长链非编码RNAMIR22HG和微RNA-9-3p在骨关节炎病人血清中的表达及与病情严重程度的相关性

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)MIR22HG和微RNA-9-3p(miR-9-3p)在骨关节炎(OA)病人血清中的表达及与病情严重程度的相关性。方法 选取2020年10月至2021年10月在南充市中医医院确诊为OA的病人120例,作为OA组,60例体检健康人群作为对照组;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清lncRNA MIR22HG和miR-9-3p的表达水平;Pearson法分析lncRNA MIR22HG和miR-9-3p的相关性以及二者与视觉模拟(VAS)评分、美国特种外科医院膝关节评分(HSS)以及西安大略和麦马斯特大学骨关节炎指数可视化量表(WOMAC)评分的相关性;绘制受试者操作特征(ROC)曲线分析lncRNA MIR22HG和miR-9-3p对OA的诊断价值。结果 OA组的血清中lncRNA MIR22HG表达水平显著高于对照组(1.48±0.25比1.01±0.22),miR-9-3p的表达水平显著低于对照组(0.72±0.13比1.05±0.12)(P<0.05);相关性分析显示,lncRNA MIR22HG和miR-9-3p的表达水平呈负相关关系(P<0.05);KLⅣ级血清lncRNA MIR22HG的表达水平、VAS评分、WOMAC评分显著高于KLⅢ级和KLⅡ级,KLⅢ级显著高于KLⅡ级(P<0.05),KLⅣ级血清miR-9-3p的表达水平、HSS评分显著低于KLⅢ级和KLⅡ级,KLⅢ级显著低于KLⅡ级(P<0.05);OA病人lncRNA MIR22HG的表达水平与VAS评分、WOMAC评分均呈正相关,与HSS评分呈负相关(P<0.05);miR-9-3p表达水平与VAS评分、WOMAC评分均呈负相关,与HSS评分呈正相关(P<0.05);二者联合诊断的AUC高于lncRNA MIR22HG、miR-9-3p单独诊断的AUC值(Z=2.22,P=0.012;Z=1.43,P=0.025)。结论OA病人血清中lncRNA MIR22HG表达水平显著升高,miR-9-3p表达水平显著降低,二者与OA病情严重程度密切相关,且对OA具有一定的诊断价值。

优良早熟玉米单倍体诱导系LY9-3的选育及栽培技术要点

为了选育适宜寒地生态条件的优良单倍体诱导系,利用从乌克兰引进的玉米诱导系EMK-1和农大高诱5号杂交后代的分离群体为基础材料,经过连续6代的自交和诱导率测定,育成了优良单倍体诱导系LY9-3,其对测验种德美亚3号的单倍体平均诱导率为13.36%。LY9-3具有熟期早、平均诱导率高、抗玉米主要病害、抗倒伏、籽粒遗传标记明显等优良特点,是寒地开展早熟玉米单倍体育种的理想诱导系。

随机质心映射优化法提升生防乳酸菌Lac 9-3的粘附性及其对冷藏凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)菌群结构的影响

生防乳酸菌粘附是其在食品表面定植并发挥作用的第一步。为进一步提升乳酸菌Lac 9-3在凡纳滨对虾表面的粘附性,探究其对冷藏凡纳滨对虾腐败菌生长的影响,本研究采用随机质心映射优化法(Random-Centroid Optimization,RCO)优化了乳酸菌Lac 9-3的接种条件(包括接种液浓度、接种菌株生长阶段、浸泡时间与接种液pH)。同时,运用高通量测序技术,分析经乳酸菌Lac 9-3处理后的凡纳滨对虾在冷藏第0、8和14 d菌群多样性与组成的差异,探究乳酸菌Lac 9-3对冷藏凡纳滨对虾菌群结构的影响。结果表明,乳酸菌Lac 9-3的最佳接种条件为:接种液浓度为10^(8)CFU/mL、菌株生长阶段为14.1 h(对应稳定期初期),浸泡时间为17.41 min,接种液pH为6.51。在最佳接种条件下,乳酸菌Lac 9-3在凡纳滨对虾表面的粘附数量达到2.08×10^(9)CFU/g,较同浓度对照组增加72.65%。此外,菌相结果显示,乳酸菌Lac 9-3可通过抑制凡纳滨对虾表面优势腐败菌希瓦氏菌属(Shewanella)、肉食杆菌属(Carnobacterium)、别弧菌属(Aliivibrio)与弧菌属(Vibrio)的生长繁殖,调节冷藏期间凡纳滨对虾的菌群结构。乳酸菌Lac 9-3粘附性的提升增加了其在凡纳滨对虾表面的粘附数量,从而调控冷藏过程中凡纳滨对虾的菌群结构并影响其腐败进程,揭示了乳酸菌Lac 9-3在水产品保鲜中的应用潜力。

