光谱法研究9-甲氧基喜树碱与BSA的相互作用

本文用吸收、荧光、圆二色等光谱法研究了9-甲氧基喜树碱(9-MCPT)与BSA的相互作用。随着9-MCPT的导入,BSA的吸收光谱发生位移,BSA的荧光发生猝灭并使荧光发射峰蓝移,说明9-MCPT与BSA发生了相互作用,且其产物是复合物。298K下体系的猝灭常数、结合常数和结合位点数分别为9.550×10^4 L·mol^-1、2.589×10^4 L·mol^-1和0.8949;并且猝灭常数随温度升高而减小,表明9-MCPT以静态方式猝灭BSA的荧光、结合比为1∶1。该体系的ΔH和ΔS均为负值,分别为-5.791 KJ·mol^-1、-2.636 J·mol^-1·K^-1,说明BSA与9-MCPT的结合主要是氢键和范德华力所使,ΔG<0表明9-MCPT自发与BSA发生作用。同步荧光光谱数据显示,9-MCPT接近BSA中酪氨酸残基。位点竞争实验显示9-MCPT-BSA的结合位点处于在BSAⅡA亚域内的SiteⅠ位点上。CD光谱中BSA的α-螺旋结构比例减少、β-折叠比例增加,表明9-MCPT改变了BSA的二级结构。

马比木根中喜树碱和9-甲氧基喜树碱的HPLC分析

目的：建立测定马比木根中喜树碱和9-甲氧基喜树碱的高效液相色谱法。方法：采用5种方法对马比木根中的喜树碱和9-甲氧基喜树碱进行提取;运用高效液相色谱法，采用Waters Symmetry C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇-水（50：50）为流动相，流速0.8 mL·min^-1，检测波长254 nm，柱温26℃。结果：喜树碱和9-甲氧基喜树碱进样量分别在0.24～4.00 μg（r=0.9997）和0.24～4.00 μg（r=0.9995）范围内线性关系良好;乙醇溶液室温浸泡提取得到的喜树碱含量（0.944%）和9-甲氧基喜树碱含量（0.237%）明显高于其他方法。马比木是目前发现的喜树碱类含量最高的植物。结论：本文建立的HPLC检测法简便、准确、灵敏度高，乙醇溶液室温浸泡提取法安全，成本低，提取率高，适用于喜树碱类提取和马比木的质量检测。