SOX9调控肝星状细胞活化与增殖促进肝纤维化进展

目的探究SOX9基因对肝星状细胞活化与增殖的影响。方法通过每周三次腹腔注射15%的四氯化碳或玉米油构建肝纤维化及对照小鼠模型。HE染色、Masson染色观察小鼠肝纤维化造模情况,qPCR检测小鼠肝脏SOX9、α-SMA、Col1基因表达。用TGFβ1细胞因子诱导LX2细胞活化,qPCR检测LX2细胞活化状态及敲减SOX9基因后SOX9、α-SMA、Col1、CyclinD1、PCNA基因mRNA表达。结果HE、Masson染色表明肝纤维化模型成功构建。qPCR结果表示肝纤维化标志基因α-SMA(造模组:2.568±0.726,对照组:1.000±0.272,t=4.518,P=0.002)与Col1表达明显上升(造模组:3.125±0.775,对照组:1.000±0.398,t=5.454,P=0.001)。SOX9基因在纤维化的小鼠肝脏中也显著上升(造模组:1.986±0.634,对照组:1.000±0.288,t=3.126,P=0.014)。在活化的LX2细胞中SOX9基因表达显著上调(活化组:1.718±0.395,对照组:1.000±0.155,t=3.783,P=0.005),敲减SOX9基因后胶原合成基因α-SMA(敲减组:0.621±0.142,对照组:1.000±0.188,t=3.590,P=0.007)与Col1(敲减组:0.558±0.170,对照组:1.000±0.130,t=4.608,P=0.002)以及增殖相关基因CyclinD1(敲减组:0.614±0.106,对照组:1.000±0.166,t=4.392,P=0.002)和PCNA(敲减组:0.525±0.138,对照组:1.000±0.234,t=3.897,P=0.005)表达明显下降,肝星状细胞活化与增殖被明显抑制。结论SOX9基因在肝纤维化小鼠肝脏中表达明显上升,敲减SOX9基因可以明显减轻肝星状细胞的活化,可能成为治疗肝纤维化的靶点。

应用C-to-G碱基编辑器对PCSK9基因靶向敲除的研究

目的:使用C-to-G碱基编辑器(CGBE)Td-CGBE-NG靶向敲除huh-7肝癌细胞系前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因,以CBE(AncBE4max)为参照,评价Td-CGBE-NG对该基因的敲除效果。方法:使用引入终止密码子的策略敲除huh-7肝癌细胞系PCSK9基因。构建碱基编辑器Td-CGBE-NG和AncBE4max,构建重组质粒sg386和sg555,将Td-CGBE-NG和sg386,AncBE4max和sg555分别共转染huh-7细胞,实现c.1447C>G和c.1953C>T的转换,在两位点引入终止密码子S386X(TGA)和Q555X(TAG),使用sanger测序和T载体克隆验证编辑效率;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PCSK9基因mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:sanger测序和T载体克隆结果显示,Td-CGBE-NG和AncBE4max的编辑效率分别为c.1447C>G 33%和c.1953C>T 25%;RT-qPCR结果显示,Td-CGBE-NG使PCSK9 mRNA的表达量降低(t=17.29,P<0.0001);Western blot结果表明,两组huh-7细胞蛋白表达量均明显下降(AncBE4max:t=5.57,P<0.01;Td-CGBE-NG:t=4.912,P<0.01)。结论:Td-CGBE-NG可以有效敲除huh-7肝癌细胞系的PCSK9基因,抑制该基因mRNA和蛋白的表达,为后续Td-CGBE-NG的应用奠定基础。