miR-9-3p对细胞脂代谢调节功能及可能机制

目的 检测microRNA-9-3p (miR-9-3p)对HepG2细胞增殖及脂质代谢的影响,探讨其对细胞沉默信息调节因子(Sirt-1)蛋白表达的影响。方法 以HepG2细胞为体外细胞模型,应用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)比色法、转染技术和Western印迹,以miR-9-3p mimic、miR-9-3p inhibitor转染为干预手段,应用MTT比色法、Western印迹检测正常对照组、miR-9-3p mimic组、anti-miR-9-3p组3组HepG2细胞增殖水平、总胆固醇(TC)及三酰甘油(TG)表达水平及Sirt-1蛋白的表达。结果 miR-9-3p mimic组miR-9-3p表达水平显著高于正常对照组(P<0.05);anti-miR-9-3p组miR-9-3p表达水平显著低于正常对照组(P<0.05);与正常对照组相比,miR-9-3p mimic组HepG2细胞增殖显著增加(P<0.05);anti-miR-9-3p组HepG2细胞增殖显著抑制(P<0.05);miR-9-3p mimic组HepG2细胞TC及TG表达水平显著增加(P<0.05);anti-miR-9-3p组HepG2细胞TC及TG表达水平显著降低(P<0.05);miR-9-3p mimic组HepG2细胞Sirt-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05);anti-miR-9-3p组HepG2细胞Sirt-1蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。结论 miR-9-3p转染能够促进HepG2细胞增殖;miR-9-3p转染显著增加HepG2细胞TG及TC表达;miR-9-3p转染能够显著降低HepG2细胞Sirt-1蛋白表达。miR-9-3p能够影响HepG2细胞增殖及TC及TG代谢,其可能是通过调节Sirt-1蛋白表达发挥作用。

渤海锦州9-3油田消泡剂的研究

以二甲基硅油为原料,白炭黑为添加剂制备的硅膏为消泡剂主剂,配合聚醚改性硅油、乳化剂、增稠剂和蒸馏水而成的乳液型消泡剂,在锦州9-3油田的现场评价中表现突出,优于平台现用的溶剂型消泡剂产品,其中硅膏10%、聚醚改性硅油15%、乳化剂1%、增稠剂0.5%、蒸馏水73.5%制成的乳液型消泡剂产品效果最佳,具有良好的推广和应用前景。

锦州9-3油田二元复合驱产出表面活性剂的检测方法研究

锦州9-3油田二元复合驱产出表面活性剂缺乏快速、准确的定量检测方法。显色剂硫酸氰钴铵与非/阴离子型表面活性剂HDS生成蓝色络合物,其颜色深浅与HDS的浓度成线性关系,因而可通过分光光度法确定HDS的浓度。通过室内实验对检测方法进行优化,得到最佳测试条件:测定波长322 nm,1 L显色剂溶液中含620 g硫氰酸铵与280 g六水合硝酸钴,萃取剂苯的加量15 mL,显色剂反应时间25 min,萃取静置时间60 min,离心条件为2000 r/min下离心20 min。标准曲线拟合方程为y=0.0011x,相关系数0.9973,对实际样品测试的相对偏差绝对值小于5﹪。该方法具有简单、快速、准确的特点,有望应用于海上油田表面活性剂浓度的快速测定。

