌诊断和治疗监测的作用。方法收集入组结直肠癌病例和健康对照人群的血液样本进行血浆Septin9甲基化和血清癌胚抗原(CEA)检测,分析血浆Septin9甲基化与血清CEA对结直肠癌的诊断阳性率、治疗前后的动态变化以及两者与病例的临床病理因素之间的相关性。结果共收集35例结直肠癌病例和30例健康人群血液样本进行检测和分析。结直肠癌患者中血浆Septin9甲基化阳性率为74.3%,显著高于正常健康人群(P <0.001);经过手术切除或化疗后,血浆Septin9甲基化转阴率分别为75.0%、16.7%,两者比较差异有统计学意义(P=0.010);血浆Septin9甲基化与患者性别、年龄、肿瘤部位及TNM分期等临床因素无相关性(均P> 0.05)。血浆Septin9甲基化与CEA联合检测的阳性率为82.9%,明显高于单独检测血清CEA水平(P=0.034)。结论血浆Septin9甲基化可作为结直肠癌的诊断和监测的潜在指标,联合检测Septin9甲基化和血清CEA水平可显著提高结直肠癌的诊断阳性率。

SEPT9基因甲基化水平在膀胱尿路上皮病变鉴别诊断中的应用

目的探讨SEPT9基因甲基化水平在尿路上皮病变良、恶性鉴别诊断中的作用,并尝试通过联合使用SEPT9甲基化检测降低膀胱镜活检组织的假阴性率。方法对160例经病理诊断的尿路上皮病变进行SEPT9甲基化检测,分析其辅助诊断良、恶性病变的敏感性和特异性;比较癌和癌旁组织间SEPT9基因甲基化水平;在12例首次膀胱镜活检为炎症或良性病变而后续活检、电切为癌的病理组织中分别检测SEPT9基因甲基化水平。结果SEPT9基因甲基化水平鉴别诊断尿路上皮良、恶性病变的敏感性、特异性分别为98%(88/90)和94%(66/70)。47%(7/15)的癌旁组织中SEPT9基因甲基化检测结果为阳性,显示癌旁组织表观遗传修饰异常;12例首次膀胱镜活检为炎症或良性病变的组织中SEPT9基因甲基化检测阳性率为67%(8/12),再次活检、电切病理证实为癌的组织SEPT9甲基化检测阳性率为100%(12/12)。结论SEPT9基因甲基化检测可以辅助尿路上皮病变良、恶性鉴别诊断,并可能有助于减少膀胱镜活检组织的假阴性率。

血浆Septin9基因甲基化状态与PGR、G-17检测对胃癌患者的诊断价值

目的探讨血浆Septin9基因甲基化状态与胃蛋白酶原Ⅰ与胃蛋白酶原Ⅱ比值(PGR)、胃泌素-17(G-17)检测对胃癌患者的诊断价值。方法在2022年1月至2024年1月本院收治的胃部病变患者100例,其中慢性非萎缩性胃炎组(A组)和萎缩性胃炎组(B组)各30例,胃癌组(C组)40例。对比三组患者Septin9基因甲基化状态、PGR比值以及G-17水平差异,分析其水平对胃癌的早期诊断价值和预后影响。结果PGⅠ、PGR在A组、B组、C组的水平逐渐下降,其中B组的PGⅠ、PGR水平低于A组(P<0.05),C组水平低于A组、B组(P<0.05);PGⅡ、G-17在A组、B组、C组水平逐渐上升,其中B组的PGⅡ、PGR水平高于A组(P<0.05),C组的PGII、PGR水平高于A、B两组(P<0.05);C组mSeptin9阳性检出率47.50%高于A组3.33%、B组6.67%(P<0.05);在胃癌患者中,肠型胃癌、高分化的患者mSeptin9阳性率比较高(P<0.05);ROC曲线结果显示mSeptin9、PGR、G-17单独及联合检测曲线下面积分别为0.704、0.648、0.851、0.988,联合检测曲线面积高于单项指标检测,对胃癌具有良好的预测诊断价值(P<0.05)。结论mSeptin9、PGR、G-17对胃癌的具有一定的诊断价值,联合检测可以提高胃癌的诊断效能。