脑胶质瘤患者围术期血清HMGB1、MMP-9水平变化及其与术后颅内感染的关系探究

目的:探究脑胶质瘤患者围术期血清高迁移率族B1蛋白(HMGB1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平变化及其与术后颅内感染的关系。方法:选取我院2020年7月至2022年1月择期行肿瘤切除术的脑胶质瘤患者115例,根据胶质瘤分级系统分为低级别组56例(Ⅰ-Ⅱ级)与高级别组59例(Ⅲ-Ⅳ级),比较两组患者围术期血清HMGB1及MMP-9水平;根据术后颅内感染情况分为感染组21例与未感染组94例,采用多因素Logistic回归分析脑胶质瘤患者术后发生颅内感染的危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清HMGB1及MMP-9水平对脑胶质瘤患者术后颅内感染的诊断价值。结果:与术前比,两组患者术后1 d、7 d血清HMGB1及MMP-9水平均升高(P<0.05),高级别组患者围术期血清HMGB1及MMP-9水平均高于低级别组(P<0.05);感染组患者年龄>65岁、合并糖尿病、病理分期Ⅲ-Ⅳ期、手术时间>6h占比均高于未感染组患者(P<0.05);经多因素Logistic回归分析显示:年龄>65岁、病理分期Ⅲ-Ⅳ期是脑胶质瘤患者术后并发颅内感染的危险因素(P<0.05);感染组患者术后1d、7d血清HMGB1及MMP-9水平均高于未感染组(P<0.05);血清HMGB1与MMP-9水平联合评估患者术后颅内感染的曲线下面积(AUC)为0.875,敏感度为90.48%、特异性为73.40%。结论:高级别脑胶质瘤患者血清HMGB1及MMP-9水平明显高于低级别患者,且术后患者血清HMGB1及MMP-9的高表达与颅内感染密切相关,临床可通过检测血清HMGB1及MMP-9水平评估患者术后颅内感染情况。

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

AQP4、MMP-9及HMGB1预测癫痫患儿认知功能损害的价值分析

目的探讨血清水通道蛋白4(AQP4)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与癫痫患儿认知功能损害的关系及其预测价值。方法选取2018年1月至2021年10月河北省邯郸市中心医院收治的150例癫痫患儿为研究对象。根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分将150例癫痫患儿分为认知障碍组(n=69)和认知正常组(n=81),并选取同期80例体检正常儿童纳入健康对照组,观察各组血清AQP4、MMP-9及HMGB1水平;进行Pearson相关分析各指标与认知功能损害的关系,并采用Logistic回归分析癫痫患儿认知功能损害危险因素;通过绘制受试者工作特征曲线(ROC)、计算曲线下面积(AUC)分析AQP4、MMP-9及HMGB1单独或联合对癫痫患儿认知功能损害的预测价值。结果三组癫痫患儿血清AQP4、MMP-9、HMGB1水平及MoCA评分差异均有统计学意义,进一步两两比较发现,认知损害组、认知正常组、健康对照组的AQP4水平依次升高,MMP-9及HMGB1水平依次降低(F值分别为1384.902、43.666、63.059,P<0.05);认知损害组MoCA评分低于认知正常组和健康对照组(F=1365.424,P<0.05),但认知正常组和健康对照组MoCA评分无显著差异;Pearson相关性分析显示,血清AQP4水平与癫痫患儿MoCA评分呈正相关(r=0.824,P<0.05),血清MMP-9及HMGB1水平与MoCA评分呈负相关(r值分别为-0.426、-0.463,P<0.05);Logistic回归分析结果显示,血清AQP4水平增加是癫痫患儿认知功能损害的保护因素(OR=0.557,P<0.05),MMP-9、HMGB1水平较高及病程较长是癫痫患儿认知功能损害的危险因素(OR值分别为1.658、2.124、1.215,P<0.05);ROC曲线分析显示三指标单独及联合应用时AUC(95%CI)分别为0.797(0.652~0.941)、0.720(0.519~0.920)、0.722(0.477~0.966)、0.862(0.742~0.972),其中联合应用诊断效能最高。结论AQP4、MMP-9及HMGB1在伴有认知功能损害的癫痫患儿血清中存在异常表达,是癫痫患儿认知功能损害的独立影响因素,三者联合检测对癫痫患儿继发认知功能损害的预测具有一定的临床意义。