微小RNA-9-3p对甲状腺乳头状癌细胞侵袭迁移和Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨微小RNA-9-3p(miR-9-3p)对Wnt/β-连环蛋白(β-cat)信号通路的调控作用及甲状腺乳头状癌(PTC)细胞TPC-1侵袭和迁移的影响。方法体外培养TPC-1细胞,转染miR-9-3p inhibitor(抑制组)和空质粒(空转染组),同时设置空白对照组。采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测3组miR-9-3p的表达情况;采用MTT法、划痕实验和Transwell侵袭实验检测3组细胞的增殖、迁移和侵袭情况;采用Western blotting检测3组TPC-1细胞中β-cat、血管内皮钙黏素(VE-cad)、Twist1和上皮钙黏素(E-cad)的蛋白表达情况。结果抑制组TPC-1细胞miR-9-3p的表达水平为0. 21±0. 10,低于空白对照组的1. 02±0. 16和空转染组的0. 98±0. 15(P<0. 05)。MTT结果显示,抑制组TPC-1细胞培养24、48、72、96 h后的增殖率分别为(95. 68±4. 34)%、(87. 46±4. 59)%、(78. 11±4. 63)%和(71. 24±3. 91)%,低于空转染组,差异有统计学意义(P<0. 05)。Transwell侵袭实验结果显示,抑制组TPC-1细胞侵袭数为(157±62)个,少于空白对照组和空转染组(P<0. 05)。划痕实验结果显示,抑制组TPC-1细胞愈合率为(34. 02±7. 11)%,低于空白对照组和空转染组(P<0. 05)。抑制组TPC-1细胞β-cat核转移情况弱于空白对照组和空转染组。抑制组TPC-1细胞β-cat、VE-cad和Twist1蛋白表达水平分别为1. 15±0. 29、0. 23±0. 08和0. 65±0. 20,低于空白对照组和空转染组(P<0. 05),而E-cad蛋白表达水平为0. 85±0. 17,高于空白对照组和空转染组(P <0. 05)。结论下调miR-9-3p可抑制Wnt/β-cat信号通路的激活,逆转TPC-1细胞的上皮间质转化,从而降低PTC的侵袭和迁移活性。

锦州9-3油田储层粘土稳定剂的研究与应用

从锦州 93油田储层特点出发 ,合成了既能抑制粘土膨胀又能控制微粒运移的粘土稳定剂HES。通过对HES与其他粘土稳定剂的效果比较、HES最佳使用浓度及对岩心渗透率的影响进行的室内评价 ,推荐HES的最佳使用浓度为 3 5 %～ 5 0 %。使用HES对W42注水井进行了 2次防膨处理 ,间隔周期约 4个月 ,处理后注水情况较正常 。

锦州9-3油田WHPB平台抗冰锥体的提升改造

为了分析锦州9-3油田WHPB平台冬季冰激振动明显的原因,在平台甲板布设了现场检测体系,对采集的冰荷载作用下的数据进行了分析,认为缓解振动的主要方法是增加冰锥对管线的有效保护,提出了在原冰锥下部增加一部分冰锥的改造方案,并进行了结构强度校核,结果表明新方案可以有效增加冰锥保护范围,使海水不直接作用于直立的管线结构,可以降低产生冰激振动的概率,能够满足规范要求。

