HPLC法测定鲑降钙素鼻用喷雾剂中有关物质

目的建立测定鲑降钙素鼻用喷雾剂中有关物质的HPLC方法。方法使用Macherey-Nagel Nucleosil 100-5 C18AB色谱柱(250 mm×4.0 mm,5μm);以0.04 mol/L四甲基氢氧化铵溶液(用磷酸调pH 2.5)–乙腈(9∶1)为流动相A,以0.04 mol/L四甲基氢氧化铵溶液(用磷酸调pH 2.5)–乙腈(4∶6)为流动相B,梯度洗脱;检测波长为220 nm;体积流量为1.0 m L/min;进样量为100μL;柱温为65℃;样品室温度:10℃。按加校正因子的主成分自身对照法计算降钙素C、N-乙酰半胱氨酰鲑降钙素(杂质A)、9-D-亮氨酸鲑降钙素(杂质B)、去-22-酪氨酸鲑降钙素(杂质C)。结果降钙素C和鲑降钙素杂质A、B、C在0.20~7.50μg/mL线性关系良好,平均回收率分别为98.1%、98.9%、100.5%、99.7%,RSD值分别为1.6%、1.5%、1.0%、1.1%。杂质A、B、C的校正因子均超出0.90~1.10。结论方法简便、快速,可作为鲑降钙素鼻用喷雾剂中有关物质的检测方法。