胃癌组织高迁移率族蛋白A2与基质金属蛋白酶-9表达与肿瘤侵袭转移的关系及预后意义

目的探讨胃癌组织中高迁移率族蛋白A2(HMGA2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达与肿瘤侵袭和转移能力的关系及预后意义。方法采用免疫组化法(SP法)检测93例胃癌组织、30例正常胃黏膜组织中HMGA2、MMP-9的表达;收集患者临床病历资料,并进行随访。结果 HGMA2蛋白在胃癌组织中阳性表达率分别为明显高于正常胃黏膜(P<0.01);MMP-9蛋白在胃癌组织中阳性表达率明显高于正常胃黏膜(P<0.01)。HMGA2与MMP-9在胃癌组织中的蛋白阳性表达均与胃癌组织的肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05);与患者的性别、年龄、肿瘤直径无关(P>0.05)。相关性分析发现,HMGA2与MMP-9在胃癌组织中的表达情况呈正相关(r=0.317,P<0.01)。经Kaplan-Meier生存分析显示,HMGA2、MMP-9蛋白表达阳性患者的生存率均低于表达阴性患者(P<0.01)。结论 HMGA2、MMP-9与胃癌浸润和转移有关,两者表达具有相互协同作用,对胃癌的侵袭和转移起重要的促进作用。HMGA2、MMP-9是影响预后的危险因素,可能成为胃癌治疗的新靶点。

鄂尔多斯盆地延长组长9砂体的垂向结构及主控因素分析

近年来随着对鄂尔多斯盆地油气地质条件的重新认识,在上三叠统延长组下部的长9油层组中获得了新发现、新突破,该油层组成为油气勘探重要的战略接替层系。通过露头剖面、钻井、岩芯、测井及分析化验等资料的综合研究,结合沉积古地理背景分析,以沉积特征和指相标志的识别为依据,认为盆地内长9砂体的成因类型主要包括三角洲环境与牵引流作用有关的陆上与水下的分流河道、天然堤、决口扇、三角洲前缘的河口坝、远砂坝、席状砂等砂体,滨浅湖环境与湖浪和湖流改造作用有关的砂质滩坝、席状砂等砂体。根据岩芯剖面精细描述及沉积微相分析,结合测井曲线解释,指出长9单砂体主要发育B、C、I、F、D五种基本垂向结构类型,多层砂体的垂向叠加样式复杂多变,常见的有BB、CC、CB、II、CI、BC、BI、FF等类型。砂体垂向结构的主控因素分析表明,沉积环境、沉积相以及基准面升降旋回是控制单砂体垂向结构、多层砂体垂向叠加样式及分布的主要地质因素。

肾癌组织中HMGB1、MMP9的表达与临床分期、预后的相关性研究

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)在肾癌组织中的表达,及与肾癌临床病理特征、预后的相关性。方法采用免疫组织化学、实时定量聚合酶链反应法,检测67例肾透明细胞癌患者癌组织、癌旁组织中HMGB1、MMP9的表达,采用Person法分析其与临床病理学特征的相关性,采用Kaplan-Meier方法进行生存曲线分析,采用Cox比例风险模型分析影响患者预后相关因素。结果肾癌组织中HMGB1、MMP9表达高于癌旁肾组织,差异有统计学意义;肾癌肿瘤TNM分期、淋巴结转移度、肿瘤直径与HMGB1、MMP9表达相关,而不同性别、年龄间HMGB1、MMP9的表达差异无统计学意义;HMGB1、MMP9低表达肾癌患者的生存期要高于中、高表达患者,HMGB1、MMP9的表达水平与预后呈负相关;HMGB1、MMP9、肿瘤TNM分期、淋巴结转移度是影响肾癌患者预后的独立危险因素。结论 HMGB1、MMP9可能在肾癌的浸润、转移机制中起着非常重要的作用,联合检测肾癌组织中HMGB1和MMP9的表达水平可能有助于评估肾癌的生物学特征和患者预后。