长链非编码RNA MIR22HG通过微小RNA-9-3p调节CTLA4抑制前列腺癌

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIR22HG通过微小RNA-9-3p(miR-9-3p)调节细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)抑制前列腺癌的机制。方法收集26例前列腺癌组织样本和26例前列腺增生组织样本,培养VCAP、PC3、LNCap和DU145细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测前列腺癌组织、前列腺增生组织及4种前列腺癌细胞的MIR22HG和miR-9-3p mRNA水平。筛选MIR22HG和miR-9-3p mRNA表达较高的细胞。将筛选出的细胞按不同干预方法分为OE-CTLA4(CTLA4过表达组)、OE-MIR22HG(MIR22HG过表达组)、miR-9-3p mimic(miR-9-3p过表达组)、OE-MIR22HG+miR-9-3p mimic(MIR22HG及miR-9-3p联合过表达组)、OE-NC+NC mimic(转染对照组)、NC mimic(miR-9-3p过表达对照组)。采用TargetScan数据库及荧光素酶报告基因实验验证MIR22HG与miR-9-3p及miR-9-3p与CTLA4是否存在靶向抑制关系。采用qRT-PCR及Western blot检测各组细胞MIR22HG和miR-9-3p mRNA及CTLA4蛋白表达。取裸鼠96只,按干预方法不同分为OE-NC+NC mimic组(转染对照)、OE-MIR22HG组(MIR22HG过表达)及OE-MIR22HG+miR-9-3p mimic组(MIR22HG及miR-9-3p联合过表达),每组32只。接种后4周期间,每周检测小鼠原位移植瘤并统计瘤体的质量和体积变化。结果前列腺癌细胞VCAP、PC3、LNCap和DU145细胞中,PC3细胞MIR22HG mRNA相对较低,miR-9-3p mRNA相对较高,因此选择PC3细胞进行研究。在PC3细胞中成功过表达MIR22HG,荧光素酶报告基因实验验证了MIR22HG和miR-9-3p的靶向抑制关系,过表达MIR22HG,miR-9-3p表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。TargetScan数据库预测免疫基因CTLA4和miR-9-3p的靶向关系,荧光素酶报告基因实验验证miR-9-3p和CTLA4的靶向抑制关系,过表达miR-9-3p,CTLA4表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达MIR22HG的裸鼠皮下肿瘤的质量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。OE-MIR22HG+miR-9-3p mimic组裸鼠皮下肿瘤的质量、体积与OE-NC+NC mimic组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MIR22HG与miR-9-3p存在靶向负调节关系,miR-9-3p与CTLA-4存在靶向调节关系,MIR22HG/miR-9-3p可能通过抑制CTLA4达到免疫治疗前列腺癌的目的。

锦州9-3东油田浅水平台电潜泵结构改进与应用研究

针对电潜泵应用于锦州9-3东油田浅水平台所面临的问题,对传统葫芦型下置式电潜泵进行了结构改进设计,提出了圆柱型上置式电潜泵的结构设计方案,并成功地应用于该油田工程项目,取得了良好的运行效果,为浅水区域海洋设施的海水供给提供了一种新的设计思路。

脑胶质瘤病人血浆miR-9-3p的变化及其与病人临床预后的关系

目的探讨脑胶质瘤病人血浆miR-9-3p的变化及临床意义。方法选取2016年3月1日至2019年3月1日收治的脑胶质瘤42例,另选20例同期健康查体者为对照,用RT-PCR法检测血浆miR-9-3p水平。42例脑胶质瘤术后随访24~60个月,记录生存情况;以血浆miR-9-3p平均值为准,分为低表达和高表达。结果脑胶质瘤病人血浆miR-9-3p水平明显降低(P<0.05),多因素Cox分析显示,血浆miR-9-3P低表达是脑胶质瘤病人不良生存预后的独立危险因素(P<0.05)。生存曲线分析显示,miR-9-3p低表达脑胶质瘤病人中位总生存期较高表达病人明显缩短(P<0.05)。结论人脑胶质瘤血浆miR-9-3p表达下调,与病人不良生存预后密切相关。

环境温度对Ni47Ti44Nb9及Ni47Ti44Nb9-3A21偶对腐蚀行为的影响

通过电化学工作站和零电阻电流计测量了10、20、40、60℃下Ni47Ti44Nb9的极化曲线、交流阻抗谱图及Ni47Ti44Nb9-3A21偶对的电偶电流。通过金相显微镜与扫描电镜(SEM)的方法观察表面腐蚀形貌;采用EDS的方法分析了Ni47Ti44Nb9的腐蚀产物。结果表明:随着温度的升高,Ni47Ti44Nb9的自腐蚀电位负移,60℃时为-0.734 V,此时腐蚀电流密度为4.79μA·cm^(-2),Ni47Ti44Nb9记忆合金整体耐蚀性能良好,表面生成氧化膜为TiO_(2)。3A21铝锰合金与Ni47Ti44Nb9记忆合金电位差值最大为1.03 V,偶对中Ni47Ti44Nb9作为阴极受到保护,3A21为阳极腐蚀加剧,不同温度下最高电偶电流密度为12.6μA·cm^(-2),电偶腐蚀敏感等级为C级良好。

