黏虫HSP90/70组织蛋白基因的分子特征与表达特性

为解析黏虫Mythimna separata响应环境胁迫的分子机制,采用RACE和RT-PCR的方法从黏虫中克隆了1个HSP90/70组织蛋白(heat shock 90/70 organizing protein, HOP)基因,并采用qRT-PCR分析了其在多种生物和非生物胁迫下的表达特性。结果表明,MsHOP具有1个1 626 bp的开放阅读框,编码541个氨基酸,预测的分子量为61.7 kDa。序列分析表明,MsHOP主要由已报道的3个保守四肽重复结构域(TPR1, TPR2A和TPR2B)和2个天冬氨酸-脯氨酸重复基序(DP)构成。基于鳞翅目昆虫HOP构建的系统进化树显示MsHOP与棉铃虫Helicoverpa armigera HOP和烟芽夜蛾Heliothis virescens HOP的亲缘关系最近。qRT-PCR分析表明,MsHOP在黏虫所有发育时期和组织均表达,分别在5龄幼虫和雌成虫中肠的表达量最高。在30℃下处理1 h后,MsHOP的表达水平较对照显著提高,而在33℃~39℃下处理1 h后MsHOP的表达水平则与对照差异不显著。饥饿24~72 h后,MsHOP的表达与对照相比无明显变化。Bt能显著诱导MsHOP的表达,其表达水平随Bt浓度的升高而上调,并在64 IU/mL浓度下的表达量最高。幼虫饲养密度对MsHOP的表达也具有显著影响,其表达水平随密度的升高而上调,在20头/瓶的饲养密度下达到最大值。这些结果表明,MsHOP可能在黏虫的生长发育、抵御杀虫剂和密度胁迫中发挥重要作用。

解析“套型建筑面积”与国六条“90/70”

本文主要阐述套型建筑面积定义。

住房供应结构管制的市场效应——以“90/70”政策为例

本文基于成都市2004—2013年的新建商品住房近100万套全样本微观交易数据,采用时间序列干扰分析模型等经验研究方法对该政策的影响效果从＂量＂、＂价＂两个方面进行全面的评估。结果发现：（1）此政策的引导起到了显著的作用,成交套型更加向65～90平方米面积段集中,尤其是接近90平方米的85～90平方米面积段,成交量相对增加了330.6%,远大于其他面积段的变化幅度;（2）成交价格方面无论是从绝对均价还是从中位数价格均呈现出＂套型面积越大,住房价格涨幅越大＂的特点,尤其是150平方米以上住房,价格涨幅随着面积的增加显著提升。总体来讲,政策的实施效果基本上符合管理层的初衷,但随着计划生育政策的逐步放开,家庭户均人口的增大,和不同类型城市人口流入结构的变化,我们建议审慎大范围重启此政策,以免造成微观市场上的＂供需＂错配。

丁香酚慢性麻醉对红鲫血液生理及肝脏hsp70和hsp90mRNA表达量的影响

为研究丁香酚慢性麻醉对红鲫(Carassius auratus)血液生理及肝脏中应激基因hsp70和hsp90mRNA相对表达量的影响,试验设置丁香酚处理组和对照组,用15 mg/L丁香酚处理平均体质量(61.9±3.66)g红鲫12 h。试验结果表明,经12 h麻醉后,试验组红鲫除游动变缓外,其它行为表现正常,未出现死亡现象;麻醉组红鲫血液中皮质醇含量、乳酸脱氢酶活力显著下降,而血糖和K^(+)、Na^(+)浓度却显著上升。基因定量结果显示,麻醉组红鲫肝脏中hsp70和hsp90mRNA相对表达量显著高于对照组。综上所述,15 mg/L丁香酚处理12 h内对红鲫未造成明显损伤,可用于其保活运输。