胎膜早破绒毛膜羊膜炎患者胎膜组织中HMGB1和MMP-9的表达及意义

目的:研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胎膜早破(PROM组)合并绒毛膜羊膜炎(CAM)患者胎膜组织中的表达及意义。方法:选取足月PROM剖宫产患者30例为研究组,足月择期剖宫产妊娠妇女30例为对照组。取胎膜组织行病理检查,按病理结果再分为合并和非合并CAM组。采取免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测PROM组和对照组孕妇胎膜组织中HMGB1、MMP-9蛋白及mRNA表达。结果:PROM组的CAM发生率为56.67%(17/30),高于对照组[13.33%(4/30)],差异有统计学意义(P<0.05)。PROM组和对照组中,合并CAM者胎膜组织中HMGB1、MMP-9蛋白和mRNA相对表达量均高于未合并CAM者,差异有统计学意义(P<0.05)。PROM组胎膜组织中HMGB1和MMP-9 mRNA表达呈正相关(r=0.439,P<0.05)。结论:HMGB1和MMP-9表达可能与PROM发生、发展相关。

血清高迁移率族蛋白A2、糖链抗原19-9联合ROMA指数对卵巢癌的诊断价值

目的探讨高迁移率族蛋白A2(HMGA2)、糖链抗原19-9(CA19-9)联合ROMA指数对卵巢癌的诊断价值。方法选择2016年3月至2018年3月于河南科技大学第一附属医院行卵巢切除术患者98例为研究对象,其中卵巢癌患者46例(卵巢癌组),良性卵巢疾病患者52例(良性卵巢疾病组);另选择同期体检健康女性50例为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验检测受试者血清CA19-9和HMGA2水平,采用全自动电化学发光仪检测血清人附睾蛋白4和糖链抗原125水平,并计算ROMA指数,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CA19-9、HMGA2及ROMA指数对卵巢癌的诊断价值。结果卵巢癌组患者血清HMGA2、CA19-9水平和ROMA指数均高于良性卵巢疾病组和健康对照组(P<0.05);良性卵巢疾病组血清HMGA2、CA19-9水平和ROMA指数高于健康对照组(P<0.05)。血清CA19-9、HMGA2水平及ROMA指数与卵巢癌国际妇产科协会分期、淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄、腹水量及卵巢癌组织学类型无关(P>0.05)。ROC曲线分析显示,血清CA19-9、HMGA2及ROMA指数对卵巢癌的最佳诊断截断点分别为301.76 kU·L^-1、294.13 mg·L^-1、82.48%;血清CA19-9、HMGA2及ROMA指数单独检测诊断卵巢癌的特异性、敏感性、准确度比较差异无统计学意义(P>0.05);血清CA19-9、HMGA2及ROMA指数联合检测诊断卵巢癌的特异性、敏感性、准确度高于三者单独检测(P<0.05)。结论血清HMGA2、CA19-9及ROMA指数联合检测对卵巢癌有一定的诊断价值。

白藜芦醇对哮喘小鼠气道炎症及肺组织高迁移率族蛋白B1和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨白藜芦醇(RES)对哮喘小鼠气道炎症及肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响。方法将36只C57BL/6雌性小鼠随机分为对照组、哮喘组和RES干预组,每组各12只。采用卵清蛋白混合液腹腔注射致敏并雾化吸入激发建立哮喘小鼠模型。采用苏木素-伊红染色和过碘酸-雪夫染色观察小鼠气道炎症及黏液分泌情况;酶联免疫吸附试验检测肺泡灌洗液(BALF)中HMGB1和MMP-9蛋白表达水平;分别采用免疫组化染色、逆转录-聚合酶链反应检测肺组织中HMGB1和MMP-9蛋白、mRNA表达水平。结果RES干预组小鼠肺组织炎症病理学评分和基底膜周径标准化的PAS+杯状细胞面积(Apas+/Pbm)均明显低于哮喘组(P<0.05)。哮喘组小鼠BALF中炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞计数、巨噬细胞计数、淋巴细胞计数、HMGB1及MMP-9表达水平均高于对照组(P<0.05),而RES干预组小鼠上述指标均低于哮喘组(P<0.05)。对照组小鼠肺组织中HMGB1和MMP-9蛋白及mRNA的表达较少,而哮喘组小鼠肺组织中的表达明显增多,但RES干预组小鼠肺组织中HMGB1和MMP-9蛋白及mRNA的表达水平均明显低于哮喘组(P<0.05)。结论RES可减轻哮喘小鼠气道炎症和气道重塑,其可能机制为通过调节肺组织HMGB1和MMP-9的表达。

