9-氨基吖啶诱导LacZ靶基因突变分子机制的研究

目的 使用我室新构建的含LacZ靶基因的λgt11DNA体外重包装致突变检测系统 ,研究了移码突变剂 9 氨基吖啶 (9 AA)诱发突变及分子突变谱 ,并进一步对该系统的可行性进行了评价。方法 用 9 AA直接处理λgt11DNA ,经体外重包装为完整噬菌体、铺皿 ,通过X gal和IPTG检测突变率 ,使用DNA测序了解阳性克隆DNA分子改变情况。结果 9 AA能明显影响噬菌体的存活率和诱发DNA突变 ,突变率呈明显剂量 反应关系 ;9 AA主要诱发移码突变 ,移码突变主要集中在Gs、Cs、As、Ts重复区内且突变频率随碱基重复长度增加而增加 ;9 AA同时还能诱发碱基置换 ,碱基置换主要表现为颠换 ,而碱基转换主要发生于Gs碱基。结论 该致突变检测系统不仅可以快速 ,灵敏地筛选出外来化合物的遗传毒性 ,而且可以深入分析外来化合物致突变分子机制。

9-氨基吖啶衍生物的合成及应用

介绍了 9-氨基吖啶衍生物的合成和其所特有的生物活性。列举了实例 。

基于9-氨基吖啶有机小分子凝胶的制备和表征

本论文以9-氨基吖啶和胆固醇甲酰氯为原料设计合成了新的小分子凝胶因子1,该凝胶因子可以在丙酮中形成稳定凝胶。该凝胶因子在丙酮中的自组装过程通过扫描电镜(SEM),紫外可见光谱(UV-Vis),荧光光谱、红外光谱和接触角进行了详细的表征。实验结果表明凝胶体系中有着明显的π-π堆积和氢键作用,并形成了纳米纤维结构。

新型荧光试剂N-9-吖啶基氨基乙酸及其甲酯的合成

设计合成了新型荧光试剂N 9 吖啶基氨基乙酸及N 9 吖啶基氨基乙酸甲酯 ,其结构经IR ,1HNMR表征 ,并初步讨论了它们的荧光性质及UV性质。可望应用于金属离子和有机高分子的检测及免疫分析等方面。

荧光探针N-9-吖啶-α-氨基乙酸的合成及荧光分光光度法测定环境水样中痕量铜

对荧光探针N-9-吖啶-α-氨基乙酸的合成方法作了改进，使偶氮化反应时间由7h缩短为3h，产率由78．9％提高至85．2％。此试剂与铜（Ⅱ）反应使其荧光猝灭，并据此提出了以此试剂为探针的痕量铜的荧光光度测定法。在pH7．0的缓冲介质中，在一定量的乙醇存在下，铜（Ⅱ）与荧光探针反应，通过测定样品溶液和空白溶液在激发波长（λex）262．0nm和发射波长（λem）456．0nm的荧光强度F_A和F_B，计算得反应液荧光强度猝灭程度△F，其荧光强度的猝灭程度与铜（Ⅱ）质量浓度在0．20-600．0μg·L^-1范围内呈线性关系，方法的检出限（3σ／b）为0．04μg·L^-1。按此方法分析了3个环境水样，测得其铜量值的相对标准偏差（n=6）均小于2．5％，回收率在96．0％～102．0％之间。

9-(3-氨基苯胺基)吖啶与核酸作用的荧光光谱及其分析应用

报道了荧光试剂9-(3-氨基苯胺基)吖啶(简称:m-APAA)的合成,产品经多次重结晶提纯,用IR1、HNMR和元素分析确证了结构。研究了该物质与DNA作用的荧光光谱,随着DNA的加入观察到418nm(λex=256nm)处的荧光峰猝灭,且其猝灭程度与DNA的浓度成正比,据此拟定了测定DNA的分析方法。实验了最佳条件,干扰实验,确定了反应机理。该方法简便、快速、灵敏度高。

9-(2-氨基苯胺基)吖啶的合成及其荧光光度法测定牛血清白蛋白

报道了荧光试剂9 (2 氨基苯胺基)吖啶(o APAA)的合成,产品经多次重结晶提纯,用IR、1HNMR和元素分析确证了结构,研究了它的荧光性质。拟定了一个测定牛血清白蛋白(BSA)的荧光光度法。在pH 2.4的H3PO4 KH2PO4 缓冲体系中,BSA与此试剂作用,产生荧光增敏,方法的检出限为0.015 mg·L-1,线性范围为0~5.0 mg·L-1。