外周血Septin9基因甲基化在结直肠息肉复发监测中价值

目的探究外周血Septin9基因甲基化(mSEPT9)在结直肠息肉复发监测中的价值。方法选取2020年9月至2023年11月本院行结肠镜检查且病理提示为结直肠腺瘤的患者152例,根据mSEPT9结果分为阳性组及阴性组,根据是否为进展期腺瘤分为进展期组及非进展期组,回顾分析mSEPT9检测阳性的危险因素,观察息肉复发及腺瘤进展程度与血浆mSEPT9间的关系。结果年龄≥60岁是外周血mSEPT9阳性的危险因素,差异有统计学意义(P<0.05),外周血mSEPT9阳性患者息肉复发率大于阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05),进展期腺瘤患者外周血mSEPT9阳性率大于非进展期腺瘤患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血mSEPT9检测可用于结直肠息肉复发的监测。

循环血Septin9基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的诊断价值

目的探究循环血Septin9基因甲基化检测结果对结直肠癌筛查的价值,为临床筛查结直肠癌提供参考依据。方法回顾性分析2022年1月至2024年2月江苏省人民医院宿迁医院收治的68例结直肠癌患者的临床资料,作为观察组,同时回顾性分析同期在江苏省人民医院宿迁医院接受相关诊疗的67例非肿瘤的良性肛肠科疾病患者的临床资料,作为对照组。两组患者均进行血清糖类抗原199(CA199)、糖类抗原724(CA724)、癌胚抗原(CEA)、外周血Septin9基因甲基化检测。比较两组患者血清CA199、CA724、CEA水平,外周血Septin9基因甲基化的检测结果;分析观察组Septin9基因甲基化检测结果与TNM分期的关系;以病理诊断结果为金标准,比较CA199、CA724、CEA水平及Septin9基因甲基化对结直肠癌的诊断价值。结果观察组患者的血清CA199、CA724、CEA水平均高于对照组(均P<0.05);对照组共检出3例Septin9基因甲基化阳性(肛瘘、混合痔、肛裂中各检出1例),阳性检出率为4.48%(3/67);观察组共检出59例Septin9基因甲基化阳性,阳性检出率86.76%(59/68),相较于对照组,观察组患者的阳性检出率更高(P<0.05)。随着结直肠癌患者TNM分期的升高,Septin9基因甲基化阳性检出率也会随之升高;Septin9基因甲基化对结直肠癌的诊断灵敏度、特异度、准确度均高于CA199、CA724、CEA,且CEA的灵敏度、准确度均高于CA199、CA724(均P<0.05)。结论循环血Septin9基因甲基化检测能够评估结直肠癌的发生、发展,且其诊断价值高于CA199、CA724、CEA,可用于结直肠癌的筛查中。