血清心肌酶、CRP、HMGB1、MMP-9水平在新生儿肺炎感染类型鉴别及病情评估中的应用价值

目的探讨血清心肌酶[肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]、C反应蛋白(CRP)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平变化在新生儿肺炎感染类型鉴别及病情评估中的应用价值。方法前瞻性选取西安高新医院新生儿科2016年8月至2019年8月收治的106例新生儿肺炎患儿,其中病毒感染38例作为病毒感染组,细菌感染68例作为细菌感染组。检测并比较两组患儿的血清CK、CK-MB、CRP、HMGB1、MMP-9水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清CK、CK-MB、CRP、HMGB1、MMP-9对新生儿肺炎感染类型的鉴别诊断价值。比较细菌感染、病毒感染不同病情程度患儿血清CK、CK-MB、CRP、HMGB1、MMP-9水平,Spearman秩相关性分析各血清指标与细菌感染、病毒感染病情程度的关系。结果病毒感染组患儿的血清CK、CK-MB水平明显高于细菌感染组,CRP、HMGB1、MMP-9明显低于细菌感染组,差异均有显著统计学意义(P<0.01);ROC曲线分析显示,血清CRP AUC(0.808)最大,且其诊断特异度89.71%最高,MMP-9诊断敏感度92.11%最高,两者联合诊断AUC为0.889,敏感度为71.05%,特异度为95.59%;病毒感染重度患儿血清CK、CK-MB、CRP、HMGB1、MMP-9明显高于轻度患儿,差异均有显著统计学意义(P<0.01);细菌感染重度患儿血清CK、CK-MB、CRP、HMGB1、MMP-9明显高于轻度患儿,差异均有显著统计学意义(P<0.01);Spearman秩相关性分析结果显示,血清CK、CK-MB、CRP、HMGB1、MMP-9与病毒感染、细菌感染的新生儿肺炎病情程度均呈正相关(P<0.05)。结论血清CK、CK-MB、CRP、HMGB1、MMP-9可有效鉴别新生儿感染类型,其中CRP联合MMP-9诊断价值最佳,且均可作为评估病情的重要指标。

TSGF与CA19-9联合检测对消化道恶性肿瘤的诊断价值

目的探讨肿瘤相关物质(TSGF)与糖抗原19-9(CA19-9)检测在消化道恶性肿瘤(malignant tumors in digestive tract,MTD)诊断中的价值。方法采用比色法检测TSGF,酶免法检测CA19-9。结果TSGF、CA19-9联合检测MTD的敏感性为89.7%,特异性为92.9%,准确性为92.3%,与单项检测CA19-9相比敏感度明显提高。结论联合检测TSGF、CA19-9能提高MTD的诊断率。

MicroRNA-9对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的检测miR-9在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织和细胞中的表达水平,探讨miR-9对OSCC细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法收集42例OSCC患者肿瘤及癌旁组织标本。将SCC-9细胞分为3组:miR-9 mimics组,转染对照组(miR-NC)和未转染组(空白组)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测组织样本和细胞中miR-9的表达水平,体外实验通过转染miR-9 mimics至SCC-9细胞中,平板克隆形成试验和流式细胞术检测细胞增殖凋亡情况。Pearson相关分析分析miR-9与人高迁移率族AT Hook蛋白2(HMGA2)的相关性;荧光素酶试验,qRT-PCR和蛋白质印迹技术(Western blot)验证HMGA2是miR-9的靶基因。结果与癌旁组织和正常口腔角化细胞相比,miR-9在OSCC组织和细胞中的表达下调(P<0.05);体外实验发现,与空白组和miR-NC组相比,miR-9mimics组的细胞增殖受到抑制,而凋亡比率增加(P<0.05)。机制研究结果表明,OSCC组织中HMGA2 mRNA和蛋白的表达均增加(P<0.05),并与miR-9成显著负相关(r=-0.7701,P<0.001);荧光素酶结果显示,miR-9能直接与HMGA2-3'-UTR靶向结合;成功转染miR-9 mimics后能降低SCC-9细胞中HMGA2 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论在OSCC中,miR-9表达下调;miR-9能够降低HMGA2表达,抑制OSCC细胞增殖,促进其凋亡。

