一种新的90kD胞外蛋白激发子诱导烟草系统获得抗性研究

就棉疫病菌 (Phytophthora boehmeriae Saw.)培养滤液中提纯获得的 90 k D胞外蛋白激发子诱发烟草系统获得抗性进行了研究。以 10 nmol/L激发子溶液注射处理 Samsun NN烟草叶片 2 4 h后 ,在处理叶片及其上、下各 2片叶片接种 TMV,结果是处理叶及其上、下各 2片叶片上的枯斑数显著少于对照 ,诱抗防效达 4 0 .9%～ 5 3.1% ;接种 TMV7d后处理叶片的枯斑平均直径为 1.2 3mm,显著小于对照叶片上的枯斑直径 2 .97mm,但是处理叶片的上、下叶片上的枯斑平均直径与对照没有显著差别。以 10 nmol/L激发子溶液注射处理 Samsun NN烟草叶片分别立即接种或于 1、2、4、7、15 d接种 TMV,结果证明该激发子诱导烟草对 TMV的抗性以处理后第 1d至第 4 d接种为较好 ,防效达30 .2 %～ 5 0 .4 % ;处理后立即接种和第 7d接种 TMV诱抗防效仅 4 %左右 ,处理叶片上的枯斑数与对照没有显著差别 ,表明较强的诱导抗性可持续时间 <7d。用不同浓度激发子处理烟叶 ,所测定的0 .5～ 10 0 nmol/L各浓度均可显著地诱发烟草对 TMV产生获得抗性 ,诱导抗性效果为 34.9%～5 8.2 % ,诱导抗性效果随浓度的降低呈下降趋势。以 10 nmol/L激发子溶液注射处理 W38烟草叶片 ,2 d后分别注射接种烟草野火病菌 (Pseudomonas syringae pv.tabaci)

棉疫病菌90kD胞外蛋白激发子生物活性与稳定性研究

对棉疫病菌 (Phytophthora boehmeriae Saw.) 90 k D胞外蛋白激发子的生物活性与稳定性进行了研究。用不同浓度的激发子处理烟叶测定其诱发过敏反应的有效浓度 ,结果是所测定的0 .5～ 10 0 nmol/ L各浓度均可诱发过敏反应 ,但 10 0 pmol/ L不能诱发过敏反应 ,表明该激发子诱导烟草产生过敏反应的最低有效浓度在 10 0 pmol/ L～ 0 .5 nmol/ L之间。该激发子可诱导不同烟草 (Nico-tiana tabacum L .)品种产生过敏反应 ,但不能诱导辣椒 (Capsicum annuum L .)和茄子 (Solanum me-longena L.)等茄科作物及棉花 (Gossypium arboreum L inn.)发生过敏反应 ,初步表明该激发子诱导植物发生过敏反应具有一定的专化性。以 10 nmol/ L激发子溶液处理烟叶后分别于第 0、2 4、4 8和 72 h接种烟草疫霉 (Phytophthora nicotianae) ,结果证明该激发子可以诱导烟草产生抗性反应 ,其抗性以处理后立即接种烟草疫霉为最强 ,接种后 4 8h防效达 6 8%,以后随时间的延长逐渐减弱。激发子分别经 p H值 2～ 14的水溶液 2 5℃处理 30 min,或分别经 4、2 5、6 0和 10 0℃处理 5 min仍能诱发过敏反应 ,但是经蛋白酶 K处理后不能诱发过敏反应。表明该激发子对酸、碱和温度不敏感 ,但对蛋白酶 K敏感。

棉疫病菌90kD胞外蛋白激发子诱导烟草过敏性反应的研究

就棉疫病菌 90kD胞外蛋白激发子诱导烟草过敏反应 (HR)过程中细胞死亡和防卫反应酶系活性变化及病程相关蛋白PR5的诱导进行研究。结果是 ,以 10nmol/L激发子溶液注射处理W38烟草叶片 ,HR枯斑周围 5mm宽组织在UV光下呈现蓝色荧光 ,对处理部位进行Evansblue染色测定结果是至 2 0h处理部位细胞全部死亡 ;激发子可诱导烟草防卫反应中苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性提高 ;可快速诱导PR5基因的转录。上述结果表明 90kD蛋白激发子可诱发烟草的细胞死亡、苯丙烷代谢和PR基因的表达等多条信号途径。

二维色谱分离纯化90kD激发子受体蛋白

利用DEAE阴离子交换色谱和疏水/反相二维色谱,从烟草叶片中获得了90kD激发子受体,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳证实,该蛋白是均匀单一,分子量为32kD,该蛋白具强的疏水性。用ELISA方法证实该蛋白与激发子能特异结合。

肿瘤中胞外热休克蛋白90的研究现状

热休克蛋白90为细胞内一种重要的伴侣蛋白,其可调控众多癌相关客户蛋白的成熟和稳定,不仅在肿瘤细胞内大量存在,同时也存在于肿瘤细胞的胞外空间,即定位在细胞的表面或分泌到细胞外。越来越多的研究表明胞外热休克蛋白90可以促进肿瘤细胞的侵袭和转移,并可作为癌症治疗的一个重要的作用靶点。