结直肠癌患者血浆Septin9 DNA甲基化联合FOBT检测的临床应用价值

目的:探讨血浆Septin9 DNA甲基化及粪便隐血试验(FOBT)在结直肠癌(CRC)诊断中的应用价值。方法:回顾性收集2017年6月至2022年1月我院收治并经病理检查确诊的101例结直肠良性腺瘤患者、209例结直肠癌患者分别作为良性腺瘤组和结直肠癌组,选取同期在我院进行体检的98例健康人群作为正常对照组,比较三组一般资料及血浆Septin9 DNA甲基化及FOBT阳性情况,比较不同病理特征、不同临床分期结直肠癌患者血浆Septin9 DNA甲基化、FOBT阳性情况,采用受试者工作曲线(ROC)评估血浆Septin9 DNA甲基化、FOBT单项及联合检测对结直肠癌的诊断价值。结果:三组血浆Septin9 DNA甲基化、FOBT阳性率比较,结直肠癌组高于良性腺瘤组及正常对照组,良性腺瘤组高于正常对照组(P<0.05);肿瘤低分化、淋巴结转移、脉管/神经侵犯的结直肠癌患者血浆Septin9 DNA甲基化和FOBT阳性率高于肿瘤高分化、中分化及未发生淋巴结转移、未发生脉管/神经侵犯的结直肠癌患者(P<0.05);随着结直肠癌TNM临床分期升高,血浆Septin9 DNA甲基化及FOBT阳性率升高,差异具有统计学意义(P<0.05);血浆Septin9 DNA甲基化和FOBT联合诊断结直肠癌的敏感度、曲线下面积(AUC)(87.08%、0.885)均高于两者单独诊断(59.33%、0.744和52.63%、0.643,P<0.05);血浆Septin9 DNA甲基化诊断结直肠癌的特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为89.45%、85.52%和67.68%;FOBT分别为76.38%、70.06%和60.56%,两者联合诊断分别为89.95%、90.10%和86.89%。联合诊断优于单项诊断。结论:随着结直肠病变恶性程度的增加,血浆Septin9 DNA甲基化和FOBT阳性率升高,血浆Septin9 DNA甲基化、FOBT联合检测对结直肠癌具有较高的诊断价值,可作为结直肠癌的实验室诊断指标。

Septin9基因甲基化检测对肿瘤风险筛查的价值分析

目的:分析Septin9基因甲基化检测健康体检人群肿瘤风险筛查中的应用价值。方法:选取2021年5月~2022年8月于本院健康管理中心行Septin9基因甲基化检测的健康体检人群462例为研究对象。分别对患者进行Septin9基因甲基化检测和血清YKL-40检测。以肠镜检查结果作为金标准,分析两种检测方法对结直肠癌的阳性检出率,并结合肠镜检查结果分析其符合率以及两种检测方法在不同年龄人群中的筛查差异。结果:根据检测结果显示Septin9基因甲基化的阳性检出率为14.07%(65/462例),YKL-40检出率为9.09%(42/462例),两组差异具有统计学意义(P<0.05)。结合肠镜检查结果显示,采用Septin9基因甲基化检测的符合率高于采用血清YKL-40检测(P<0.05)。Septin9检测在高龄组的检查率高于低龄组(P<0.05),而CEA检测在不同年龄的筛查人群中差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Septin9基因甲基化检测于健康人群的肿瘤筛查有较高的应用价值,帮助人们尽早发现结直肠癌,应作为健康人群的体检的常规项目,尤其是高龄人群。

血浆 Septin9 基因甲基化检测对结直肠癌诊断的价值研究

目的探讨血浆中Septin9基因甲基化(methylated Septin 9,mSEPT9)检测在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)诊断中的应用价值。方法收集2020年5月至2022年4月在右江民族医学院附属医院收治并经病理学诊断为非CRC患者42例和CRC患者129例,分别作为非CRC组和CRC组,分析患者血浆mSEPT9检测、大便隐血试验(FOBT)、癌胚抗原(CEA)和CA199检测结果,评价其单项检测和基于血浆mSEPT9的联合检测在CRC诊断中的应用价值。结果①CRC组mSEPT9检测阳性率为58.14%(75/129),非CRC组mSEPT9检测阳性率为19.05%(8/42),两组差异具有统计学意义(P<0.001)。②血浆mSEPT9检测CRC的敏感度为58.14%,高于CEA(39.53%)和CA199(19.38%);特异度为80.95%,高于FOBT(47.62%),基于血浆mSEPT9检测的联合检测敏感度均高于其单项检测。结论mSEPT9检测在CRC诊断中具有较高的敏感性和特异度,基于mSEPT9的联合检测敏感度高于单项检测,是CRC诊断重要的辅助手段。