9-(4-氨基苯基)吖啶及其衍生物的合成研究

研究了9-(4-氨基苯基)吖啶及其衍生物的合成方法,首先制备出吖啶盐酸盐,然后在硫磺催化的条件下与苯胺衍生物反应,得到四种吖啶衍生物,通过核磁、红外等方法分析其结构表征。

用4,9-二[N-(2-二甲氨基)乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺测定微量蛋白质

应用水溶性4,9-二[N-(2-二甲氨基)乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺(DNAF)探针,并结合十二烷基硫酸钠(SDS),研究DNAF-SDS体系用于牛血清白蛋白(BSA)的定量测定方案。线性范围为5.0×10-9～8.3×10-7 mol/L,检出限为1.0×10-10 mol/L。4,9-二[N-(2-二甲氨基)乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺作为一种新型的荧光染料探针在微量蛋白质定量测定方面具有良好应用潜力。

4,9-二[N-(2-二甲氨基)乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺与蛋白质相互作用

应用水溶性4,9-二[N-(2-二甲氨基)乙基]-9-吖啶胺-4-甲酰胺(DNAF)探针,研究了DNAF与牛血清白蛋白(BSA)的相互结合作用机理。计算出相应的热力学参数ΔH、ΔG以及ΔS;通过荧光猝灭方法研究结合作用,测定出结合位点数n和表观结合常数KA;根据荧光共振能量转移理论求得供体BSA和受体DNAF的距离r;研究了DNAF对蛋白质内源荧光猝灭的猝灭机制和主要作用力类型。

新型吖啶-二氧化硅荧光纳米颗粒的合成及表征

利用油包水的反相微乳液法,运用TritonX-100(曲拉通X-100)/正己醇/环己烷微乳液自组装体系,分别以吖啶、9-氨基吖啶、9-(2-氨基苯胺基)吖啶为核包覆SiO2,制备得到核壳型荧光氧化硅纳米颗粒。该方法克服了传统方法荧光试剂泄露的问题。透射电子显微镜检测和荧光光谱分析表明,所制得的纳米颗粒荧光强度高,荧光性质稳定,具有潜在生物亲和性,可望作为新型的荧光标记物。

多重响应性大分子荧光探针的合成与性能

由偶氮二异丁腈(AIBN)引发N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)和N-丙烯酰氧基丁二酰亚胺(NA-SI)及3-丙烯酰氧基荧光素(Ac-Flu)进行三元共聚,得到P(Flu-co-NASI-co-NIPAM)三元共聚物。进而在碱性条件下使荧光小分子9-氨基吖啶(9AA)与共聚物中的丁二酰亚胺酯基反应,制得了温度和pH值多重响应性大分子荧光探针P(Flu-co-9AA-co-NIPAM)。利用FT-IR、1 H NMR、GPC、UV-Vis等对大分子荧光探针的结构及分子量进行表征,并用荧光光谱测定其水溶液的荧光强度。结果表明,当体系温度和pH值变化时,荧光颜色均可发生可逆转变,T<33℃(LCST)或pH值=8.9时呈现黄绿色,当T≥33℃或pH值=3.1时呈蓝色,该大分子荧光探针具有多重响应性。

温度/pH敏感性荧光胶束的制备及性能研究

通过溴乙酰溴与9-氨基吖啶(9-AA)的酰胺化反应,合成了带有2个活性溴原子的新型荧光性引发剂9-AA-Br。核磁共振氢谱(1 H-NMR)测定表明其结构明确。以氯化亚铜(CuCl)/四氮杂十四员大环冠醚(Me6[14]aneN4)为催化体系,由9-AA-Br引发N-异丙基丙烯酰胺(NIPAAm)进行原子转移自由基聚合(ATRP),成功合成了结构明确、分子量可控的双臂型PNIPAAm大分子荧光探针,由紫外分光光度计测得其最低临界溶解温度(LCST)在32℃左右,且随着溶液浓度及聚合物分子量的增加而降低。温度低于LCST时,PNIPAAm大分子荧光探针在溶液中能进行自组装形成胶束,由透射电镜(TEM)观察表明,胶束的大小在500nm左右,该聚合物胶束还具有pH敏感性,在碱性条件下随着pH的增大,荧光发射峰变强。