糖尿病患者血清中CA19-9水平与唾液酸及Lewis血型的关系

目的探讨2型糖尿病(2DM)患者血清中CA19-9水平升高的原因。方法对1 000例2DM患者及正常对照进行CA19-9、唾液酸(SA)、HbA1c及Lewis血型检测及相关分析。结果2DM患者中,CA19-9均值高于对照组,CA19-9阳性率为17.9%。CA19-9阳性2DM患者SA均值低于对照组,CA19-9与SA水平负相关(r=-0.675,P<0.01)。CA19-9阳性Lewi-sa+b-型2DM患者CA19-9水平明显高于Lewisa-b+型患者,并且与SA水平负相关程度提高(r=-0.791,P<0.01),而CA19-9与HbA1c水平呈正相关(r=0.592,P<0.01)。CA19-9阳性2DM患者治疗后,CA19-9水平下降明显,SA显著升高。结论2DM患者CA19-9升高是Lewisa血型物质与唾液酸和葡萄糖非酶促反应的结果,非恶性升高。2DM患者治疗后,CA19-9水平下降。

Sox9诱导人脐血干细胞向软骨细胞分化的实验研究

目的探讨Sox9基因对脐血干细胞向软骨细胞分化的影响。方法体外分离培养人脐血干细胞,采用脂质体转染Sox9载体质粒,观察转染后细胞形态的变化,免疫组化染色观察collagenⅡ、aggrecan的表达,RT-PCR检测collagenⅠ、collagenⅡ、aggrecan的m RNA水平变化,Western blot检测collagenⅡ的表达变化。结果 Sox9对脐血干细胞形态无明显影响,与传统方法诱导组相比,Sox9转染后可明显促进脐血干细胞向软骨细胞分化。结论 Sox9对脐血干细胞的软骨分化有很强的调控作用,脐血干细胞可作为组织工程软骨一种良好的种子细胞。

SOX9通过Wnt/β-catenin途径驱动非小细胞肺癌A549细胞的上皮-间充质转化

目的:探究SRY相关的高迁移率族盒9(SOX9)通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)途径促进非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞上皮-间充质转化(EMT)的机制。方法:将A549细胞分为OE-NC组、OE-SOX9组、OE-SOX9+XAV-939组。其中OESOX9组通过转染SOX9pcDNA质粒上调SOX9的表达水平;OE-SOX9+XAV-939组在转染SOX9pcDNA质粒的同时在培养基中加入β-catenin抑制剂XAV-939(1.0μmol/L)。用qPCR检测SOX9 mRNA表达水平,CCK-8法检测A549细胞增殖能力,划痕愈合实验检测A549细胞迁移能力,Transwell小室实验检测A549细胞的侵袭能力,WB实验检测SOX9、β-catenin、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、γ-连环蛋白(γ-catenin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达水平。结果:转染后OE-SOX9组和OE-SOX9+XAV-939组的SOX9 mRNA和蛋白的水平显著高于OE-NC组(均P<0.05),且OE-SOX9组和OE-SOX9+XAV-939组比较无显著差异(P>0.05)。OE-SOX9组细胞增殖、侵袭和迁移能力显著高于OE-NC组,而OE-SOX9+XAV-939组显著低于OE-SOX9组(均P<0.05)。OE-SOX9组β-catenin蛋白水平显著高于OE-NC组,而OE-SOX9+XAV-939组β-catenin蛋白的水平低于OE-SOX9组(均P<0.05)。与OE-NC组比较,OE-SOX9组的上皮细胞表型标志物E-cadherin、γ-catenin水平下调并且间充质细胞表型标志物N-cadherin、vimentin上调,而OE-SOX9+XAV-939组E-cadherin、y-catenin高于OE-SOX9组,且N-cadherin、vimentin低于OE-SOX9组(均P<0.05)。结论:SOX9可通过激活Wnt/β-catenin通路促进NSCLCA549细胞的增殖、迁移和EMT。