HSP70/HSP90在鼻咽癌热疗后的表达变化及对热疗疗效影响的体外研究

目的探讨体外鼻咽癌细胞系HNE1细胞热疗后热休克蛋白70/90(HSP70/HSP90)的表达变化及抑制HSP70/HSP90表达对鼻咽癌热疗的影响,并初步探讨其机制。方法对体外培养的鼻咽癌细胞HNE1,恒温水浴42℃热处理2h,分别于2h、4h、6h、8h、12h、24h后荧光定量PCR检测HSP70/HSP90的基因表达变化,采用Westernblot检测蛋白表达量的变化。流式细胞术检测细胞的凋亡,观察在热疗前应用槲皮素、格尔德霉素及联合应用对HSP70/HSP90表达抑制后,对HNE1细胞凋亡的影响。结果42℃热疗后鼻咽癌细胞HSP70/HSP90表达在基因及蛋白水平上均有明显升高,4h达到高峰,8h后开始回落,24h接近正常。槲皮素能抑制HSP70表达,但导致HSP90表达水平升高及下降延迟。热疗前使用槲皮素及格尔德霉素处理,凋亡细胞比例明显增加,联合处理组增加更为明显(P<0.05)。结论HSP70/HSP90在HNE1细胞内的表达均在热疗后迅速升高,在热疗前联合抑制HSP70/HSP90的活性,可以更有效增加热疗敏感性。

热休克蛋白70和90α在人胃癌组织中表达及其与胃癌生物学行为的关系

目的:研究热休克蛋白70和90α在人胃癌组织和正常黏膜组织中的表达,探讨其表达与胃癌生物学行为的关系。方法:41例胃癌组织和相应的正常黏膜组织分别行免疫组织化学染色和RT-PCR检测,分析检测结果。结果:热休克蛋白70和90α在胃癌组织中表达分别为75·6%(31/41)和80·5%(33/41),明显高于正常黏膜组织中的表达,在分化较差的肿瘤类型中表达分别为85·2%和88·9%,高于分化较好的肿瘤类型,在淋巴结转移阳性的病例中分别为82·8%和86·2%,高于淋巴结转移阴性的病例,在TNM分期Ⅲ、Ⅳ期的病例中表达分别为80·6%和83·9%,高于其他分期。结论:热休克蛋白70和90α在胃癌组织中明显表达升高,且在晚期的病例中表达高于相对较早期的病例,与胃癌的生物学行为有关。

HSP70,HSP90在结肠癌中表达及其和生物学行为的相关性

目的:探讨HSP70,HSP90在人结肠癌中的表达情况及其和结肠癌细胞生物学行为的相关性.方法:结肠癌患者手术标本40例,分别以癌组织、癌旁2cm组织和远离癌灶的正常黏膜组织作为病例组和对照组.用亲和免疫组织化学技术方法检测HSP70和HSP90,并收集该40例患者的临床Duke's分期,分析HSP70和HSP90蛋白的阳性程度和结肠癌临床分期是否存在相关性.结果:癌组织HSP70和HSP90的表达明显增高,癌组织、癌旁组织和正常黏膜组织三组之间HSP70和HSP90表达率有明显差异(HSP70:82.5%vs52.5%vs25%,χ2=26.58,P=0.000;72.5%vs42.5%vs22.5%,χ2=20.41,P=0.000);HSP70和HSP90蛋白的阳性程度和结肠癌临床分期存在相关性(HSP70:tau_b=0.392,P=0.006;HSP90:tau_b=0.396,P=0.006).结论:结肠癌细胞存在HSP70和HSP90蛋白的过度表达,HSP70,HSP90和结肠癌细胞的生物学行为存在相关性.