自选酿酒酵母(KDLYS9-3)产β-D-葡萄糖苷酶动力学研究

自选高产β-D-葡萄糖苷酶的酿酒酵母(KDLYS9-3)在葡萄酒酿造过程中具有增强香气的效果。依据菌体生长和产酶试验,利用Logistic方程、Dose Resp方程和Nelder方程建立了菌体生长和产酶,以及菌体生长速率与酶生成速率之间关系的动力学模型,通过Origin8.0软件进行非线性拟合,并利用Lineweaver-Burk法作图测定了该菌所产β-D-葡萄糖苷酶的动力学参数K_m值和V_(max)值。结果显示:自选酿酒酵母KDLYS9-3的菌体生长与产酶的相关性为部分偶联型,动力学模型与试验值吻合度好,方程能够反映菌体生长与产酶的变化规律。菌体生长8 h后开始产酶,菌体进入对数生长期时酶大量生成,到39 h菌体生长进入稳定期,随着菌体生长进入衰亡期后酶也随之停止产生;利用Lineweaver-Burk法求得酶动力学参数K_m=8.492 579 mmol/L,V_(max)=1.030 715(μmol/L)/min。研究结果为该菌株的理论研究和实际应用奠定了基础。

锦州9-3油田海底管道BULKHEAD 20MnMo锻造钢与管道钢的焊接技术

BULKHEAD(锚固件)是锦州9-3油田海底管道上的重要构件,其焊接质量的优劣直接关系到原油的生产及输送。通过对国产20MnMo锻造钢与API 5L X56 管道钢的焊接性能及焊接工艺的论述,为今后类似工作提供参考。

锦州9-3油田聚合物驱受益油井堵塞物组成及成因分析

结合X-射线衍射法、扫描电镜+能谱法及红外光谱法等分析方法,以JZ9-3油田注聚合物驱受益井产出堵塞物为研究对象,开展了堵塞物成分分析及形成原因的研究。结果表明,研究区受益井产出堵塞物包括以铁盐、钙盐、氟硅酸盐、氟铝酸盐等无机成分为主的硬团颗粒堵塞物,和"有机+无机"的软硬结合颗粒物堵塞,有机组分为部分水解稀酰胺形成的胶团,无机组分为石英、碳酸钙等。推测堵塞物形成原因为:聚驱过程中聚合物分子吸附凝絮黏土矿物、固悬物等微粒,形成具一定变形能力的团状集合体;聚合物与高价金属阳离子发生交联形成有机胶团堵塞物;酸化二次沉淀等无机垢与原油重质组分、聚合物交织在一起,加剧储层堵塞程度。研究结果可为预防聚驱油田生产井产生堵塞,为油井解堵设计提供理论基础。

锦州9-3油田二元复合体系研究

聚合物+表面活性剂二元复合驱是在三元复合驱基础上,删除碱成分形成的复合驱,可有效避免高浓度碱对地层造成的危害,具有一定实用优势。海上油田绥中36-1减压馏分油芳烃含量高,与其合成的石油磺酸盐与原油配伍性好,界面活性强,适合于无碱复合驱油体系。针对锦州9-3油田条件,通过室内实验优选出适合该地区开发的二元复合体系配方,并对该体系的热稳定性、抗剪切性能、耐盐性能、乳化性能、过滤性、吸附性、注入性能和驱油性能等方面进行评价。研究认为,该配方各方面性能均符合施工要求,适用于海上油田的开发应用。

渤海锦州9-3油田注水水质指标优化研究

锦州9-3油田8口注水井转注聚后,回注污水中残存一定浓度的聚合物,原有注水标准已不能满足现场需要。结合锦州9-3油田实际情况,进行了大量实验,最终制定了新的锦州9-3油田注水水质标准:残余聚合物浓度小于100 mg/L时,悬浮物浓度小于10 mg/L,含油量小于40 mg/L;残余聚合物浓度大于100 mg/L时,悬浮物浓度小于5 mg/L,含油量小于30 g/L;悬浮物粒径中值小于3μm。

一种适用于极浅水域大型组块浮托安装的新型导管架型式——以锦州9-3油田为例

针对我国渤海地区某些油田区域水深极浅、大型浮吊无法进入、疏浚又受到环保限制、具有超大型组块的导管架平台很难按照吊装方案进行设计的问题,以锦州9-3油田为例设计了一种适用于极浅水域大型组块浮托安装的新型导管架型式,即大型组块在2个小导管架间进行浮托作业。实践证明,这种新型导管架型式不仅满足了浮托安装所需的大跨度通道,而且满足了大型综合平台的支撑强度要求,从而为浅水区油田提供了一种新的开发方式。