普鲁卡因通过调节SRY相关高迁移率族盒蛋白9抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡的机制研究

目的探讨普鲁卡因(PCA)通过调节SRY相关高迁移率族盒蛋白9(SOX9)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的作用机制。方法以不同浓度(0、2.5、5.0、10.0 mmol/L)PCA处理MCF-7细胞,采用MTT法、流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测细胞增殖、凋亡及细胞中SOX9表达情况。采用MTT法和流式细胞术检测转染SOX9 siRNA对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。过表达SOX9联合10.0 mmol/LPCA处理48 h,检测细胞增殖和凋亡情况。结果培养48、72 h时,随着PCA浓度增加,MCF-7细胞光密度(OD)490值逐渐下降(P<0.05)。培养48h,细胞凋亡率随PCA浓度的增加而提高,nRNA及SOX9蛋白水平均随着PCA浓度增加而下降(P<0.05)。si-SOX9组MCF-7细胞中SOX9蛋白表达量及OD490值均低于si-con组,凋亡率高于si-con组(P<0.05)。PCA组MCF-7细胞中SOX9蛋白表达量及OD49。值均低于Control组,凋亡率高于Control组(P<0.05)。PCA+pcDNA-SOX9组MCF-7细胞中SOX9蛋白表达量及OD49。值均高于PCA+pcDNA组,凋亡率低于PCA+pcDNA组(P<0.05)。结论 PCA可通过调控SOX9表达抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,同时促进细胞凋亡。

吴起、定边地区上三叠统延长组长7—长9储层特征研究

为研究鄂尔多斯盆地吴起、定边地区延长组长7—长9油层组的储层特征,利用薄片、粒度、压汞、物性等资料,对储层的岩石学、孔隙结构、物性等特征进行了分析,并分析了沉积作用、成岩作用对储层物性的影响。研究结果表明:吴起、定边地区上三叠统延长组长7—长9油层组的储层主要发育岩屑长石砂岩;孔隙以溶蚀粒间孔为主,孔隙度主要为8%～12%,渗透率主要为0.1～1mD。压实作用使储集层的原始孔隙空间损失;胶结作用不仅破坏了部分原生孔隙,而且使部分次生溶孔也遭到了破坏;溶解作用使储层物性得到了改善。

PCI对冠心病患者血清MMP-9、hs-CRP、HMGB1水平的影响及其预后分析

目的探讨经皮冠状动脉介入术(PCI)对冠心病(CHD)患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平的影响及其预后分析。方法抽取2014年5月-2016年4月蛇口人民医院127例CHD患者,根据病史、临床症状、心电图检查、冠脉造影等分为SAP(稳定型心绞痛,n=43)、UAP(不稳定型心绞痛,n=43)、AMI(急性心肌梗死,n=41)三组,均行PCI治疗,分别于手术前5min及术后48h抽取静脉血检测血清MMP-9、hs-CRP、HMGB1水平,并进行对比。术后随访6个月,根据是否发生不良心脏事件(MACE)分为MACE组(n=22)与非MACE组(n=105),对比两组手术前5min及术后48h时血清MMP-9、hs-CRP、HMGB1水平。结果 SAP组、UAP组、AMI组PCI前5min及术后48h血清MMP-9、hs-CRP、HMGB1水平经单因素方差分析,差异均具有统计学意义(P<0.05);三组术后48h血清MMP-9、hs-CRP、HMGB1水平均较术前5min明显上升,差异有统计学意义(P<0.05);MACE组与非MACE组手术前5min血清MMP-9、hs-CRP、HMGB1水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),术后48hMACE组血清MMP-9、hs-CRP、HMGB1水平均明显高于非MACE组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PCI后可导致CHD患者血清MMP-9、hs-CRP、HMGB1水平上升,加重机体炎症反应,致使短期内心肌损伤。