新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段95抗原基因克隆及序列分析

目的 研究细粒棘球绦虫95抗原(Eg95)基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段的表达及其基因序列差异。方法 根据Eg95基因序列设计引物,用PCR方法分别从新疆株细粒棘球绦虫3个不同发育阶段(原头蚴、六钩蚴和成虫)所构建的cDNA文库中克隆获得Eg95目的基因,将其克隆至pUCm-T载体、测序并进行序列分析。结果从3个不同发育阶段的新疆株细粒棘球绦虫cDNA文库中均克隆出Eg95基因,其基因片段长度为402bp,同源性比对分析(BLAST)结果表明,所克隆的新疆株Eg95基因与GenBank中的Eg95基因序列一致。结论 Eg95基因在新疆株细粒棘球绦虫不同发育阶段均有表达,其基因序列无差异。

细粒棘球蚴95抗原基因的克隆及原核表达质粒的构建

目的:克隆细粒棘球蚴 95 (Eg95 )抗原基因 ,构建携带目的基因的原核表达载体 ,为细粒棘球蚴抗原的免疫保护机制研究提供材料。 方法:应用 PCR方法从细粒棘球蚴 c DNA文库中克隆获得 Eg95抗原基因 ,将其克隆至 p U Cm- T载体 ,测序确定其正确性。利用定向克隆技术将 Eg95抗原基因片段克隆至原核表达质粒 p ET2 8上 ,根据选择标记的卡那霉素抗性基因筛选到阳性克隆 ,通过酶切分析和 PCR鉴定筛选出阳性克隆 ,测序确定序列。结果:测序表明所有 p ET2 8- Eg95阳性克隆均为正确连接 Eg95抗原基因的重组质粒。结论:p ET2 8-

细粒棘球蚴95(Eg95)抗原基因的克隆及真核表达质粒的构建

目的 克隆Eg95抗原基因 ,构建携带目的基因的真核表达载体 ,为细粒棘球蚴DNA疫苗的研究提供材料。方法 应用PCR方法从细粒棘球蚴cDNA文库中克隆获得Eg95抗原基因 ,将其克隆至 pUCm -T载体 ,测序确定其正确性。利用定向克隆技术将Eg95抗原基因片段克隆至真核表达质粒pcDNA3上 ,根据选择标记的氨苄抗性基因筛选到阳性克隆 ,通过酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆 ,测序确定序列。结果 测序表明所选 pcDNA3-Eg95阳性克隆均为正确连接Eg95抗原基因的重组质粒 ,可以作为DNA疫苗作进一步的研究。结论 成功构建真核细胞表达载体 pcDNA3-Eg95。

膀胱移行细胞癌中Survivin的表达与Fas/FasL表达的关系

目的:探讨在膀胱移行细胞癌中Survivin的表达与膀胱移行细胞癌病理分级及Fas/FasL系统之间的关系。方法:用免疫组织化学方法检测64例膀胱移行细胞癌、15例膀胱良性病变和12例正常膀胱黏膜中Survivin、Fas、FasL的表达。结果:在93.8%膀胱移行细胞癌和66.7%膀胱良性病变Survivin表达阳性,正常膀胱黏膜组织Survivin无表达,3组比较差异有统计学意义(P<00.1),且Survivin的表达与膀胱癌的分级密切相关。Fas在3组中的表达率分别为50%、80%和100%,FasL在3组中的表达率分别为90.6%、60%和16.7%。Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达上调,并与Fas/FasL的表达密切相关。结论:Survivin与膀胱癌的恶性度有关,其可能通过与Fas/FasL系统协同作用共同参与了膀胱移行细胞癌的发生发展。