Septin9基因甲基化检测方法的建立及在结直肠癌血浆标本检测中的应用探讨

目的以荧光聚合酶链反应(PCR)技术为基础,构建早期筛查结直肠癌的血液Septin9甲基化检测体系。方法在美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库查找Septin9甲基化的CpG岛位点,设计相应的PCR引物。提取结直肠癌组织和癌旁组织的DNA,PCR扩增并测序确认Septin9基因启动子区高甲基化位点。针对高甲基化位点,设计荧光PCR和Taqman探针检测技术构建血浆标本甲基化检测体系,并对该检测体系的准确度、特异度、重复性及最低检出量进行评估分析。在57例结直肠癌患者和30例健康人血浆标本中进行Septin9甲基化检测,验证该检测体系的可靠性。结果组织标本中经测序确认Septin9基因高甲基化位点。以该位点为靶点设计荧光PCR检测体系,经评估,该检测体系的准确度为100%,特异度和重复性均为100%,最低检出量可达0.1ng/μL。在57例结直肠癌患者血浆标本中,Septin9甲基化位点检测的阳性率为71.92%(41/57),结直肠癌患者病理分期Ⅰ和Ⅱ期阳性率达64.2%;而健康人群血浆中Septin9基因均无甲基化。结论以Septin9基因甲基化位点为靶标的血浆荧光PCR检测体系具有灵敏度、特异度及准确度高的特点,是结直肠癌早期筛查的可靠检测技术,具有良好的临床应用前景。

血浆Septin9甲基化对结直肠癌术后复发/转移监测的价值

目的评价血浆Septin9甲基化(methylated Septin9,mSEPT9)在结直肠癌诊断和术后复发/转移监测中的价值。方法选取北京市肛肠医院(北京市二龙路医院)2020年1–12月期间住院手术治疗且术前mSEPT9为阳性的结直肠癌患者76例,其中术后1周mSEPT9仍为阳性者19例(mSEPT9阳性组),mSEPT9转阴者57例(mSEPT9转阴组),比较2组患者的临床病理特征及术后复发/转移情况。结果mSEPT9阳性组与mSEPT9转阴组在淋巴结转移率、脉管或神经浸润和临床分期方面的差异均具有统计学意义(P=0.024,P=0.009,P=0.007);在年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤分化程度和肿瘤浸润深度(T分期)方面的差异无统计学意义(P>0.05)。mSEPT9阳性组术后有2例患者出现肝转移,mSEPT9转阴组未见复发/转移病例(P=0.024)。结论mSEPT9可作为结直肠癌诊断和术后治疗效果监测的潜在肿瘤标志物,对于术后mSEPT9仍为阳性的患者应加强监测。

血浆甲基化Septin9基因联合血清CEA在结直肠癌诊断中的临床意义

分析血浆甲基化Septin9基因联合血清癌胚抗原(CEA)在结直肠癌诊断中的临床意义。方法 选取2022年1月-2023年1月在本院诊断为结直肠癌的患者为结直肠癌组;同期诊断为结直肠良性肿瘤的患者为肠息肉组;同期进行健康体检的为正常组,三组均接受血浆Septin9甲基化及血清CEA 的检测。结果 结直肠癌组阳性检出率高于肠息肉组、正常组检出率;联合检测阳性率高于二者单独检测结果,差异均显著(p<0.05)。结论 二者联合检测在结直肠癌中具有较高诊断价值,可作为肿瘤标志物的辅助诊断,值得临床进一步推广与使用。