血清热休克蛋白70、热休克蛋白90和胃泌素水平对重症颅脑损伤并发应激性溃疡的预测

目的探讨血清热休克蛋白70(HSP70)、热休克蛋白90(HSP90)和胃泌素(GAS)水平对重症颅脑损伤并发应激性溃疡的预测价值。方法选取126例重症颅脑损伤患者,入院后均采用酶联免疫法(ELISA)检测血清HSP70、HSP90和GAS水平,并实施标准去大骨瓣减压术联合腰大池引流术。统计应激性溃疡发生率,分析血清HSP70、HSP90和GAS水平与患者并发应激性溃疡的关系及三者联合对该并发症的预测价值。结果应激性溃疡发生率为32.17%;并发应激性溃疡患者入院后血清HSP70、HSP90和GAS水平均高于未并发者(P<0.05);年龄、入院格拉斯哥昏迷量表(GCS)3~5分、入院后血清HSP70水平、入院后血清HSP90水平、入院后血清GAS水平、入院后转铁蛋白(TRF)水平、入院后随机血糖水平、低血压、低氧血症、代谢性酸中毒、应用糖皮质激素均是并发应激性溃疡的危险因素(P<0.05),入院后血红蛋白(Hb)水平、入院后红细胞压积(HCT)、应用保护胃黏膜药物、应用乌司他丁是其保护因素(P<0.05);血清HSP70、HSP90、GAS水平联合预测重症颅脑损伤并应激性溃疡的灵敏度均高于单独预测(P<0.01),曲线下面积(AUC)均高于单独预测(P<0.05),特异度均与单独预测差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清HSP70、HSP90、GAS水平升高可增加重症颅脑损伤并发应激性溃疡的风险,且年龄、入院GCS3~5分等也均是其危险因素,入院后Hb水平、入院后HCT等是其保护因素,血清HSP70、HSP90、GAS水平联合预测并发应激性溃疡的效能高。

ER、PR、HSP70和HSP90在子宫内膜息肉治疗前后的表达及意义

目的研究子宫内膜息肉(EP)治疗前后雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及热休克蛋白70、90(HSP70、90)的表达及意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)来检测29例EP及其治疗后3～6个月后内膜中息肉中ER、PR、HSP70和HSP90的转录水平。结果治疗后子宫内膜中ER、HSP70较治疗前EP组织中表达降低(P<0.05),而PR和HSP90改变不明显(P>0.05)。结论通过刮宫治疗EP,能够使子宫内膜内环境得到一定改善,ER、HSP70在本病发生中起重要作用。

热休克蛋白70、90在白血病细胞K562巨噬细胞样分化过程中的表达研究

目的 复制hexamethylenebisacetamide(HMBA)诱导白血病细胞K5 6 2向巨噬细胞样分化的模型 ,检测热休克蛋白 70、90 (HSP70 ,HSP90 )在这一分化过程中的表达变化。方法 用HMBA诱导K5 6 2细胞并通过联苯胺、萘酚AS D氯醋酸酯酶及吉姆萨 瑞氏染色、电镜观察、流式细胞仪证实其分化方向 ,并用Westernblot方法检测K5 6 2细胞分化前后HSP70、HSP90的表达变化。结果 成功地复制了这一模型 ,并检测到HSP70、HSP90蛋白在K5 6 2细胞向巨噬细胞样分化后表达增高。结论 HSP70、HSP90可能在K5 6 2细胞向巨噬细胞样分化过程中有重要作用。

人结肠癌中热休克蛋白70、90α和90βmRNA的表达及其意义

背景:热休克蛋白(HSP)高表达可增强肿瘤细胞的抗凋亡能力,使细胞生长抑制效应减弱,细胞死亡减少。HSP70和HSP90是HSP家族中拮抗细胞凋亡的两种主要蛋白,可能在肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。目的:探讨人结肠癌中Hsp70、Hsp90α和Hsp90βmRNA的表达及其意义。方法:取31例结肠癌手术标本的癌组织、癌旁组织和正常组织,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Hsp70、Hsp90α和Hsp90β基因转录水平的表达。以单因素方差分析了解各结肠组织中基因表达水平的差异,以相关分析研究癌组织和正常组织中各基因表达的相关性。结果:结肠癌组织中Hsp70、Hsp90α和Hsp90βmRNA的表达水平均显著高于癌旁组织和正常组织。正常组织中Hsp70、Hsp90α和Hsp90βmRNA的表达两两之间均存在相关性,而癌组织中仅Hsp70与Hsp90αmRNA的表达之间存在相关性。结论:Hsp70、Hsp90α和Hsp90β在人结肠癌的发生、发展过程中起有一定作用。