赭曲霉毒素A对HEK293细胞DNA和组蛋白甲基化修饰酶的影响

探讨了赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)诱导HEK293细胞整体基因组DNA甲基化和组蛋白H3K9甲基转移酶活性变化的剂量效应及可能的调控机制。结果表明,OTA抑制了HEK293细胞的生长,降低了整体基因组DNA甲基化水平,并呈剂量效应关系。随OTA暴露剂量的增加,DNA甲基化转移酶DNMT1 mRNA表达量降低。且本研究首次探究了OTA对组蛋白H3K9甲基化修饰酶的影响。结果显示,OTA引起组蛋白H3K9甲基转移酶活性升高,且H3K9甲基化修饰酶G9a和SETDB1 mRNA表达量在高剂量OTA暴露时显著升高。OTA可能分别通过调控DNMT1、G9a及SETDB1使整体基因组DNA甲基化水平降低和H3K9甲基转移酶活性升高,这可能是OTA导致肾毒性的表观遗传机制。

血浆循环肿瘤DNA SEPT9基因甲基化与血清CEA及CA19-9在结直肠癌辅助诊断中的价值

目的比较SEPT9基因甲基化(m SEPT9)与癌胚抗原(CEA)及糖类抗原19-9(CA19-9)在结直肠癌(CRC)辅助诊断中的价值。方法收集CRC 35例(CRC组)、结肠直肠腺瘤65例(腺瘤组)和健康对照人群104例(对照组)的外周血样本,通过Real-time PCR法检测血浆m SEPT9状态,通过化学发光法检测血清CEA和CA19-9。结果 CRC组、腺瘤组、对照组血浆m SEPT9阳性率分别为74.29%(26/35)、12.31%(8/65)、1.92%(2/104),组间比较差异有统计学意义(P均<0.001)。CRC组、腺瘤组、对照组血清CEA阳性率分别为34.29%(12/35)、3.18%(2/63)、1.92%(2/104),组间比较差异有统计学意义(P均<0.001)。CRC组、腺瘤组、对照组血清CA19-9阳性率分别为17.14%(6/35)、0(0/62)、0.96%(1/104),组间比较差异有统计学意义(P均<0.001)。在不同TNM分期的CRC患者中m SEPT9阳性率:Ⅰ期60.0%(3/5),Ⅱ期62.5%(5/8),Ⅲ期77.78%(7/9),Ⅳ期84.62%(11/13);CEA阳性率:Ⅰ期0(0/5),Ⅱ期25%(2/8),Ⅲ期22.2%(2/9),Ⅳ期61.54%(8/13);CA19-9阳性率:Ⅰ期0(0/5),Ⅱ期12.5%(1/8),Ⅲ期11.1%(1/9),Ⅳ期30.77%(4/13)。CRC中m SEPT9的灵敏度和特异度分别为74.29%和94.08%,高于CEA及CA19-9单独检测(分别为34.29%和17.14%)或二者联合检测(37.14%)的灵敏度,差异有统计学意义(P均<0.01)。m SEPT9在早期(Ⅰ~Ⅱ期)CRC中的阳性率达61.54%,高于CEA及CA19-9的阳性率(分别为15.38%和7.69%),差异有统计学意义(P<0.05)。在CRC中m SEPT9与CEA联合的灵敏度为80%,与CA19-9联合的灵敏度为77.14%,三者联合的灵敏度为80%,与m SEPT9单独应用相比均不能显著提高CRC辅助诊断的灵敏度(P均>0.05)。结论 m SEPT9与CEA和CA19-9相比,在CRC辅助诊断中具有更高的灵敏度,可作为独立的分子标志物,且可用于CRC早期诊断。