肾脏移植后慢性移植物肾病相关基因C-H-ras、TGF-β_1、HSP70和HSP90的表达

目的探讨肾脏移植后慢性移植物肾病（CAN）相关基因C-H-ras、TGF-β1、HSP70及HSP90的表达及其意义。方法实验分为3组：正常对照组10例，为正常肾脏标本；术中穿刺组10例，为肾脏移植术中复流40～60min后的移植肾穿刺标本；CAN组8例，为木后1～7年CAN患者肾组织穿刺标本。采用免疫组织化学及原位杂交法对每例标本行C—H—ras、TGF-β1、HSP70及HSP90蛋白和mRNA表达水平检测。结果术中穿刺组HSP70表达水平最高，CAN组C—H—ras、TGF-β1及HSP90表达水平最高。结论c—H—ras和TGF-β1两种基因的共同高表达与CAN的发生发展关系密切。调控相关基因的表达可能有助于延缓和治疗CAN。

急性冷应激对阿勒泰羊HSP60、HSP70和HSP90基因mRNA表达的影响

为研究急性冷应激通过影响热休克蛋白含量的变化对阿勒泰羊抗寒性能、生产性能及抗病性能等的影响,试验设置常温组(15℃±2℃)与冷应激组(-25℃±2℃),每组各5只羊,屠宰后分别采集急性冷应激组(冷应激24 h后)和常温组的心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织。采用实时荧光定量PCR技术对HSP60、HSP70和HSP90 mRNA含量变化进行检测,并对HSP 60、HSP 70和HSP 90基因进行同源性分析。结果显示,HSP 70和HSP 90基因与已有绵羊序列同源性高于99%,而HSP 60基因与已有波斯金牛序列同源性高于99%;冷刺激后HSP 60基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肾脏中的表达量差异极显著(P<0.01);冷刺激后HSP 70基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏和肾脏组织中的表达量差异极显著(P<0.01);冷刺激后HSP 90基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏组织中表达量差异显著(P<0.05),而在脾脏和肾脏组织中的表达量差异极显著(P<0.01)。表明急性冷应激极大程度地刺激了机体的产热机能,通过通路中的产热相关基因的相互调节使其能量代谢发生改变,从而提高细胞生存率,增强机体对环境胁迫的耐受力,能更好地适应环境温度的变化。试验结果为进一步深入研究急性冷应激对阿勒泰羊机体的影响提供一定理论依据。

70后、80后和90后消费者的价值观与生活形态——一个帖子引发的世代争议

世代亚文化对消费者行为有直接影响，营销人员针对不同年龄采取不同的市场策略。现在对世代的划分普遍以年代作为界限，如1970年、1980年、1990年等。社会各界对70后、80后、90后的关注从未间断过，如豆瓣2008年年初的一篇“70后、80后和90后的区别”的帖子，回帖量高达477个，历时两年依然有人回帖发表见解。为了验证原帖中关于70后、80后、90后价值观与生活形态的描述，本文针对该帖子采用内容分析法对回帖内容进行编码，得出“对原帖的整体态度”、“对三个世代整体态度的描述”、“对原帖中个别事实的态度”和“回帖者新增对于世代的观点”四个部分，进行分析和总结发现：（1）原帖对某些事实的夸张和贬义倾向导致48％的回帖对整体持否定态度；（2）对80后持肯定态度的帖子数量最多，对90后的争议最多，涉及70后的回帖较少；（3）80后符合事实的条目最多，其次是关于70后的描述，对90后描述的事实都或多或少的遭到反对；（4）回帖者提出两个主要观点，即三个世代对比的前提不合理与世代划分的标准值得商榷。