血浆Septin 9甲基化在结直肠癌治疗中的监测作用

为探讨血浆Septin 9甲基化在结直肠癌治疗中的监测作用,选取我院收治的64例结直肠癌患者为观察组,同期健康体检者64名为对照组。收集患者空腹静脉血,采用实时荧光探针PCR法检测Septin 9基因甲基化,比较结直肠癌患者与健康体检者及结直肠癌患者治疗前后的血浆Septin 9甲基化水平。结果显示,观察组Septin 9甲基化阳性表达47例,阴性表达17例,阳性表达率为73.4%。对照组Septin 9甲基化阳性0例,阴性64例,阳性率为0,2组比较差异有统计学意义(P <0.05)。观察组中接受手术治疗49例,化疗15例。手术治疗者中术前Septin 9甲基化阳性37例,阴性12例;术后27例阳性者转阴。化疗者中化疗前Septin 9甲基化阳性10例,阴性5例;化疗后1例阳性者转阴。术后随访1年,结直肠癌术后复发或远处转移者19例。其中Septin 9甲基化阳性14例,阳性率73.7%,血清CEA阳性7例,阳性率36.8%。2者阳性率比较差异有统计学意义(P <0.05)。结果表明,Septin 9甲基化检测能提高结直肠癌诊断准确率,可作为结直肠癌疗效评价及术后随访监测的分子标志物。

血浆Septin9基因甲基化检测在胃肠道病变中的临床应用价值评价

目的探讨血浆Septin9基因甲基化在胃肠道病变进展过程中的临床应用价值。方法纳入2017年5月至2020年11月在福建医科大学附属第一医院行血浆Septin9基因甲基化检测(PCR荧光法)的受检者(包括结直肠癌和胃癌患者、消化系统良性病变患者及无疾病证据受检者)2128例,收集相关临床资料,并进行ROC曲线分析。结果术前结直肠癌和胃癌患者、消化系统良性病变患者、无疾病证据受检者血浆Septin9基因甲基化的阳性率分别为57.67%、43.71%、17.72%和4.88%。与无疾病证据受检者组相比较,术前结直肠癌和胃癌患者Septin9基因甲基化检测的敏感性分别为57.71%和43.71%,特异性分别为95.12%和95.12%。临床分期为Ⅲ~Ⅳ期的结直肠癌(68.92%)和胃癌(48.80%)患者的血浆Septin9基因甲基化的阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期结直肠癌(50.51%)和胃癌(18.82%)患者,术前行该检测的结直肠癌(57.76%)和胃癌(43.71%)患者的阳性率亦高于术后行该检测的结直肠癌(31.45%)和胃癌(33.76%)患者,且有63.33%结直肠癌与69.23%胃癌患者在术后该指标由阳性转变为阴性。ROC曲线分析结果表明,单独血浆Septin9基因甲基化在筛查结直肠癌患者与结直肠良性病变患者或无疾病证据受检者组中ROC曲线下面积(AUC^(ROC))分别为0.681和0.764,在筛查胃癌患者与胃良性病变患者或无疾病证据受检者组中的AUC^(ROC)分别为0.649和0.694。在筛查结直肠癌与结直肠良性病变患者组中,Septin9联合癌胚抗原检测的AUC^(ROC)可提高至0.789。结论血浆Septin9基因甲基化检测在结直肠癌和胃癌中具有一定的诊断价值,但仍需结合其他的诊断方法。

ChIP-seq技术在全基因组范围内分析膜性肾病患者组蛋白H3K9三甲基化状态的改变

目的膜性肾病以基底膜(GBM)弥漫性增厚以及上皮下免疫复合物沉积为特征,其发病机制目前仍不明了。H3K9三甲基化在早些年就已经发现了,但其与其他表观遗传修饰间的微妙关系以及在人类疾病中潜在的意义仍不清楚。该实验选择组蛋白H3K9三甲基化作为靶标,探讨H3K9三甲基化与膜性肾病发病机制的关系。方法实验采用染色质免疫沉淀-高通量测序(ChIP-seq)分析膜性肾病患者外周血单个核细胞(PBMCs)的组蛋白H3K9三甲基化状态的改变。结果与健康对照组相比,膜性肾病H3K9me3有108个差异表达基因,其中75个上调,33个表达下调。挑选5个差异最大的基因,DGCR6、SNX16、CNTN4、BIRC3和BIRC2进行讨论。结论研究结果表明膜性肾病患者的H3K9三甲基化状态有很大的变化,这些变化或许可以进一步揭示膜性肾病的发病机制,并提供潜在的治疗靶点。