GE Fanuc 90-70系列PLC和iFIX组态软件在稀硝酸机组基础自动化系统中的应用

本文针对稀硝酸机组的工艺特点及技术要求，介绍了基于PLC和组态软件技术实现生产过程监控的化工机组自动化系统，讨论了由现场级、PLC控制级和监控级三层组成的基础自动化系统的结构、功能和控制方法。用防喘振控制模式、启停车逻辑控制模式及PID回路控制器实现了该机组的控制目标。该系统成功地应用于安徽化工10万吨稀硝酸机组中，实现了机组运行过程的实时监控、防喘振控制和联锁逻辑等功能，获得了良好的应用效果。

对70/90政策的思考

对"70/90"政策出台的背景及面临的挑战、政策实施的效果及原因进行了论述,对开发商面对"70/90"政策是如何钻空子、规避政策的监管等问题作了分析,旨在通过"70/90"政策的合理有效实施,达到减缓房价上涨,降低购房门槛的目的。

GE90-70系列PLC电源故障后果及处理措施

Genius Modular Redundancy(Genius总线模块冗余系统)由一系列模块子系统组成,综合形成柔性且强有力的整体。利用90-70PLC,Genius I/O模块,VersaMax I/O产品,GMR提供了从输入设备,1/2/3个PLC CPU,到输出设备不同的组合表决方式。GE90-70系列PLC在渤海某油田群作为紧急停车系统(安全仪表系统)得到了广泛的应用,该油田群由于电源模块失效导致的关断次数较多,重点分析了电源模块故障后果以及后续优化措施。

浅谈建筑面积90平方米以下中小套型住宅的建筑设计

本文从分析执行“90平方米以下,70%”规定后,住宅建筑设计可能存在的问题入手,提出如何在总平面布置、建筑单体设计等方面做好高容积率下的中小户型住宅建筑设计。强调在新的政策形势下建筑师应当注重降低住宅建筑无效空间,用好户内每一寸空间进行精细化的建筑设计。

“国六条”调控政策对住宅用地控制指标的影响——以龙泉驿区同安片区住宅用地控制性指标研究为例

以龙泉驿区同安片区住宅用地控制指标研究为例,解读"国六条"及全国重点城市住宅规划,以现场踏勘、基础资料收集、各部门座谈等方式,了解龙泉驿的基本情况和房地产发展设想。解析"90/70"政策中量化指标对住房建设控制的要求,以上位总体规划为依据,运用综合因素研究的方法,对该区新开发住宅用地的量化指标进一步细化控制,达到区域平衡。

温度诱导对星豹蛛热激蛋白hsp70和hsp90基因表达的影响

为探讨温度诱导对星豹蛛的应激反应,运用实时定量PCR法测定了不同温度对星豹蛛热激蛋白hsp70和hsp90基因表达量的影响。结果表明:经过17、20、23、26℃诱导后,星豹蛛hsp70和hsp90基因表达量与对照组差异不显著,当高于26℃时,随着温度的升高表达量呈先升高后降低的趋势,且在38℃时最高,分别为对照组的716.46和10.44倍,差异显著;低于17℃时,表达量随着温度的降低呈逐渐升高的趋势,其中-1℃时最高,分别为对照组的334.53和9.38倍,差异显著;-1~41℃范围内,在相同诱导温度处理下,星豹蛛hsp70基因表达量显著高于hsp90基因。表明当星豹蛛受到温度高于26℃或低于17℃的刺激后,体内hsp70和hsp90基因表达量均增加,且hsp70基因表达量高于hsp90基因。说明热激蛋白只有在极端高温和低温的条件下才充分表达,从而对机体产生保护作用,且这种保护只在一定温度范围内起作用。